广东省医学科学技术研究基金(A2008331)
- 作品数：11 被引量：46H指数：6
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- 氟对大鼠切牙细胞Fas信号通路的作用研究被引量：6
- 2011年
- 目的研究氟对大鼠切牙细胞Fas表达及胱天蛋白酶（caspase）3和easpase-8活性和细胞凋产的影响，以期进一步探讨氟对牙齿的作用以及氟斑牙的发生机制。方法将40只SD大鼠按随机数字表法随机分为4组，每组10只。低剂量染氟组（低氟组）、中剂量染氟组（中氟组）和高剂量染氟组（高氟组）分别饮用以蒸馏水配制的含10、50和100mg／LNaF的高氟水；对照组饮用不添加NaF的蒸馏水；在60、90d时各组分别处死5只动物。用免疫组化法检测Fas的表达，采用酶标仪检测easpase-3和caspase-8的活性，用流式细胞术检测大鼠切牙细胞凋亡。结果在染氟60d时，对照组、低氟组、中氟组及高氟组的Fas表达结果分别为：0．1819±0．0025、0．2120±0．0084、0．2283±0．0183及0．2818±0．0233；在染氟90d时，对照组、低氟组、中氟组及高氟组的Fas表达结果分别为：0．2077±0．0289、0．2216±0．0105、0．2377±0．0059及0．2775±0．0088。大鼠切牙细胞Fas表达和caspase-3活力随染氟剂量增高而增强，存在显著的剂量-效应关系，实验60及90d时Fas的相关系数分别为0．9728（P〈0．01）和0．9889（P〈0．01）；easpase-3的相关系数分别为0．9533（P〈0．01）和0．9849（P〈0．01）。在染氟90d时，大鼠切牙细胞凋亡率和caspase-8活力随染氟剂量增高而增强，凋亡率和easpase-8的相关系数分别为0．9733（P〈0．01）和0．9928（P〈0．01）。在染氟60和90d时，大鼠切牙细胞Fas表达与easpase-3活力之间存在明显相关关系，相关系数分别为0．9619（P〈0．01）和0．9912（P〈0．01）；在染氟90d时，大鼠切牙细胞Fas表达与凋亡率和caspase-8活力之间也有明显的相关关系，Fas与凋广率和easpase-8的相关系数分别为0．9841（P〈0．01）和0．9767（P〈0．01）。结论在10、50和100mg／LNaF剂量条件下染氟60和90d，大鼠切牙细胞Fas表达增强并介导caspase激活�
- 贺凌飞邹志辉钟苑芳谢谦潘宣余日安
- 关键词：氟抗原CD95半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶细胞凋亡
- 细胞增殖和DNA损伤在大鼠氟斑牙形成中的作用研究被引量：7
- 2011年
- 目的:研究在氟中毒引起氟斑牙时,氟对大鼠切牙细胞增殖和DNA损伤的影响。方法:给雄性SD大鼠饮用含10,50,100mg/LNaF的高氟水60d和90d,制备氟斑牙模型,用流式细胞术检测大鼠切牙细胞增殖周期的变化,用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤。结果:雄性SD大鼠饮用含50,100mg/LNaF的高氟水60d和90d,血清氟含量较对照组显著增高,P<0.05,具有较好的剂量-效应关系,相关系数分别为:0.9957(P<0.01)和0.9880(P<0.05)。在50,100mg/LNaF剂量条件下,大鼠切牙呈现典型的氟斑牙改变。低氟组(10mg/LNaF)大鼠60d和90d,均没有明显氟斑牙形成。在10,50和100mg/LNaF的剂量条件下染毒60d和90d,大鼠切牙细胞出现明显的DNA损伤,Olive尾距较对照组显著增高(P<0.05),而且在相同剂量条件下,染毒90d时的Olive尾距值比染毒60d时的Olive尾距值大(P<0.05)。在10,50和100mg/LNaF的剂量条件下染毒60d,大鼠切牙细胞增殖周期变化主要表现在,低氟组G2/M细胞显著减少,中氟组和高氟组的G2/M细胞明显增多。染毒90d,大鼠切牙细胞增殖周期却没有明显改变。结论:在氟中毒引起氟斑牙的过程中,大鼠切牙细胞增殖周期改变和DNA损伤发挥作用,但详尽机制仍需深入探讨。
- 贺凌飞邹志辉钟苑芳谢谦潘宣余日安
- 关键词：氟氟斑牙细胞增殖DNA损伤
- 氟对大鼠切牙细胞凋亡以及Caspase-3和Caspase-8活力的影响被引量：7
- 2011年
