广东省医学科学技术研究基金(A2008314) 作品数:2 被引量:3 H指数:1 相关作者: 尹辉 龚非力 龚权 熊平 杨衡 更多>> 相关机构: 广东药学院 华中科技大学 免疫学教研室 更多>> 发文基金: 广东省医学科学技术研究基金 博士科研启动基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
小鼠sST2基因真核表达及其对LPS活化RAW264.7巨噬细胞的调节作用 被引量:3 2009年 目的:克隆并构建含小鼠sST2和人IgGFc融合基因的真核表达质粒,初步探讨其表达产物sST2-Fc融合蛋白对LPS刺激小鼠巨噬细胞生物学活性的影响。方法:借助RT-PCR技术,从小鼠脾脏总RNA中扩增全长sST2cDNA,构建sST2与hIgGFc段融合基因的真核表达载体(psST2-Fc)。应用脂质体将重组质粒psST2-Fc转染CHO细胞,经G418筛选,获得稳定表达sST2-Fc融合蛋白的CHO细胞株。细胞培养上清经蛋白A亲和层析纯化后,采用Western blot进行鉴定,应用FACS检测sST2-Fc与RAW264.7巨噬细胞表面相应受体结合情况;ELISA法检测sST2-Fc对LPS刺激RAW264.7巨噬细胞分泌TNF-α和IL-6的影响。结果:测序证实克隆和构建的小鼠sST2-FccDNA阅读框序列正确,Western blot证实sST2-Fc融合蛋白的表达,sST2-Fc抑制LPS诱导巨噬细胞分泌的炎性细胞因子TNF-α和IL-6。结论:成功构建sST2-Fc融合基因并获得稳定表达,sST2-Fc通过与其特异性受体结合可抑制巨噬细胞介导的炎性反应。 尹辉 龚权 杨衡 熊平 郑芳 龚非力关键词:真核表达 RAW264.7 IL-6 mTOR调节CD4+T细胞亚群分化及功能的研究进展 2012年 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)属于磷脂酰肌醇激酶相关激酶蛋白质家族成员,是一种非典型丝氨酸/苏氨酸激酶。mTOR可整合来自营养、能量、生长因子和环境压力对细胞的刺激信号,调节下游蛋白p70S6K和4E-BP1活性而影响细胞生长。CD4+T细胞是一群具有重要免疫调节功能的淋巴细胞,其中不同亚群在机体免疫应答中的作用存在明显差异。近来研究证实,mTOR信号在CD4+T细胞亚群分化发育及功能活性中发挥重要的调节作用。 胡世莲 张伯彬 尹辉 古宏标关键词:MTOR CD4+T细胞 TREG细胞 分化