国家重点基础研究发展计划(001cb51010201)
- 作品数：8 被引量：22H指数：3
- 相关作者：李晓红武学清郭应禄张晓王嵩更多>>
- 相关机构：北京大学第一医院中山医科大学附属第一医院北京大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金面向21世纪教育振兴行动计划更多>>
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- 钙对人卵母细胞皮质颗粒排放的调节及与经典型蛋白激酶C关系被引量：3
- 2005年
- 目的探讨经药物处理人卵母细胞,钙引起人卵母细胞皮质颗粒排放的机制。方法分别用蛋白激酶C (PKC)激活剂、抑制剂及钙离子载体处理人卵母细胞,使用激光共聚焦扫描显微镜观察PKC的转位及皮质颗粒的排放。结果使用PKC激活剂处理后,卵母细胞出现了明显的PKCα和γ的转位,但未观察到皮质颗粒的排放。钙离子载体 A23187可以引起明显的皮质颗粒的排放,但未出现PKC的转位。结论PKC不介导人卵母细胞内钙离子升高引起的皮质颗粒的释放。
- 武学清李晓红张晓郐艳荣王嵩程慧虹郭应禄
- 关键词：钙卵母细胞皮质颗粒蛋白激酶C
- 经典型蛋白激酶C在人卵母细胞成熟及受精过程表达研究被引量：2
- 2006年
- 目的通过检测经典型蛋白激酶C(cPKC)在人各期卵母细胞及受精卵中分布及转位,探讨cPKC在人卵母细胞成熟及受精中的作用机制。方法采用免疫荧光法检测cPKC在人GV、MII期卵母细胞、受精卵中的分布及转位。结果在人GV、MII期卵母细胞中,PKCα、βⅠ和γ均有表达。在受精后的卵母细胞中,PKCγ分布没有明显改变,PKCα转移至细胞外周,PKCβⅠ转移至染色质周围,与两个染色质没有重叠。结论PKCα、βⅠ和γ在人卵母细胞中存在,并且参与卵子受精后事件。
- 武学清李晓红张晓郐艳荣王嵩程慧虹郭应禄
- 关键词：人卵母细胞受精蛋白激酶C
- 冻融人卵子胞浆内单精子注射临床妊娠成功被引量：5
- 2004年
- 目的 提供一种适合于临床应用的缓慢低温冷冻和快速解冻复苏的贮存人卵母细胞的方法。 方法 接受试管婴儿 (IVF)或卵子胞浆内单精子注射 (ICSI)治疗的 6例患者剩余的卵母细胞共 33个 ,通过程序化缓慢低温冷冻方法贮存于含有蔗糖的 1,2丙二醇中。 6例因不同原因需要受卵者的子宫内膜用激素替代治疗 (HRT)法调整或采用自然周期 ,当受卵者子宫内膜处于合适时机时 ,复苏冻存的卵母细胞 6次共 33个 ,共 2 8个成熟卵子通过ICSI受精 ,记录卵母细胞复苏率、复苏卵ICSI后的受精率 ,及随后胚胎发育情况 ,选择质量好的胚胎进行移植 ,胚胎移植后 2周检查受孕情况 ,孕 4周B超检查。 结果 当用高浓度的蔗糖冻存液保存时 ,慢冻快融法得到了很高的存活率。复苏后的卵子存活率 97% (32 / 33) ,复苏卵经ICSI后的受精率 82 % (2 3/ 2 8) ,受精胚胎分裂率 91% (2 1/ 2 3) ,6个胚胎移植周期共移植胚胎 2 1个。 4例获临床妊娠 ,目前 1例孕 17周 ,1例孕 12周 ,1例孕 7周 ,均为单胎妊娠 ,状态良好 ;另外 1例妊娠 9周后自然流产。 结论 人卵母细胞慢冻快融低温贮藏方法能够提高人卵母细胞冻存后的存活率。该法操作简便、费用低、复苏率高 ,较好地解决了现有人卵母细胞的技术冻存效果不理想、复苏率低的问题 ,为进一步人卵?
