国家自然科学基金(30760263)
- 作品数：20 被引量：64H指数：5
- 相关作者：马依彤杨毅宁刘芬陈邦党高霞更多>>
- 相关机构：新疆医科大学第一附属医院新疆医科大学新疆生产建设兵团更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆维吾尔自治区重大科技专项新疆维吾尔自治区卫生厅青年科技人才专项科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肿瘤坏死因子-α激活大鼠心肌细胞核转录因子-κB活性被引量：1
- 2011年
- 目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对大鼠心肌细胞(H9C2)核转录因子-κB(NF-κB)活性的影响。方法体外培养大鼠心肌细胞(H9C2),以TNF-α刺激,凝胶迁移滞后实验(EMSA)检测NF-κB活性,Westen blot及Alamarblue法分别检测P65蛋白与细胞增殖。结果 TNF-α刺激后NF-κB活性明显增高,且TNF-α对细胞生长有抑制作用。结论 TNF-α对大鼠心肌细胞(H9C2)的调节作用,部分是通过激活NF-κB信号通路实现的。
- 高霞马依彤杨毅宁向阳陈邦党刘芬杜雷
- 关键词：核转录因子-ΚB肿瘤坏死因子大鼠心肌细胞
- 9型重组腺相关病毒介导抗核转录因子-κB核酶基因体外转染大鼠心肌细胞及对核转录因子-κB活性的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 观察9型重组腺相关病毒（rAAV9）介导抗核转录因子-κB（NF-κB）核酶基因（rAAV9-ECFP-R65）对大鼠心肌H9C2细胞的转染及对NF-κB活性的影响.方法 rAAV9-EGFP-R65按转染复数（MOI）1×10^6v.g./cell转染H9C2细胞,在倒置荧光显微镜下观察增强型绿色荧光蛋白（EGFP）阳性表达,采用流式细胞仪检测转染效率.Alamar Blue法检测rAAV9-EGFP-R65对H9C2细胞增殖影响.肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、rAAV9-EGFP-R65及PDTC处理H9C2细胞,凝胶迁移滞后实验（EMSA）检测NF-κB活性.结果 转染后第1天EGFP开始表达,表达强度随着时间延长而逐渐增强,第5天达到高峰,此时流式细胞仪检测转染率为（32.27±3.19）%.Alamar Blue法检测表明转染组细胞增殖末受影响.常态下H9C2细胞NF-κB有一定活性,TNF-α刺激后NF-κB活性明显增高,而rAAV9-EGFP-R65、PDTC抑制NF-κB活性.结论 rAAV9-ECFP-R65能够有效地转染H9C2细胞,对细胞增殖无明显抑制,并能显著抑制H9C2细胞NF-κB活性.
- 高霞马依彤杨毅宁向阳陈邦党刘芬
- 关键词：重组腺相关病毒核酶心肌细胞转染
- 血红素加氧酶1基因启动子区多态性与冠心病的相关性及其对血清胆红素水平的影响被引量：6
- 2008年
- 目的探讨冠心病患者血红素加氧酶1启动子区(GT)n重复序列多态性与冠心病的相关性及其对血清胆红素水平的影响。方法采用聚合酶链反应-非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测337例冠心病患者和240例健康对照者血红素加氧酶1启动子区(GT)n重复序列多态性,同时测定血清胆红素水平。结果冠心病组与对照组LL基因型及L等位基因频率分布差异显著(P<0.05);L等位基因频率在冠心病不同病变程度之间分布差异显著(P<0.05),且LL基因型频率在多支血管病变组较单支和双支血管病变组高(P<0.05);LL基因型者胆红素水平较SS基因型者明显下降(P<0.001)。结论血红素加氧酶1启动子区(GT)n重复序列多态性与冠心病的发生发展及冠状动脉狭窄程度有关,L等位基因是冠心病的一个危险因素,可能与该基因多态性所致血清胆红素水平降低有关。
- 王迎洪马依彤付真彦杨毅宁谢翔刘芬
- 关键词：内科学血红素加氧酶1血清胆红素冠心病
- 人EPO基因重组腺病毒载体的构建及表达被引量：4
- 2010年
