中国博士后科学基金(2005038478)
- 作品数:4 被引量:35H指数:3
- 相关作者:孙建国周度金廖荣霞陈正堂张亮更多>>
- 相关机构:第三军医大学新桥医院第三军医大学北京博奥生物芯片有限责任公司更多>>
- 发文基金:中国博士后科学基金国家自然科学基金“十一五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- MicroRNA调控造血干细胞发育被引量:6
- 2008年
- 造血干细胞是目前研究最为深入的成体干细胞,是极富应用前景的研究领域,然而其维持自我更新以及多向分化潜能的分子机制尚不明.MicroRNA(miRNA)是一类崭新的调控性非编码小分子RNA,在监控生物体个体发育和细胞增殖、分化进程中起着重要作用.miRNA参与包括胚胎干细胞和多种成体干细胞的发育进程,人类造血干细胞及其发育过程中也存在特征性miRNA表达谱,参与调控造血干细胞发育进程,以miRNA为分子靶点的防治造血功能低下疾患的研究具有广阔的应用前景.
- 孙建国廖荣霞周度金
- 关键词:造血干细胞MICRORNA非编码RNA基因表达调控
- 基于基因芯片的乳腺癌干细胞miRNAs检测分析被引量:15
- 2007年
- 目的利用流式细胞仪(FACS)细胞分选技术从乳腺癌细胞株MCF-7中分选乳腺癌干细胞,并利用基因芯片进行其miRNAs表达谱分析。方法利用已知的乳腺癌干细胞的表面分子标志(CD44+ESA+CD24-/low),以相应的荧光标记抗体对细胞加以标记,FACS细胞分选获得乳腺癌干细胞,NOD-SCID移植瘤实验进行干细胞功能鉴定;分别提取细胞总RNA以及小分子RNA,经荧光标记后与miRNAs基因芯片杂交,获得乳腺癌干细胞miRNAs表达谱。结果从MCF-7中分选到约1%的CD44+ESA+CD24-/low细胞,NOD-SCID移植瘤实验表明其具有干细胞特性,基因芯片杂交获得20个乳腺癌干细胞相关miRNAs,其中4个为低表达,16个为高表达。结论乳腺癌干细胞具有自身特征性miRNAs,为进一步从干细胞层面研究乳腺癌发病机制及靶向治疗打下基础。
- 孙建国廖荣霞周度金陈正堂
- 关键词:肿瘤干细胞乳腺癌MIRNAS生物芯片
- 造血干细胞相关microRNAs的筛选及其促分化研究被引量:3
- 2007年
- 为了获得人脐血造血干细胞(HSCs)的microRNAs(miRNAs)表达谱,并对相关miRNAs功能进行初步鉴定.利用免疫磁珠(MACS)和流式细胞仪(FACS)细胞分选技术分离人脐血造血干细胞(HSCs),分别提取细胞总RNA并分离小分子RNA,经荧光标记后与miRNAs基因芯片杂交,获得HSCs的miRNAs表达谱,集落形成实验(CFC)研究在HSC中高表达miR-520h对HSC的促分化作用.成功分离人脐血CD34+细胞和HSC,经基因芯片杂交获得31个造血干细胞相关miRNAs,其中22个为低表达,9个为高表达;经实时定量RT-PCR验证miR-520h显著升高,CFC实验表明其可增加多种集落形成,具有促进HSC向祖细胞分化的作用.上述结果表明,人脐血HSC具有自身特征性miRNAs,参与并调控HSC生物学功能,为深入探讨miRNAs在造血系统发育中的作用打下基础.
- 孙建国廖荣霞张亮娄桂予周度金陈正堂
- 关键词:造血干细胞MIRNAS生物芯片实时定量PCR
- 乳腺癌miRNAs表达谱检测及初步分析被引量:12
- 2006年
- 目的制作哺乳动物micro RNAs(miRNAs)检测微阵列,筛选乳腺癌miRNAs表达谱并进行初步分析。方法利用已知的人及小鼠的miRNAs序列,设计了496条探针,制作miRNAs微阵列并验证其可靠性;培养乳腺癌细胞株MCF-7和正常乳腺上皮细胞株MCF-10A,分别抽提细胞总RNA,分离小分子RNA,经T4RNA连接酶荧光标记后与微阵列杂交,通过芯片扫描和数据分析,获得乳腺癌miRNAs表达谱。结果成功制作哺乳动物miRNAs微阵列,筛选获得57个乳腺癌相关miRNAs,其中,29个为低表达,28个为高表达。结论建立了哺乳动物miRNAs检测微阵列的技术平台,并筛选到乳腺癌miRNAs表达谱,为进一步研究其在乳腺癌发病机制中的作用打下基础。
- 廖荣霞孙建国张亮陈敏陈彬娄桂予周度金陈正堂
- 关键词:MIRNAS微阵列乳腺癌