国家自然科学基金(81170928)
- 作品数：6 被引量：14H指数：2
- 相关作者：葛立宏赵玉鸣方颖曾素娟王旭更多>>
- 相关机构：北京大学口腔医院广州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 犬根尖牙乳头干细胞的分离培养和生物学特性被引量：4
- 2012年
- 目的:分离培养比格犬(Beagle犬)根尖牙乳头干细胞并研究其生物学特性。方法:拔除Beagle犬上颌年轻恒前牙,切取根尖牙乳头,采用酶消化法分离培养Beagle犬根尖牙乳头细胞,进行成纤维细胞克隆形成实验、生长曲线测定、多向分化能力研究及间充质干细胞相关表面标记物STRO-1、CD146和CK的表达分析,并将其移植至免疫缺陷鼠皮下观察矿化组织的形成。结果:Beagle犬根尖牙乳头组织中存在一群具有高度增殖能力的细胞,在相同培养条件下,其克隆形成率明显高于人根尖牙乳头干细胞,差异具有统计学意义(P<0.001);所获得Beagle犬根尖牙乳头干细胞具有成骨、成脂和成软骨等多向分化能力;在体外经成骨诱导后可形成矿化结节,成脂诱导后可形成脂滴,成软骨诱导后免疫组织化学染色Ⅱ型胶原阳性表达;同时该群细胞STRO-1和CD146阳性表达,而CK阴性表达;与羟基磷灰石混合移植于免疫缺陷鼠皮下可形成矿化组织和牙髓-牙本质复合体样结构。结论:Beagle犬根尖牙乳头中存在具有高增殖能力和多向分化能力的根尖牙乳头干细胞。
- 杨杰赵玉鸣王文君贾维茜葛立宏
- 关键词：细胞增殖多向分化
- 碱性成纤维生长因子促进牙龈间充质干细胞增殖作用的研究被引量：3
- 2016年
- 目的：体外研究碱性成纤维生长因子（b FGF）促进牙龈间充质干细胞（GMSCs）增殖的作用。方法：酶消化法获得原代GMSCs,克隆化培养后进行干细胞鉴定。取第4代GMSCs,以含有10%胎牛血清的α-MEM作为基础培养基,分别加入0、0.5、1、5、10、20 ng/ml 5种不同浓度b FGF培养1-9 d,用CCK-8法检测细胞增殖。结果：GMSCs可以通过酶消化法获得,具有干细胞特性;0.5-20 ng/ml的b FGF均能促进GMSCs的增殖,在0.5-10 ng/ml范围内促增殖作用随浓度增加和培养时间延长而增强。结论：b FGF对GMSCs增殖能力具有浓度依赖性和时间依赖性促进作用。
- 方颖曾素娟王旭葛立宏
- 关键词：碱性成纤维生长因子间充质干细胞细胞增殖
- 碱性成纤维生长因子对牙龈间充质干细胞生物学性能的影响被引量：2
- 2015年
- 目的：体外研究碱性成纤维生长因子（b FGF）对牙龈间充质干细胞（GMSCs）生物学特性的影响。方法：酶消化法获得原代人牙龈间充质干细胞（h GMSCs）,并采用有限稀释法进行克隆纯化培养。取第3代h GMSCs,观察5~20 ng/m L不同浓度b FGF对h GMSCs增殖的影响;观察10 ng/m L b FGF对h GMSCs克隆形成能力和ALP活性的影响;通过茜素红染色、油红0染色,观察10 ng/m L b FGF对h GMSCs体外成骨、成脂分化能力的影响,并RT-PCR检测各成骨、成脂分化相关基因的表达水平;同时采用流式细胞术检测10 ng/m L b FGF对h GMSCs表面标志物STRO-1表达的影响。结果：10 ng/m L的b FGF对h GMSCs的增殖、干细胞表面标志物STRO-1的表达、h GMSCs克隆形成率、脂滴形成量以及LPL、PPARγ各成脂基因的表达水平均有明显的促进作用（P〈0.05）;但对h GMSCs的ALP活性,及其成骨分化过程中矿化结节的形成量、各成骨相关基因（ALP、OCN、BSP）的表达水平均有明显的抑制作用（P〈0.05）。结论：在一定的培养条件下,b FGF可增加h GMSCs的干细胞表面标志物的表达、促进h GMSCs的增殖能力;并对h GMSCs的多向分化能力起调节作用。
- 方颖曾素娟余湜葛立宏
- 外周神经胶质细胞:牙髓干细胞的新来源被引量：2
- 2015年
