重庆市医学科研计划项目(04-2-147)
- 作品数:3 被引量:7H指数:1
- 相关作者:秦新月张沁丽彭彦殷成吕富荣更多>>
- 相关机构:重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学更多>>
- 发文基金:重庆市医学科研计划项目教育部留学回国人员科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 编码大鼠Nogo受体mRNA的shRNA重组腺病毒载体的构建和鉴定被引量:6
- 2008年
- 目的:构建Nogo受体(NgR)特异性shRNA重组腺病毒载体,为应用基因沉默技术从转录后水平进行缺血性脑损伤的基因治疗研究奠定基础.方法:将前期构建的大鼠Nogo受体mRNA的shRNA特异性真核表达载体pGenesil-1-shRNA的表达启动子U6连同shRNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack,酶切及DNA测序鉴定后,将含NgR基因的重组穿梭质粒pAdTrack-U6-shRNA经PmeI线性化后转化入pAdEasy-1感受态细菌.将pAd-U6-shRNA质粒经PacI线性化后转染293细胞,包装重组腺病毒Adeno-U6-shRNA,并进行PCR鉴定、PCR产物测序及病毒滴度测定.结果:结果证实pAdTrack-U6-shRNA及pAd-U6-shRNA质粒构建正确,收获病毒后的PCR及DNA测序结果证明Adeno-U6-shRNA包被成功.结论:成功构建了大鼠Nogo受体mRNA的shRNA重组腺病毒载体Adeno-U6-shRNA,将为应用基因沉默技术研究NgR在缺血性脑损伤后神经再生中的作用奠定基础.
- 张沁丽秦新月殷成彭彦
- 关键词:NOGO受体腺病毒
- 腺病毒介导Nogo受体特异性RNA干扰对大鼠脑缺血再灌注后轴突再生和神经行为的影响被引量:1
- 2009年
- 目的观察腺病毒介导Nogo受体特异性RNA干扰对大鼠脑缺血再灌注后轴突再生及神经行为的影响。方法采用线栓法制作大鼠缺血再灌注模型,20只大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组和RNAi干预组、阴性对照组。术后24h、9周行CT测量脑梗死体积,术后行神经功能评分,示踪技术观察皮质红核束和皮质脊髓束。结果RNAi治疗后脑梗死体积较缺血再灌注组和阴性对照组没有明显变化(P〉0.05),而RNAi治疗3周后,神经功能有明显地恢复(P〈0.01),RNAi治疗9周后健侧皮质红核束发出侧枝支配病灶侧的数量明显增多(P〈0.01)。结论腺病毒介导NgR特异性RNAi可以增加来源于健侧皮质的轴突侧枝出芽,从而促进神经功能的恢复。
- 王敬秦新月张沁丽马秀华吕富荣
- 关键词:腺病毒轴突再生NOGO受体
- 中枢神经系统轴突再生障碍信号分子的研究进展
- 2006年
- 中枢神经系统损伤后轴突再生失败的关键性因素是微环境的抑制作用,目前已经证实存在于微环境的抑制分子主要是髓磷脂抑制分子,如Nogo-A、髓鞘相关糖蛋白和少突胶质细胞/髓鞘糖蛋白,现阶段对轴突再生抑制分子及其下游信号分子的进一步了解和证实为中枢神经系统损伤的治疗指示了新的思路和方向。本文着重对Nogo-A及其信号转导通路各个层面的研究概况作一综述。
- 张沁丽秦新月彭彦
- 关键词:轴突再生NOGO-A