湛江市科技攻关计划项目(2011C3104010)
- 作品数：12 被引量：50H指数：4
- 相关作者：欧阳乐军曾富华沙月娥黄真池梁卓玲更多>>
- 相关机构：湛江师范学院湖南农业大学国家林业局更多>>
- 发文基金：湛江市科技攻关计划项目广东省自然科学基金国家级星火计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 粗皮桉的组织培养与植株再生研究被引量：8
- 2013年
- 【目的】研究不同植物生长调节剂组合对粗皮桉茎段愈伤组织诱导及再生的影响,为建立粗皮桉再生体系和粗皮桉商品化育苗提供参考。【方法】以粗皮桉茎段为外殖体,通过对不同植物生长调节剂组合的优化,建立粗皮桉再生体系。【结果】在MS培养基上添加2.0 mg/L PBU和0.05 mg/L IAA,21 d后,外植体愈伤组织诱导率达98.4%;将愈伤组织接种在添加0.8 mg/L 6-BA和0.1 mg/L NAA的1/2MS培养基上,诱芽率高达86.0%;用1/2MS培养基添加0.8 mg/L PBU与0.1 mg/L NAA诱导粗皮桉不定芽增殖,用1/2MS培养基附加0.5 mg/L IBA和0.5 mg/L NAA诱导生根,炼苗15 d后,组培苗移栽到黄心土与腐殖质土质量比为1∶1的基质中,成活率高达95.0%。【结论】2.0 mg/L PBU和0.05 mg/L IAA是诱导粗皮桉愈伤组织的最适植物生长调节剂组合,添加0.8 mg/L 6-BA和0.1 mg/L NAA的1/2MS培养基诱芽效果最好,添加0.1 mg/L NAA、0.8 mg/L PBU组合时,芽增殖、生长情况较好,添加0.5 mg/L NAA、0.5 mg/L IBA组合时生根效果最佳。
- 沙月娥吴志华欧阳乐军黄真池曾富华李再峰
- 关键词：粗皮桉植物生长调节剂组合优化愈伤组织
- 尾巨桉愈伤组织蛋白质含量和氧化酶活性比较被引量：2
- 2014年
- 以尾巨桉(Eucalyptus urophylla×E.grandis)无性系DH32-29无菌苗的茎段为外植体,优化的激素组合的愈伤组织诱导率高,随后培养中愈伤组织分化出绿色、黄绿色、白色和褐色4种类型,绿色和部分黄绿色的为胚性愈伤组织,后两种为非胚性愈伤组织。分别测定不同类型愈伤组织的蛋白质含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性,结果表明,愈伤组织蛋白质含量从高到低为绿色、黄绿色、白色、褐色;胚性愈伤组织的SOD、POD和CAT活性显著高于非胚性愈伤组织,并且绿色愈伤组织3种酶活性均高于其他愈伤组织。
- 刘敏燕沙月娥欧阳乐军张润桃梁卓玲甘四明
- 关键词：愈伤组织超氧化物歧化酶(SOD)
- 广州一号桉树高效组培再生体系的建立被引量：9
- 2012年
- 以广州一号桉树优良无性系无菌苗茎段为外植体,通过对噻唑基脲类新型分裂素(N-phenyl-N'-[6-(2-chlorobenzothiazol)-yl]urea,PBU)等多种不同质量浓度植物生长调节剂组合的优化,进行愈伤组织诱导及再生研究。结果表明,在添加了2 mg.L-1PBU和0.06 mg.L-1IAA的改良MS培养基上,茎段外植体5 d后愈伤组织诱导率达100%;将愈伤组织接种在添加1 mg.L-16-BA和0.1 mg.L-1NAA的MS培养基上,诱芽率高达90%;随后,在添加了0.2 mg.L-1PBU与0.05 mg.L-1NAA的1/2MS培养基上诱导芽伸长,用1/2MS培养基附加0.2 mg.L-1IBA诱导生根,炼苗15 d后,以质量m(黄心土)∶m(腐殖质土)=1∶1为基质进行移栽,得到完整再生植株,成活率高达95%。
- 欧阳乐军沙月娥黄真池曾富华
- 关键词：愈伤组织诱导
- 桉树胚状体再生与遗传转化的研究进展被引量：11
- 2012年
- 文章综述了桉树胚状体发生过程中基因型、外植体材料、培养基、光照、植物生长调节剂种类与配比以及其他添加物对外植体胚性愈伤组织诱导以及胚状体发生的影响,探讨了影响桉树遗传转化体系建立的因素,并对近年来桉树胚状体再生和转基因研究进展进行了介绍。
- 沙月娥欧阳乐军彭舒黄真池陈信波曾富华
- 关键词：桉树胚状体植株再生
- 植物病原菌诱导表达载体构建及在烟草中的瞬时表达研究被引量：3
- 2013年
- 根据GenBank中植物病原物诱导型启动子碱基序列设计引物,以烟草基因组DNA为模板,扩增PPP3启动子。用PPP3替换pCAMBIA1301中与gus基因相连的35S启动子,构建重组质粒pCOMBIA+PPP3+gus后导入农杆菌GV3101。通过农杆菌介导的瞬时表达技术将受PPPs控制的gus基因导入烟草。分别接种青枯菌和水杨酸24 h后,烟草叶片中检测到gus基因转录效率分别提高了27.94,17.69倍。表明PPP3启动子具有本底表达水平低、诱导表达活性强的特点。