- 来源于早期外胚间充质组织头部的神经嵴细胞迁移衍生出牙髓间充质干细胞,随后这些细胞产生牙髓细胞和成牙本质细胞。神经胶质细胞是另外一个神经嵴细胞衍生迁移而形成的细胞系。神经胶质细胞有广泛的分化发育潜能,研究发现神经胶质细胞可以分化为神经细胞和牙髓间充质干细胞,并且神经胶质细胞的不同分化发育阶段间可以互相转变。通常认为,大多数组织中的间充质干细胞来源于血管周细胞,但有研究发现相当一部分牙髓间充质干细胞来源于外周神经相关的神经胶质。本文通过对神经嵴细胞、牙髓间充质干细胞和神经胶质细胞的分化发育以及神经胶质细胞的衍生细胞的概述,介绍牙髓再生领域一种新的更有前景的牙髓间充质干细胞来源。
- 刘一迪葛立宏
- 关键词：神经嵴施万细胞神经胶质
- 比格犬牙髓干细胞的培养与鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的应用经典的人牙髓干细胞分离培养方法证明比格（Beagle）犬牙髓干细胞的存在，以期为大型动物的牙源性干细胞性质及其应用研究提供基础。方法获取比格犬健康恒牙牙髓组织，应用分散酶进行消化培养获得细胞，并通过观察其生物学特性、多向分化能力及干细胞相关表面标志物的表达等方法进行鉴定。结果经酶消化法获得的比格犬牙髓干细胞形态与人牙髓干细胞形态相似，呈典型的成纤维细胞形态；比格犬牙髓干细胞的牙龈成纤维细胞集落形成率为150个集落／10。个细胞，显著高于人牙髓干细胞的牙龈成纤维细胞集落形成率（60个集落／10。个细胞），差异有统计学意义（P〈0．001）；比格犬牙髓干细胞具有多向分化能力，在体外经诱导可以形成矿化结节、脂滴和成软骨细胞，同时比格犬牙髓干细胞表达间充质干细胞相关表面标志物基质细胞抗原（STRO-1）、CDl46、碱性磷酸酶、波形蛋白、细胞角蛋白18及神经上皮干细胞蛋白（nestin）。结论本项研究证实了比格犬牙髓组织中存在牙髓干细胞，并具有增殖活跃的特性和多向分化的潜能。
- 王媛媛赵玉鸣葛立宏
- 关键词：干细胞动物集落形成单位测定
- 基质细胞衍生因子1对人牙髓干细胞增殖、迁移和成牙本质能力的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:对比基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)和粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)对人牙髓干细胞(dental pulp stem cell,DPSC)的体外增殖、迁移和成牙本质能力的影响。方法:分别在培养基中加入100μg/L SDF-1或100μg/L G-CSF,采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)和集落形成实验(colony-forming unit,CFU)检测SDF-1和G-CSF对DPSC增殖的影响;采用划痕实验和Transwell迁移实验检测两者对DPSC迁移能力的影响;对DPSC进行成牙本质诱导,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色、测定ALP活性、茜素红染色和real-time RT-PCR检测成牙本质相关基因的表达,以检测两者对DPSC体外成牙本质能力的影响。结果:SDF-1和G-CSF能够轻度提高DPSC的增殖及集落形成能力,但差异无统计学意义。加入SDF-1或G-CSF的实验组划痕汇合速率明显高于对照组(P<0.01),但两种因子间差异无统计学意义。Transwell迁移实验中,对照组每视野的迁移细胞数量为(5.0±1.4)个,SDF-1组每视野的迁移细胞数量为(24.3±6.8)个,G-CSF组每视野的迁移细胞数量为(11.8±3.3)个,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。经成牙本质诱导后,实验组细胞ALP染色加深,ALP活性上升,矿化结节形成数量增加,成牙本质相关基因的表达均显著高于对照组。结论:SDF-1对DPSC的增殖能力影响不显著,但能明显提高DPSC的迁移能力和成牙本质分化能力,效果优于G-CSF。
- 温泉赵玉鸣王媛媛王旭凌龙葛立宏
- 关键词：趋化因子CXCL12牙髓成体干细胞