- 目的:制备表达人促红细胞生成素基因(hEPO)的重组腺病毒。方法:将hEPO基因亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,采用细菌内同源重组"两步转化法"构建携带hEPO基因的重组腺病毒载体。获得的重组腺病毒载体线性化后转染HEK293细胞,包装、扩增出重组腺病毒,氯化铯梯度离心法进行纯化,PCR和电镜负染鉴定重组腺病毒,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达并检测重组腺病毒的滴度。继而用纯化的重组腺病毒感染HeLa细胞,测定转染效率,以Western blot检测hEPO蛋白的表达。结果:成功构建了携带hEPO基因的重组腺病毒载体pAd-hEPO,PCR、透射电镜和绿色荧光鉴定证实病毒包装成功,并且具有感染力,病毒的滴度可达1.8×1010pfu/mL。Western blot检测表明RAd-hEPO感染的HeLa细胞中hEPO基因能够有效表达。结论:制备的RAd-hEPO可成功表达hEPO基因,为后续开展RAd-hEPO治疗缺血性心脏病的研究奠定基础。
- 陈邦党马依彤马翔杨毅宁刘芬
- 关键词：人促红细胞生成素同源重组重组腺病毒
- 细胞外信号调节激酶1/2在压力负荷诱导小鼠肥厚心肌和心衰中的表达变化及作用被引量：2
- 2010年
- 目的:观察细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在小鼠主动脉弓缩窄压力超负荷诱导的肥厚心肌组织中不同时点的表达变化,探讨肥厚心肌从代偿到失代偿心力衰竭发生中的分子机制。方法:12周龄C57/BL小鼠通过主动脉弓缩窄(TAC)建立心肌肥厚模型,在1、4、8、12、16周时进行高频心脏超声、血流动力学、组织重量及心肌病理学检测,RT-PCR半定量测定心房利钠肽(ANP)、α-肌球蛋白重链(α-MHC)、bcl-2、bax mRNA,Western blotting方法检测磷酸化ERK1/2蛋白表达的变化。同时建立假手术模型,在不同时点给予相同检测后处死。结果:(1)与假手术组比较,缩窄组左室收缩期、舒张期前壁、后壁厚度、左心室收缩末期、舒张末期内径于术后呈逐渐增加趋势;左心室射血分数于术后12周显著降低(P<0.05)。左室收缩压及左室压力上升和下降最大速率于术后4周明显增加,8-12周保持稳定,16周明显下降;左室舒张末压于术后8周持续增加(均P<0.05)。显示心肌由左室肥厚最终发展为心力衰竭。(2)组织形态学天狼猩红染色测量心肌胶原含量及TUNEL染色测定凋亡指数显示从4周到16周呈增加趋势。(3)与假手术组比较,缩窄组心肌组织ANP术后1周至16周表达呈持续性增加;而α-MHC、bcl-2 mRNA表达呈持续性降低;bcl-2/bax比值下降;缩窄组心肌组织磷酸化ERK1/2蛋白水平术后1周明显增加,4周时达高峰,12周至16周下降至稳定(均P<0.05),总ERK1/2蛋白水平无明显变化。结论:主动脉弓缩窄诱导的压力超负荷可导致左室心肌早期代偿性向心性肥厚向晚期心力衰竭发展。ERK1/2信号转导途径参与压力负荷诱导心肌肥厚和心衰的发生发展过程,并可能通过调控心肌细胞凋亡实现保护作用。
- 李晓梅杨毅宁马依彤陈邦党刘芬韩伟高晓明黄莺
- 关键词：细胞外信号调节激酶类主动脉弓缩窄左室肥大
- Wnt信号通路在冠心病中的作用研究
- 2008年
- Wnt是与肿瘤发生、发展及脊椎动物胚胎发育有重要关系的细胞信号通路,近来发现其在心血管疾病中也有一定的作用,为此我们对该信号通路在冠心病中的作用进行了综述。Wnt信号通路与早发冠心病、动脉粥样硬化、代谢综合征都有一定关系。此外,Wnt信号通路在心肌梗死后心肌愈合,新生血管形成,刺激基质金属蛋白-2、-9合成及缺血预适应,细胞治疗方面都有重要作用。因此,Wnt信号通路有望成为冠心病未来的研究热点并为开拓新的治疗手段提供作用靶点。
- 黄莺马依彤
- 关键词：WNT信号通路冠心病心肌梗死
- 肥厚心肌缺血后适应时细胞外信号调节激酶的保护作用被引量：5
- 2009年