- 欧阳乐军黄真池沙月娥曾富华
- 关键词：诱导型启动子定量PCR
- 基本培养基对尾巨桉愈伤组织诱导及再生的影响被引量：2
- 2013年
- 为建立尾巨桉高效再生体系,研究基本培养基对尾巨桉再生的影响,以尾巨桉优良无性系无菌苗茎段为外植体,探讨MS、SDM和SPM 3种基本培养对尾巨桉愈伤组织诱导、不定芽分化以及增殖的影响。结果表明,在添加了2 mg/L PBU和0.05 mg/LIAA的MS培养基上,茎段外植体5 d后愈伤组织诱导率达96.3%以上;将愈伤组织接种在添加1 mg/L 6-BA和0.05 mg/L NAA的MS培养基上,诱芽率达91.8%,不同基本培养基对不定芽的增殖及伸长的影响差异达到极显著水平。
- 刘敏燕苏程瑜张润桃梁卓玲黄月权张晓明欧阳乐军
- 关键词：尾巨桉基本培养基愈伤组织诱导
- 保加利亚尖椒再生及遗传转化条件的优化被引量：4
- 2012年
- 为了提高辣椒子叶不定芽的伸长率和遗传转化效率,本研究以保加利亚尖椒子叶为外植体,通过正交试验分别对影响保加利亚尖椒子叶不定芽伸长的激素组合以及遗传转化参数进行了优化。结果表明:诱导不定芽伸长的最佳激素组合为0.2mg/LIAA+1.0mg/LGA3+0.1mg/LPBU,不定芽伸长率最高为60%;以5mg/L潮霉素为选择压,预培养时间为4d、共培养时间为2d、侵染时间为20min时,诱导的抗性不定芽比率最高。本研究建立的辣椒再生及遗传转化体系为辣椒转基因研究奠定一定的基础。
- 欧阳乐军李华贤王燕青曾富华
- 关键词：辣椒不定芽
- aiiA基因原核表达载体的构建与表达
- 2014年
- 【目的】构建aiiA基因的原核表达载体,并进行诱导表达,检测aiiA蛋白的抗病性,为进一步通过转基因技术培育转aiiA基因植株奠定基础。【方法】从pMDTM19-T Vector+aiiA质粒中酶切获得aiiA基因,将其与pGEX-4T-1表达载体连接构建重组原核表达载体pGEX-4T-1+aiiA,经双酶切及测序鉴定后,进行诱导表达,并对表达产物的功能进行鉴定。【结果】双酶切与PCR检测结果表明,重组原核表达载体pGEX-4T-1+aiiA构建成功。表达条件优化结果表明,在25℃下用0.2mmol/L IPTG诱导9h,aiiA蛋白的表达量最高。aiiA重组蛋白抑菌试验结果表明,其能够降解细菌的AHLs信号分子,猝灭细菌的群体感应,明显减弱病菌的致病力。转aiiA基因尾巨桉抗性检测结果表明,转基因植株抗性明显增强,表现为发病时间延迟,病情指数降低,评价为中等抗病水平。【结论】成功构建了aiiA基因原核表达载体,其诱导表达产物能猝灭细菌的群体感应,明显减弱病菌的致病力。
- 欧阳乐军梁卓玲黄真池沙月娥曾富华
- 关键词：AIIA基因N-酰基高丝氨酸内酯
- 转TSRF1基因尾叶桉的培育及其广谱抗病性
- 2013年
- 以尾叶桉U6无性系无菌种子苗下胚轴为外植体,通过对不同生长调节剂的优化组合,建立尾叶桉高效再生体系。应用正交试验设计,优化尾叶桉遗传转化体系。经PCR和Southern杂交检测表明,TSRF1基因已整合到尾叶桉基因组中;转基因植株灌根接种青枯菌后,转基因植株表现出发病延迟,抗性提高,抗性相关酶活性显著增强。转化植株离体叶片对疫霉菌抗性明显增强。荧光定量PCR的结果表明转基因植株接种致病菌后TSRF1基因表达量得到提高。研究结果表明,转TSRF1基因尾叶桉表现出一定的广谱抗病能力。
- 欧阳乐军刘媛黄真池曾富华
- 关键词：尾叶桉
- 苏云金芽孢杆菌aiiA基因的克隆及植物表达载体构建被引量：2
- 2011年
- N-酰基高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserine lactones,AHLs)是革兰氏阴性细菌致病过程中的关键信号分子,芽孢杆菌中广泛存在的aiiA基因编码AHL-Lactonase能够水解信号分子AHLs。利用PCR方法从苏云金芽孢杆菌中克隆了aiiA基因,序列分析表明该基因由753个碱基组成,编码含有250个氨基酸残基的蛋白质,核苷酸序列与已报道aiiA的同源性为89%～97%。将该基因连接到植物表达载体pCAMBIA1301中,成功构建了aiiA基因的植物表达载体pCAM-aiiA,为进一步通过转基因技术研究该基因的功能奠定了基础。
- 欧阳乐军沙月娥郭耀权邓玉金曾富华
- 关键词：苏云金芽孢杆菌AIIA基因植物表达载体
