吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目([2011]49)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：李公美刘可越钱爱东胡静涛李玉梅更多>>
- 相关机构：吉林农业大学九江学院吉林大学更多>>
- 发文基金：吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 吉林白鹅α干扰素基因的原核表达及抗血清的制备被引量：1
- 2012年
- 采用PCR方法扩增了吉林白鹅ɑ干扰素(JL-GoIFN-α)成熟肽编码序列,将IFN-α片段定向插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组质粒pGEX-IFN-ɑ,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)的感受态细胞里,在IPTG诱导下表达可溶性的融合蛋白(GST-IFN-ɑ)。SDS-PAGE、Western-blot检测结果表明,重组吉林白鹅IFN-ɑ融合蛋白(rJL-GoIFN-α)的分子量大小约为43 ku,表达量占菌体总蛋白的25%。重组吉林白鹅α干扰素,经谷胱甘肽Sepharose-4B亲和柱层析纯化后,经过透析复性,得到纯化的目的蛋白,含量可达0.25 mg/mL。将复性蛋白免疫新西兰白兔3次,制备高滴度的鹅IFN-ɑ抗血清。本实验表达和纯化了鹅的IFN-ɑ,并制备了兔抗鹅的IFN-ɑ抗血清,为下一阶段鹅ɑ干扰素重组蛋白的应用奠定了基础。
- 李公美胡静涛李玉梅李茂辉闫金明刘可越钱爱东
- 关键词：吉林白鹅抗血清
- 吉林白鹅α干扰素在大肠杆菌中的表达及抗病毒活性检测被引量：2
- 2012年
- 用PCR方法扩增了吉林白鹅α干扰素(IFN-α)成熟肽编码序列,将IFN-α片段定向插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组质粒pGEX-IFN-α,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞里,在IPTG诱导下表达可溶性的融合蛋白(GST-IFN-α)。SDS-PAGE、Western-blot检测结果表明,重组吉林白鹅IFN-α融合蛋白(rGoIFN-α)的分子量大小约为43ku,能与IFN-α抗血清发生特异性结合反应。重组吉林白鹅α干扰素经谷胱甘肽Sepharose-4B亲和柱层析纯化后,在鸭胚成纤维细胞上抗鹅细小病毒的活性为3.32×105 U/mg,本试验结果表明,该表达系统能够表达重组鹅α干扰素,且表达的重组鹅α干扰素具有一定的抗病毒活性。
- 李公美李玉梅胡静涛刘可越钱爱东
- 关键词：吉林白鹅Α干扰素鹅细小病毒抗病毒活性
