基础研究重大项目前期研究专项(2001CCC00600)
- 作品数：9 被引量：109H指数：6
- 相关作者：姜成林李文均徐丽华张永光唐蜀昆更多>>
- 相关机构：云南大学教育部中国科学院更多>>
- 发文基金：基础研究重大项目前期研究专项云南省自然科学基金云南省教育厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 产生大环聚酮类天然产物放线菌的分子筛选研究被引量：28
- 2003年
- 目的 建立一套简便、快速、高效的大环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系 ,为聚酮类药物筛选搭建一个新的技术平台 ;认识 PKS- I基因在不同环境放线菌群中的分布规律 ,为新药筛选中微生物资源的定向分离提供依据。方法 通过对大环聚酮类化合物生物合成途径所用的 I型聚酮合成酶氨基酸和核苷酸序列的同源性比较分析 ,设计了一对引物用于扩增 KS/ AT功能域约 1.6 kb目的基因片段 ,依据放线菌基因组中 I型 PKS合成酶基因的存在与否标定可能的大环聚酮类天然产物产生菌。结果 利用建立的大环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系对 98株嗜碱放线菌、99株链霉菌、46株嗜盐放线菌和 75 7株稀有放线菌进行了筛选 ,研究表明嗜碱放线菌、链霉菌、嗜盐放线菌和稀有放线菌 I型聚酮合成酶基因的阳性率分别为 2 6 .5 %、2 0 .4%、15 .2 %和 9.35 %。结论 利用组合放线菌基因组 DNA快速提取技术和 PKS- I基因兼并引物 PCR扩增技术建立了快速、简便、高效的大环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系 ,并对不同环境条件的放线菌菌群的PKS- I基因分布进行了研究 ,结果不仅表明了放线菌 PKS I聚酮合成酶分布的广泛性 ,而且表明极端环境放线菌 ,尤其是嗜碱放线菌是大环聚酮类化合物潜在的丰富资源 ,为新药筛选有效菌源的确定提供了?
- 徐平李文均张永光唐蜀昆高惠英徐丽华贺秉坤姜成林
- 关键词：聚酮合成酶聚合酶链反应极端环境放线菌
- 嗜盐放线菌的研究进展被引量：30
- 2002年
- 嗜盐放线菌是极端微生物的重要组成部分 ,也是一类极具应用前景的微生物资源。就嗜盐菌的分类标准、嗜盐放线菌的分离、分布及系统学研究的历史、现状及其发展趋势、应用前景进行了概述。同时还讨论了嗜盐放线菌的分离及其生理学。
- 张永光李文均姜成林张忠泽
- 关键词：极端微生物嗜盐放线菌
- 一株具抗菌活性放线菌菌株YIM31249~T的分离和鉴定被引量：3
- 2003年
- 从云南洱源采集的土壤样品中分离到1株链霉菌YIM31249TT.该菌株具有很强的抗菌活性.通过对其进行的包括形态、生理生化特性、细胞壁化学组份以及16SrDNA序列等方面的研究,确定其为链霉菌属的一个亚种,我们将其命名为生黑孢链霉菌洱源亚种(Streptomycesmelanosporofacienssubsperyuanensis).菌株YIM31249T气生菌丝和基内菌丝均很丰富,孢子链较长且为螺旋状,部分孢子链螺旋成假孢囊,孢子表面粗糙不带刺,基丝不断裂.
- 李勇李文均徐丽华姜成林
- 1株具抑制一氧化氮合成酶活性放线菌菌株的分离和鉴定被引量：2
- 2004年
- 从云南河口采集的土壤中分离到1株稀有放线菌YIM30243T.该菌株具有很强的抑制一氧化氮(NO)合成酶活性.通过对其进行的包括形态、生理生化特性、细胞壁化学组分以及16SrDNA序列等方面的多相分类研究,确定其为诺卡氏菌属的1个新种,我们将其命名为白色诺卡氏菌(Nocardiaalbasp.nov.).该菌株在大多数培养基上生长良好,气生菌丝呈黄白色至粉红白色,基内菌丝黄白至黄褐色.气生菌丝、基内菌丝均呈不规则断裂.
- 李文均姜怡王栋Reiner M Kroppenstedt徐丽华姜成林
- 关键词：一氧化氮合成酶诺卡氏菌稀有放线菌RDNANOS
- 1株嗜碱放线菌的生理学特性研究及其鉴定被引量：2
- 2003年
- 对从青海茶卡盐湖岸土样中分离到的1株生理较特殊的嗜碱放线菌YIM80305的生长pH范围,不同碱性物质KOH,K2CO3,NaOH,Na2CO3对其生长的影响,耐NaCl,KCl特性进行了研究.同时从形态,细胞壁类型,16SrDNA等方面进行了鉴定.结果发现YIM80305对Na+碱性物质有一定依赖性,对K+敏感,YIM80305可能是Streptomyces属的1个新种.