- 目的研究在氟中毒引起氟斑牙时,氟对大鼠切牙细胞凋亡、天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)和Caspase-8活力的影响。方法将20只健康成年SPF级雄性SD大鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和低(10 mg/L)、中(50 mg/L)和高(100 mg/L)浓度NaF染毒组,每组5只。采用自由饮水方式进行染毒,每只每日饮水量约为40 ml,连续染毒120 d。采用流式细胞术检测大鼠切牙细胞凋亡率和细胞增殖周期的变化,采用酶标仪检测Caspase-3和Caspase-8的活力。结果随着NaF染毒浓度的升高,大鼠切牙细胞的凋亡率以及Caspase-3和Caspase-8活力均呈明显的增高趋势(凋亡率:r=0.923 9,P<0.01;Caspase-3:r=0.966 6,P<0.01;Caspase-8:r=0.932 2,P<0.01)。大鼠切牙细胞凋亡率与Caspase-3和Caspase-8活力均呈显著的正相关(Caspase-3:r=0.798 3,P<0.05;Caspase-8:r=0.975 3,P<0.01)。与对照组比较,中浓度NaF染毒组大鼠切牙细胞G2/M细胞构成比下降,高浓度NaF染毒组S期细胞构成比下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组大鼠切牙细胞G0/G1细胞构成比间比较,差异无统计学意义。各组大鼠切牙细胞DNA相对含量(DNA related content,DNARC)和细胞增殖指数(proliferation index,PI)间比较,差异均无统计学意义。结论 Caspase介导的细胞凋亡在氟斑牙形成过程中发挥重要作用。
- 贺凌飞邹志辉钟苑芳谢谦潘宣余日安
- 关键词：氟细胞凋亡
- 转录因子NF-E2相关因子2-抗氧化转录元件信号通路组成与激活机制被引量：15
- 2010年
- 钟苑芳贺凌飞余日安
- 关键词：NRF2
- 硒对氟致小鼠成釉细胞DNA损伤的作用研究被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨硒对氟致小鼠成釉细胞DNA损伤的拮抗作用。方法:小鼠成釉细胞未经氟化钠处理为对照组;以氟化钠浓度分别为0.25,0.50,1.00,2.00,4.00mmol/L处理作为单独染氟组;以2.50,5.00,10.00μmol/L Na2SeO3为单独染硒组;以2.50,5.00,10.00μmol/L Na2SeO3+0.25,0.50,1.00,2.00,4.00mmol/L氟化钠为联合作用组。细胞作用24h后,采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测DNA单链断裂情况。结果:与对照组相比,单独染硒组小鼠成釉细胞的尾长、Olive尾矩、尾DNA%、尾长/头长值显著性升高(P<0.05),而单独染硒组以上指标均明显下降(P<0.05)。2.50,5.00,10.00μmol/L Na2SeO3+氟化钠联合作用小鼠成釉细胞的尾长、Olive尾矩、尾DNA%、尾长/头长值明显低于对照组和相同剂量单独染氟组(P<0.05),且高于相应剂量的单独染硒组(P<0.05)。与2.50μmol/L Na2SeO3+氟化钠联合染毒组比较,5.00,10.00μmol/L Na2SeO3+各剂量氟化钠联合作用组Olive尾矩均升高(P<0.05)。结论:过量摄入氟化物可导致小鼠成釉细胞DNA损伤,而适量的硒对氟致DNA损伤有一定的拮抗作用,且实验浓度为2.50μmol/L时其拮抗效果较好。
- 贺凌飞周雪琼钟炜轲李光先谢谦陈志添韦小丽邓睿思林绮妍董彩艳余日安
- 关键词：硒氟成釉细胞DNA损伤
- 锌对氟诱导小鼠成釉细胞DNA损伤的影响被引量：4
- 2012年
- 目的研究锌与氟联合作用对小鼠成釉细胞DNA损伤的影响。方法体外培养小鼠成釉细胞,分别设立对照组和0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L氟化钠单独染毒组及5.00、10.00、20.00μmol/L硫酸锌单独染毒组以及0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L氟化钠+5.00、10.00、20.00μmol/L硫酸锌联合染毒组。小鼠成釉细胞经硫酸锌预处理24 h后,再与氟化钠联合作用。染毒24 h后收获细胞,采用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测DNA损伤情况。结果与对照组比较,氟化钠单独染毒小鼠成釉细胞的尾长、Olive尾矩、尾DNA%、尾长/头长值均明显升高(P<0.05),而硫酸锌单独染毒组以上指标均明显下降(P<0.05)。硫酸锌+氟化钠联合作用小鼠成釉细胞的尾长、Olive尾矩、尾DNA%、尾长/头长值低于对照组与相同剂量氟化钠单独染毒组(P<0.05)。与相同剂量氟化钠+10μmol/L硫酸锌联合染毒组比较,5.00和20.00μmol/L硫酸锌+氟化钠联合染毒组Olive尾矩均较高(P<0.05)。结论适量的锌对氟致小鼠成釉细胞DNA损伤有拮抗作用。