- 李晓红张晓武学清王嵩郐艳荣郭应禄
- 关键词：人卵母细胞冷冻保存妊娠试管婴儿不育症
- 免疫荧光法在研究人卵母细胞、受精卵及胚胎结构和功能中的应用被引量：2
- 2005年
- 目的寻找适合研究人类生殖的免疫荧光方法。方法对蛋白激酶C(PKC)在人卵母细胞、受精卵、种植前胚胎及皮质颗粒进行免疫荧光染色。结果激光共聚集显微镜可以显示PKC在人GV、MI和MⅡ期卵母细胞及受精卵中的位置,并随着细胞的不同时期分布不同。在多精受精的胚胎中,免疫荧光显微镜可以清楚地显示PKC及细胞核在卵裂球的位置。使用A23187处理卵母细胞后,激光共聚集显微镜从表面可以观察到呈新月型点状分布的皮质颗粒。结论通过改进的免疫荧光法可以获得理想的实验结果。
- 武学清李晓红张晓郐艳荣王嵩程慧虹郭应禄
- 关键词：荧光免疫测定卵母细胞
- 短时受精与卵胞浆内单精子注射的临床应用研究被引量：7
- 2004年
- 目的 比较采用简化的短时受精与卵胞浆内单精子注射 (ICSI)的临床应用效果 ,以了解体外受精 (IVF)时短时受精的临床应用价值。 方法 全部病例接受常规促超排卵治疗获得卵母细胞 ,根据患者接受体外受精的不同方式分为两组。短时受精组 10 5例 ,采用精卵四孔皿混合培养 ,加精后 2h将卵母细胞转移至新鲜培养基 ,12 1周期 ;对照组 112例 ,采用ICSI,133周期。分别比较两组受精卵的个数、形成胚胎数及临床妊娠率 ,并进行统计分析。 结果 短时受精组共获卵母细胞16 33个 ,正常受精 (双原核 ) 116 4个 (71.3% ) ,形成胚胎数 10 84个 (93.1% ) ,临床妊娠 4 5例 (4 2 .9% ) ;对照组共获卵母细胞 175 2个 ,形成胚胎数 10 97个 ,临床妊娠 4 8例 (4 2 .9% )。两组女方年龄差异无显著性意义 ;受精率、形成胚胎数、移植胚胎数、冷冻胚胎数及妊娠率差异均无显著性意义 (P均 >0 .0 5 )。 结论 短时受精既简便 ,有效 ,又能获得与ICSI受精相同的临床效果。
- 李晓红王嵩张晓武学清郭应禄
- 关键词：短时受精单精子注射ICSI胚胎移植
- 孕妇血浆胎儿DNA定量分析在产前性别诊断中的应用被引量：1
- 2003年
- 目的 探索一种早期、快速、非创伤性的围生期胎儿性别的诊断方法。方法 应用即时定量TagMan探针DNA扩增技术,检测61例妊娠8～39周的正常孕妇游离在血浆内的无细胞胎儿DNA的SRY基因,并有针对性的对部分孕妇检测妊娠过程中及产后母体血浆中代表母体与胎儿DNA总和的β-珠蛋白基因和代表胎儿DNA的SRY基因的变化关系。结果 妊娠第8周可在母体外周血浆中检测出胎儿游离DNA,其数量随妊娠时间增加而增高;30例孕妇血浆中游离DNA检则SRY基因阳性,经证实均为男性胎儿,31例SRY基因阴性,经证实均为女性胎儿,符合率为100％,分娩6个月后,SRY基因基本从母体血浆中消失。结论 即时定量TagMan探针DNA扩增技术,检测游离在孕妇血浆内的无细胞胎儿DNA,能早期鉴别胎儿性别,为早期诊断某些选择性遗传性疾病开拓了一条新的途径。
- 李晓红林正武学清庄广伦郭应禄
- 关键词：孕妇血浆胎儿产前诊断聚合酶链反应性别鉴定
- 人卵母细胞冻融的研究与应用被引量：1
- 2004年
- 冷冻卵母细胞与冷冻胚胎对于治疗不孕症都具有重要价值。冷冻胚胎技术于1983年首次成功用于人类胚胎的保存。这些年来精子及胚胎冷冻已普遍用于生殖领域，但卵母细胞冷冻仍未在临床上广泛应用。1986年澳洲Chen首次报告卵母细胞冷冻合并体外受精，胚胎移植(in vitro fertilization embryo transfer，IVF-ET)成功妊娠1例。
- 李晓红
- 关键词：人卵母细胞IVF-ET人类胚胎生殖精子
- 荧光定量聚合酶链式反应种植前胚胎β-地中海贫血基因诊断被引量：2
- 2003年
- 目的 用荧光定量聚合酶链式反应 (PCR)方法进行种植前β-地中海贫血一种中国人常见突变类型 CD4 1/ 4 2 (- TCTT)的基因诊断。 方法 来源于β-地中海贫血病人或携带者的 2 89个淋巴细胞和人体外受精 -胚胎移植志愿者剩余的胚胎分离 137个单细胞用荧光定量 PCR方法进行分析。 结果 用单个淋巴细胞诊断β-地中海贫血扩增效率达 96 % ,准确率达 99%～ 10 0 % ,等位基因丢失 (ADO)率仅 0～ 5 %。单个胚胎细胞扩增效率 86 %。 结论 荧光定量 PCR技术是一种敏感、快速、可靠和准确的技术 ,适合包括β-地中海贫血在内的单基因疾病的种植前诊断。
- 李晓红庄广伦周灿权程钢舒益民曾瑞萍
- 关键词：荧光定量聚合酶链式反应胚胎Β-地中海贫血基因诊断