- 张永光唐蜀昆李文均徐丽华姜成林
- 关键词：嗜碱放线菌生理学特性放线菌
- 嗜盐放线菌生物学特性初步研究被引量：28
- 2003年
- 通过对从新疆 ,青海等地采集的盐碱土样中分离获得的 43株嗜盐或耐盐放线菌以及4株典型菌株的NaCl耐受实验 ,对不同浓度的Na+ ,K+ ,Mg2 + ,Ca2 + 的选择性实验及pH耐受实验进行了研究。发现耐盐放线菌对Na+ ,K+ ,Mg2 + 有广泛的适应性 ,只有少数耐盐放线菌能在较低浓度的CaCl2 条件下生长 ;嗜盐放线菌对Na+ 有广泛的适应性 ,多数嗜盐放线菌生长所需的Na+ 可被K+ ,Mg2 + 所替代 ,而不能被Ca2 + 所替代 ,少数嗜盐放线菌的生长离不开Na+ ,对Na+ 有高度的专一性 ,是专嗜Na+ 的嗜盐放线菌 ,说明不同嗜盐放线菌对Na+ ,K+ ,Mg2 + ,Ca2 + 的适应有选择性。因此 ,提出自然环境中是否也存在类似的专嗜K+ 或专嗜Mg2 + 的嗜盐放线菌的推测。无论是嗜盐还是耐盐放线菌其pH生长范围都在 6 0～1 0之间 ,生长最适pH7 0～ 8 0。另外 。
- 唐蜀昆李文均张永光徐丽华姜成林
- 关键词：极端环境嗜盐放线菌阳离子
- 产生芳香环聚酮类天然产物放线菌的分子筛选研究被引量：16
- 2005年
- 目的建立一套简便、快速、高效的芳香环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系,为聚酮类药物筛选搭建一个新的技术平台;认识PKS-II基因在不同环境放线菌群中的分布规律,为新药筛选中微生物资源的定向分离提供依据。方法通过对芳香环聚酮类化合物生物合成途径所用的II型聚酮合酶氨基酸和核苷酸序列的同源性比较分析,设计一对简并引物且以微波炉法提取的基因组DNA为模板扩增KS/CLF功能域约0.8kb目的基因片段,依据放线菌基因组中II型PKS合酶基因的存在与否标定可能的芳香环聚酮类天然产物产生菌。结果利用建立的芳香环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系对99株嗜碱放线菌、100株链霉菌、47株嗜盐放线菌和776株一般放线菌进行了筛选,研究表明链霉菌、嗜碱放线菌、嗜盐放线菌和一般放线菌II型聚酮合酶基因的阳性率分别为54%、29.3%、25.5%和24.1%。结论组合放线菌基因组DNA快速提取技术和PKSII基因简并引物PCR扩增技术建立了快速、简便、高效的芳香环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系并对不同环境条件的放线菌菌群的PKSII基因分布进行了研究。结果表明放线菌PKSII聚酮合酶分布具有广泛性;而且同时表明链霉菌是芳香环聚酮类化合物的最丰富来源;在极端环境放线菌中,嗜盐放线菌的PKSII基因在中度嗜盐放线菌分布的频率远高?
- 徐平李文均高慧英孙玉民张华徐丽华贺建功姜成林
- 关键词：聚酮合酶聚合酶链反应极端环境
- 嗜碱放线菌生理学特性的初步研究被引量：10
- 2004年
- 对从新疆、青海采集的盐碱土样中分离获得的 2 9株嗜碱放线菌 (alkaliphilicactino mycetes)及 1株模式菌株Nocardiopsisprasina的pH实验 ,不同碱性物质KOH、K2 CO3、NaOH、Na2 CO3对生长的影响 ,及对NaCl、KCl耐受性进行了研究。结果发现 ,少数嗜碱放线菌对Na+ 有一定的依赖性 ,对K+ 碱性物质敏感 ;一些嗜碱放线菌对CO32 敏感 ,NaCl、KCl对一些嗜碱放线菌的生长有抑制作用 ;4种碱性物质对Nocardiopsis菌株生长无影响 ,且它们可耐受高浓度NaCl、KCl。因此提出高碱性环境中是否存在K+ 、CO32 专一性依赖的嗜碱放线菌的推测。
- 张永光唐蜀昆李文均徐丽华姜成林
- 关键词：嗜碱放线菌
- PCR快速鉴定actinobacteria三种模板制备方法的比较被引量：10
- 2003年
- 目的 本研究旨在建立准确、简便、快速的放线细菌鉴定技术 ,为普通和极端环境放线细菌资源的调查和开发利用创造条件。方法 从放线细菌固体培养基上挑取少量菌体 ,用微波炉法快速制备基因组DNA作为PCR模板 ,与液体培养法得到的菌体以超声波法或冻融法制备的模板进行了PCR扩增效果的比较研究。结果 PCR检测结果表明微波炉法制备的模板可进行有效的体外扩增 ,目的条带特异 ,而超声波法或冻融法并不对所有菌株有效 ,并有非特异扩增产物产生。结论 组合微波炉法快速制备放线细菌基因组DNA技术和 2 3SrRNA特异插入序列PCR扩增技术建立了准确、简便、快速的actinobacteria鉴别体系。
- 徐平李文均徐丽华姜成林
- 关键词：ACTINOBACTERIA超声波法基因组DNA提取