- 杨莉萍周雪琼贺凌飞钟炜轲叶斯阳余日安
- 关键词：锌氟成釉细胞DNA损伤
- 氟对大鼠氟斑牙形成和成釉细胞DNA损伤的研究被引量：12
- 2010年
- 目的:研究在氟中毒引起氟斑牙时,氟对大鼠切牙成釉细胞DNA损伤的影响。方法:给雄性SD大鼠饮用含10、50、100mg/LNaF的高氟水120d,制备氟斑牙模型,用单细胞凝胶电泳检测DNA的损伤。结果:雄性SD大鼠饮用高氟水后,血清氟含量较对照组显著增高,P<0.05。饮水氟含量与血清氟含量的相关系数为0.9153(P<0.05),具有较好的剂量-效应关系,大鼠切牙呈现典型的氟斑牙改变。在50mg/LNaF的剂量条件下,大鼠切牙成釉细胞彗星长与对照组比较,P<0.05。在100mg/LNaF的剂量条件下,彗星长、Olive尾距、尾分布距与对照组比较,P<0.05,而尾长值虽比对照组增加,但P>0.05。低剂量染氟组(10mg/LNaF)大鼠切牙成釉细胞DNA损伤情况与对照组比较,没有显著性差异(P>0.05)。结论:在氟中毒引起氟斑牙的过程中,大鼠切牙成釉细胞发生明显的DNA损伤。
- 贺凌飞邹志辉钟苑芳谢谦潘宣余日安
- 关键词：氟氟斑牙DNA损伤
- 枸杞多糖对氟诱导小鼠成釉细胞DNA损伤影响
- 2013年
- 目的研究枸杞多糖(LBP)对氟化钠(NaF)致小鼠成釉细胞DNA损伤的影响。方法 离体培养小鼠成釉细胞,2个处理因素为NaF染毒(含浓度为0.00、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L 6个水平)和LBP预处理(含质量浓度为0.00、100.00、200.00、400.00 mg/L 4个水平),6×4析因设计,2因素各水平全面组合共分24组,以浓度为0.00mmol/L NaF+质量浓度为0.00 mg/L LBP组为对照组。小鼠成釉细胞经LBP预处理24 h后,再给予NaF染毒,24 h后收获细胞,采用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤情况。结果 分别以0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L NaF单独染毒的小鼠成釉细胞尾长、Olive尾距、尾部DNA%、尾长/头长值均高于对照组(P<0.05,P<0.01或P<0.001)。析因设计方差分析结果显示,LBP和NaF存在交互作用,差异均有统计学意义(P<0.001)。经质量浓度分别为100.00、200.00、400.00mg/L的LBP预处理后,在不同NaF染毒剂量的条件下,多数尾长、Olive尾距、尾部DNA%、尾长/头长值等DNA损伤指标值均低于相应剂量NaF单独染毒时的指标值(P<0.05,P<0.01或P<0.001)。结论 一定剂量NaF可致小鼠成釉细胞DNA损伤,LBP对氟诱导的小鼠成釉细胞DNA损伤起到一定的保护作用。
- 陈秉周雪琼贺凌飞周小燕陈慧芝钟炜轲叶斯阳余日安
- 关键词：枸杞多糖氟成釉细胞DNA损伤
- 氟斑牙形成的分子机制研究进展被引量：8
- 2011年
- 氟中毒（fluorosis）是由于通过饮水、食物和空气等途径长期摄入过量氟，导致人体中氟蓄积，从而引起以氟斑牙、氟骨症为主要特征的一种慢性全身性疾病。
- 钟炜轲贺凌飞余日安
- 关键词：氟氟斑牙成釉细胞
- 氟对肾脂质过氧化和细胞凋亡时间与剂量效应的研究被引量：3
- 2013年
- 目的阐明饮水氟含量与肾脏脂质过氧化和细胞凋亡的时间效应和剂量效应关系,初步探讨二者在氟中毒肾损伤发生、发展过程中的作用。方法在饮水中加入不同剂量的氟化钠喂饲大鼠60、90、120 d后,检测肾脏细胞中MDA含量及细胞凋亡水平。结果 90 d高氟组和120 d中、高氟组MDA含量较相同时间对照组显著升高,且氟致肾脏中MDA含量增高呈明显剂量-效应和时间-效应关系;不同染毒时间下,低、中、高剂量氟诱导肾脏细胞凋亡与相同时间对照组比较差异无统计学意义。同一剂量下,不同剂量组间肾脏中MDA含量和细胞凋亡水平未见显著性差异。结论过量氟可导致机体脂质过氧化作用增强,在120 d染氟周期,一定剂量氟不能诱导肾脏发生病理性凋亡,因此,脂质过氧化是氟中毒肾损伤的始动环节,且氟致肾脏损害很可能是继发于氟作用于DNA损伤检查点中的关键分子来达成。
- 邹志辉吴瑾吴桂莲郑树楷钟婉蓉钟兴发余日安
- 关键词：氟脂质过氧化细胞凋亡
