国家自然科学基金(31070622)
- 作品数：9 被引量：31H指数：3
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- 蜡梅种子休眠原因浅析及赤霉素对种子萌发的影响被引量：14
- 2015年
- 以蜡梅种子为试材,酸蚀30min后研究种皮透水性;提取种子萌发抑制物,通过其对拟南芥种子萌发的影响研究萌发抑制物的分布;酸蚀处理后用GA3溶液浸种,研究GA3对蜡梅种子萌发的影响。结果表明：蜡梅种子的种皮透水性较差,严重阻碍种子吸水;种子浸提液抑制拟南芥种子萌发,萌发抑制物主要存在于种仁内;125-500mg/L GA3浸种处理可以打破蜡梅种子的生理休眠,提高种子的发芽势和发芽率;其中,250mg/L GA3浸种6h效果最好;初始萌发时间为5d,发芽势和发芽率分别达41.7%和95.8%,比对照分别提前3d,提高25.23%和91.60%。
- 罗登攀刘道凤马婧眭顺照李名扬李先源杨建峰赵敏王晓斌
- 关键词：蜡梅种子发芽率
- 蜡梅花蕾脱落力、扩张蛋白活性与离层形成相关性研究被引量：3
- 2014年
- 为明确蜡梅花蕾脱落过程中脱落力、扩张蛋白活性以及离层发育的关系,同时研究保鲜剂对蜡梅切花的影响,采用查狄伦测力计以及蛋白体外重组法对瓶插蜡梅花梗脱落力和蛋白活性进行研究,同时采用石蜡切片法对瓶插蜡梅中蕾期花梗离层的形成进行观察。结果表明:1)脱落力与落蕾量呈负相关,当脱落力小于2.0 N时落蕾量显著增加;2)在瓶插前期,扩张蛋白活性稳定在相对较低的水平,到了后期活性迅速增强,此时脱落力显著下降,离区细胞严重解体并导致离区断裂;3)和对照相比,3种保鲜剂组合对蜡梅切花无显著影响。脱落力、扩张蛋白活性与离层发育关系密切,脱落力可以作为蜡梅花蕾脱落过程中离层发育阶段的划分依据,扩张蛋白主要在蜡梅花蕾离层发育后期起作用;3种保鲜剂组合对蜡梅切花作用不明显。
- 李政马婧眭顺照李名扬
- 关键词：蜡梅扩张蛋白离层
- 蜡梅谷氧还蛋白基因CpGRX1的克隆与表达分析被引量：1
- 2014年
- 通过随机挑取克隆测序的方法从蜡梅花cDNA文库中获得了蜡梅谷氧还蛋白基因,命名为CpGRX1(GenBank登录号:JQ990126).该基因cDNA全长为491bp,其中包含的开放阅读框长为321bp,编码蛋白分子量约为11.18kD.生物信息学分析表明:CpGRX1蛋白属于典型的亚类I(即CPYC型)谷氧还蛋白.实时荧光定量PCR分析表明:CpGRX1基因在蜡梅的根、茎、叶、花等组织中均有表达,其在茎中的表达量显著高于其它组织;在开花过程中,CpGRX1基因在蕾期、盛开期和衰败期表达量较高,表明该基因可能与花的衰老过程相关.
- 汤玲赵敏张军赵玉飞李名扬眭顺照
- 关键词：蜡梅克隆组织表达分析
- 蜡梅水通道蛋白基因CpAQP1转录水平变化及其启动子克隆被引量：4
- 2014年
- 利用荧光定量PCR技术对蜡梅花发育的不同组织、不同花期和不同胁迫下的水通道蛋白基因CpAQP1的表达量进行分析.结果表明:CpAQP1在盛开期中瓣的表达量明显高于其他组织器官,在高温、高盐、ABA胁迫下表达量变化明显,说明该基因具有组织表达差异性及能够对环境胁迫做出响应.同时利用hi-TAIL PCR方法克隆获得蜡梅水通道蛋白基因CpAQP1上游启动子1082bp,命名为CpAQP1pro(GenBank登录号为:JQ952563).该序列具有典型的基本元件TATA-box、CAAT-box及与胁迫相关的元件和光应答元件.将克隆的启动子CpAQP1pro替换pBI121中的CaMV35s启动子,构建植物表达载体pBI121-CpAQP1pro,通过农杆菌转化烟草,稳定表达结果说明该启动子具有驱动GUS报告基因表达的活性.
