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靶向B7-H3基因RNA干扰慢病毒的构建及人胰腺癌PaTu8988稳定感染细胞株的建立: 2013年; 目的构建靶向人B7同源性3（B7-H3）基因的小发夹RNA（shRNA）的慢病毒载体，并建立稳定感染的胰腺癌PaTu8988细胞株。方法根据GenBank提供的B7-H3cDNA序列，设计4条靶向B7-H3的siRNA序列，构建重组干扰质粒pGCSIL-GFP-B7-H3-shRNA。将重组干扰质粒和过表达B7-H3质粒共同转染293T细胞，经蛋白质印迹法筛选出干扰效果最佳的重组干扰质粒。该质粒经慢病毒包装，并感染胰腺癌PaTu8988细胞株，建立稳定低表达B7-H3细胞株。应用实时定量PCR及蛋白质印迹法检测细胞B7-H3基因的表达抑制率。结果携带干扰效果最好的shRNA的慢病毒感染PaTu8988细胞，建立了稳定低表达B7-H3基因的PaTu8988细胞株，其B7-H3mRNA表达的抑制率达96．8％，B7-H3蛋白表达的抑制率达88．1％。结论成功构建了人B7-H3-RNAi的慢病毒载体，并建立了稳定感染的低表达B7-H3基因的PaTu8988细胞株。; 赵鑫张光波李智干文娟朱东明赵华张子祥李德春; 关键词：B7-H3 RNA干扰慢病毒感染

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江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(CXZZll0125)