长春市科技计划项目(06GG150)
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 相关作者：李校堃庞实锋李洪志李海燕刘秀明更多>>
- 相关机构：吉林农业大学广东医学院中山大学更多>>
- 发文基金：高等学校科技创新工程重大项目长春市科技计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 油料种子在脂解途径中相关信号分子的研究进展
- 2010年
- 本文介绍了油体脂解途径中相关信号分子的研究进展。通过对信号分子进行荧光探针标记,利用荧光显微镜技术和共聚焦显微镜成像分析可以准确、迅速地对相关信号分子的定位和表达进行跟踪研究,从而揭示油体的生物学发生和分解机制。
- 柳月英薛萍杨晶刘秀明李营李海燕李校堃
- 关键词：种子萌发
- 酸性成纤维细胞生长因子植物表达载体的构建及转化烟草的初步研究被引量：2
- 2010年
- 为了降低aFGF的生产成本,结合植物生物反应器的优点,就aFGF在转基因烟草中的表达进行了探索。将aFGF基因插入植物表达载体pBI121中,获得了含有aFGF基因的植物表达载体pBI121-TΩAB-aF,利用农杆菌介导法将基因转化烟草,转基因烟草在含有卡那霉素和头孢霉素的培养基培养,获得具有卡那抗性的转基因烟草植株,通过PCR检测、RT-PCR检测及Western blot检测证实外源基因已经在烟草中成功表达。为植物生物反应器生产aFGF提供了理论基础。
- 蒋世翠王义李校堃韩秀文张美萍
- 关键词：酸性成纤维细胞生长因子烟草植物生物反应器
- VEGF基因油体表达系统构建及对拟南芥的遗传转化
- 2010年
- 为研究油体系统在植物中表达外源蛋白的优势,以油菜总DNA为模板,通过PCR得到油菜油体(Ycoil)及启动子序列(Ycprm)。同时,将多对合成的寡核苷酸链,通过PCR方法拼接得到血管内皮生长因子全长基因(VEGF)。以此为基础,构建Ycoil、Ycprm、VEGF融合表达载体p1390Ycprm-Ycoil-VEGF。将重组质粒转入农杆菌GV3101,并用花浸染法对拟南芥进行浸染。在含潮霉素(20mg/L)的1/2MS培养基上筛选转基因拟南芥种子(T0),获得了T1代抗性植株,通过PCR检测、SDS-PAGE检测和Western blotting检测,结果表明油菜油体及血管内皮生长因子的融合基因已经转入拟南芥中,并成功得到表达,转化率约为0.1%。
- 李洪志庞实锋李海燕薛萍刘秀明李营李巍肖艳双李校堃
- 关键词：油体拟南芥植物生物反应器
- 农杆菌介导的成纤维细胞生长因子-21基因转化甘蓝型油菜研究被引量：1
- 2010年
- 【目的】利用基因工程技术获得FGF21转基因油菜植株,为FGF21蛋白生产体系的建立奠定基础。【方法】将人源FGF21基因的cDNA序列,根据植物偏好密码子进行改造,并通过PCR拼接技术扩增FGF21全长基因,将该基因插入油菜油体特异表达载体,通过冻融法转到根瘤农杆菌LBA4404,叶盘法转化甘蓝型油菜"沪油15",并对转基因油菜进行PCR检测和Southern blot分析,最后对FGF21蛋白在转基因油菜种子中的表达的进行了Western blot分析。【结果】合成了FGF21全长基因,成功构建了含FGF21基因的植物双元表达载体p1390yoFGF21,并建立了油菜遗传转化体系。通过油菜遗传转化获得2株转基因植株,PCR扩增和Southern blot检测证实,重组FGF21基因已整合到油菜基因组中;Western blot分析检测显示,FGF21在转基因油菜种子蛋白中具有一定水平的表达量,并具有良好的抗原性。【结论】FGF21基因被成功整合到油菜基因组中,收获的T0代种子蛋白具有良好的抗原性。
- 李营庞实锋薛萍刘秀明付宏岐李洪志熊丽东潘国庆李海燕李校堃
- 关键词：农杆菌
- 金属硫蛋白基因转化黄瓜的研究
- 2009年
- 以黄瓜无菌苗子叶切段为外植体,通过叶盘转化法与根瘤农杆菌进行共培养建立了黄瓜的遗传转化体系。比较了不同苗龄,不同侵染时间对黄瓜离体再生的影响,并做了潮霉素敏感性测试。结果表明：苗龄3-4 d的子叶,侵染时间为15 min,潮霉素浓度为25 mg/L最适分化出抗性小苗。最终获得3株抗性植株,经过PCR和RT-PCR检测,初步确定均为阳性转化植株。
- 郑伟杨苹李洪志王艳芳徐岩庞实锋
- 关键词：黄瓜基因愈伤
