国家科技重大专项(20035250322)
- 作品数：3 被引量：31H指数：2
- 相关作者：夏光敏薛哲勇支大英赵军胜陈永喆更多>>
- 相关机构：山东大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 青苗碱谷与高冰草的体细胞杂交及杂种性质鉴定被引量：5
- 2005年
- 将高冰草(Agropy romelongalum HostNevski)原生质体用强度为380μW/cm2的紫外线分别照射0s、30s、1min、2min后作为融合供体;而未经射线处理的青苗碱谷(SetariaitalicaBeaur)原生质体作为融合受体,利用PEG方法诱导融合.对再生克隆进行形态学和染色体观察,并用同工酶、RAPD、5SrDNA间隔序列和叶绿体微卫星DNA(SSR)进行杂种性质鉴定.结果证明融合产物具有双亲基因组,高频率地形成了体细胞杂种.
- 张晓红夏光敏陈永喆
- 关键词：高冰草紫外线体细胞杂交
- 拟南芥DREB 1A转录因子的原核表达和多克隆抗体制备被引量：1
- 2007年
- 采用PCR技术,从质粒pCAMBIA 1301/DREB 1A中扩增拟南芥DREB 1A转录因子的编码序列,并将其插入原核表达载体pGEX-4T-1中诱导表达,获得分子量约50.4 kDa的融合蛋白,经融合蛋白纯化酶切后免疫家兔获得DREB 1A转录因子特异性的多克隆抗体,经酶联免疫吸附测定表明,所制备的多克隆抗体的稀释倍数为25 600时,显色仍清晰可见。
- 范玉清刘恒任伟夏光敏
- 关键词：原核表达多克隆抗体酶联免疫吸附测定
- 根癌农杆菌介导的高羊茅遗传转化研究被引量：25
- 2005年
- 采用携带卡那霉素抗性基因nptⅡ和Na+/H+反向运输AtNHX1基因的表达载体pROK2/AtNHX1(带有35S启动子)和pROK2U/AtNHX1(带有ubi1启动子)的根癌农杆菌AGL1和GV3101,对4个品种高羊茅下胚轴来源的胚性愈伤组织进行了遗传转化。胚性愈伤组织经根癌农杆菌感染和共培养后,用50～150mg/L巴龙霉素筛选抗性愈伤组织,获得1126棵再生植株,用10～20mg/L卡那霉素进一步筛选再生植株,总共得到525棵绿色抗性植株。抗性植株的总DNA用AtNHX1基因的特异引物进行PCR检测,其中21棵为PCR阳性,最高转化频率为1.77%。Southern杂交结果证实,外源基因以低拷贝整合到高羊茅的基因组中,实验发现,在不同品种之间转化效率有所差异。
- 赵军胜支大英薛哲勇夏光敏
- 关键词：高羊茅ATNHX1基因根癌农杆菌转基因植株