- 刘祥赵志新王斐秦朝眭顺照李名扬
- 关键词：蜡梅水通道蛋白实时荧光定量PCR启动子克隆
- 蜡梅结瘤素基因CpNOD的克隆与表达分析被引量：4
- 2013年
- 根据已构建的蜡梅cDNA文库中得到的片段,通过cDNA末端克隆得到了一个早期结瘤素基因,命名为Cp-NOD(GenBank登录号:JQ622290),该基因cDNA序列全长611个碱基,包含一个71bp 5-UTR区,一个333bp的开放阅读框ORF和一个207bp的3-UTR区,该基因由111个氨基酸组成,其中丙氨酸组分为多,占18.2%,序列比对分析表明,CpNOD具有典型的蛋白质家族ENOD93特征,属于ENOD93家族早期结瘤素蛋白.实时荧光定量PCR表达检测显示,CpNOD在蜡梅根、茎、花器中都有表达,其中以花中瓣表达最高;在花的不同阶段表达结果是从萌动期、花蕾期、盛开期到衰败期,表达量呈正相关,以衰败期表达量最高.转录表达分析结果推测,CpNOD在蜡梅的开花生理和氮元素响应方面起着积极作用.
- 王喆汤玲眭顺照李明扬
- 关键词：蜡梅克隆基因表达
- 不同脱落力下蜡梅花梗CpEXP1基因的表达与扩张蛋白活性被引量：2
- 2013年
- 为了研究不同脱落力下蜡梅花梗中CpEXP1基因的表达水平以及扩张蛋白活性,采用real-time PCR技术检测不同脱落力下蜡梅花梗组织CpEXP1基因的表达水平;同时采用蛋白质体外重组法以及培养基添加法对花梗组织扩张蛋白活性进行测定。结果表明:CpEXP1基因的表达与扩张蛋白活性变化趋势相同,并在蜡梅花蕾脱落过程中具有阶段特异性。CpEXP1基因在自然脱落组的表达量显著高于其他组(P<0.05)。此时扩张蛋白活性也最强。扩张蛋白对麻点百合愈伤组织的分化无明显影响,对增殖以及生根有明显促进作用。
- 李政马婧眭顺照李名扬
- 关键词：蜡梅扩张蛋白
- 蜡梅亲免素基因CpFKBP的克隆与表达分析
- 2014年
- 在已构建好的蜡梅花cDNA文库及EST分析的基础上,随机克隆测序得到一个蜡梅FKBP基因,将其命名为CpFKBP,Genebank登录号:JQ337962.该基因cDNA长为482bp,具有一个339bp的ORF,编码一个113个氨基酸的多肽,预测等电点为8.48,理论分子量为12.08KD.在大肠杆菌中获得并纯化了重组的CpFKBP蛋白质,并进一步对重组蛋白进行PPIase活性分析,结果显示CpFKBP重组蛋白有较高的PPIase酶活性.
- 王斐秦朝刘祥眭顺照李名扬
- 关键词：蜡梅原核表达PPIASE
- 蜡梅快速碱化因子基因CpRALF的克隆及表达分析被引量：1
- 2012年
- 通过随机克隆测序的方法从蜡梅花cDNA文库中获得快速碱化因子基因,命名为CpRALF(GenBank登录号为:JQ217379)。扩增获得的DNA序列与cDNA序列一致,表明该基因不具有内含子,包含一个384bp的最大开放阅读框,编码一个长127个氨基酸的蛋白质。蛋白质序列同源比对发现其含有快速碱化因子特有的YIXY、YXRGC和4个保守的半胱氨酸以及双精氨酸结构。实时荧光定量PCR分析表明该基因在蜡梅茎、根和盛开的全花中表达量较高;在花发育过程中,蕾期和衰败期表达丰度高。在对蜡梅幼苗进行高温、低温、高盐、重金属4种非生物胁迫处理后,通过实时荧光定量PCR对CpRALF在幼叶中的表达量进行分析,结果表明高温、高盐和重金属能够促进该基因表达,而低温则抑制该基因的表达,且CpRALF对高盐与重金属胁迫的响应比对高温和低温胁迫的响应更为显著和迅速,表明该基因可能在蜡梅花发育以及非生物胁迫反应响应方面发挥作用。
- 王斌杨汶源孙晶晶马婧李名扬眭顺照
- 关键词：蜡梅基因克隆
- 蜡梅CpPR-4基因的克隆及植物表达被引量：3
- 2012年
- 在现有的蜡梅cDNA文库的基础上克隆了蜡梅病程相关蛋白4基因,并将其克隆至植物表达载体pCAM-BIA2301g上,构建了该基因的融合表达载体pCAMBIA2301g/CpPR-4,转入至大肠杆菌LBA4404后利用叶盘法转化至烟草并进行相关功能分析,通过抗病性实验及低温胁迫实验分析,转基因烟草对病毒无明显抗性,对低温不利环境有一定抗性.
- 秦朝王斐王斐王向东王斐刘祥
- 关键词：蜡梅植物表达载体