- 目的研究缺血后适应（IPost）在离体小鼠肥厚心肌缺血再灌注（I／R）损伤中的保护作用，探讨细胞外信号调节激酶（ERK1／2）在此保护中的作用机制。方法12周龄C57／BL小鼠通过主动脉弓缩窄4周建立心肌肥厚模型，利用Langendorff灌流装置建立小鼠肥厚心肌I／R模型，30min全心缺血随后再灌注120min。分为4组，I／R组、IPost组（采取缺血10S及再灌注10s的3次IPost周期）、I／R＋PD98059组（ERK1／2抑制剂）、IPost＋PD98059组，进行心脏血流动力学、心肌梗死范围检测，Western印迹方法检测细胞外信号调节激酶（ERK1／2）、Bcl-2、Bax、细胞色素c（cyLC）蛋白表达水平，脱氧核苷酸转移酶介导的生物素原位缺口末端标记（TUNEL）法检测心肌细胞的凋亡。结果与I／R组比较，IPost组小鼠心脏血流动力学指标左心室收缩压、左心室压力变化最大速率显著改善[（85±4）mmHg比（68±5）mmHg，（3811±230）mmHg比（2830±230）mmHg，均P〈0．05]，IPost组心肌的ERK1／2磷酸化水平、Bcl-2、线粒体Cyt．C表达显著增加，Bax、胞质Cyt．C蛋白表达显著降低，凋亡指数显著降低，心肌梗死范围减小（均P〈0．05）。与I／R组比较，I／R＋PD98059组上述指标差异均无统计学意义（均P〉0．05）。IPost＋PD98059组显示在再灌注的最初15min使用PD98059能消除IPost对肥厚心肌的上述保护作用并显著增加心肌梗死面积，与I／R组水平相同。结论IPost能有效地减轻离体小鼠肥厚心肌缺血再灌注损伤，ERK1／2细胞信号途径参与IPost对缺血再灌注肥厚心肌保护作用并可能通过其抗凋亡的机制实现。
- 李晓梅马依彤杨毅宁张健发陈邦党刘芬黄莺韩伟高晓明
- 关键词：心肌缺血再灌注损伤有丝分裂素激活蛋白激酶类
- 新疆维吾尔族人心肌梗死与前列环素合酶基因单体型的相关性被引量：2
- 2009年
- 目的探讨前列环素合酶基因（CYP8A1）单体型与新疆维吾尔族人心肌梗死（MI）的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法，对210例MI患者和206例健康体检者CYP8A1基因的3个单核苷酸多态性（SNP）（rs5602，rs5629和rs45498106）进行基因分型和单体型构建，应用病例对照单体型分析的方法进行相关性分析。结果MI组CPY8A1基因rs5629的CC基因型频率为71.42％，明显高于对照组（61.65％，P=0.035），而rs5602和rs45498106基因型在两组间分布差异无统计学意义；MI组A-C-T单体型频率为0.60％，明显低于对照组（4.02％，P=0.001），但MI组C-T-T单体型频率为7.40％，明显高于对照组（3.31％，P=0.011）。logistic回归分析结果显示，调整吸烟、高血压和高胆固醇血症等因素后发现，rs5629CC基因型（P=0.021，OR=1.665，95％ CI：1.024-2.156）和C-T-T单体型仍是MI的独立危险因素（P=0.011，OR=1.876，95％CI：1.410-3.171）。结论CYP8A1基因rs5629位点CC基因型可能与新疆维吾尔族人MI的发生相关；C-T-T单体型可能为新疆维吾尔族人MI的易感标志；A-C-T单体型可能为新疆维吾尔族人群MI的保护因子。
- 马依彤谢翔付真彦杨毅宁马翔王迎洪陈邦党刘芬
- 关键词：心肌梗死多态性单核苷酸
- NF-κB抑制剂PDTC对小鼠急性心肌梗塞后Wnt信号通路的影响被引量：6
- 2010年
- 目的:探讨核转录因子(NF)-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对小鼠急性心肌梗塞(AMI)后Wnt信号通路的影响。方法:结扎3月龄雄性C57/BL小鼠左冠状动脉建立AMI模型,随机分成AMI+PDTC组(36只,术后每日腹腔注射PDTC120mg/kg),AMI组(36只,每日注射同上述剂量的生理盐水)。所有小鼠按心梗时间分3d、7d、14d亚组,比较应用PDTC后NF-κB信号通道相关的p65,Wnt信号通路的Dishellved(dvl)-1mRNA表达,糖原合成激酶(GSK)-3β总水平及磷酸化水平变化,β-连接蛋白(catenin)及缝隙通道连接蛋白(connexin)43表达。结果:与AMI组相比,AMI+PDTC组的p65,dvl-1mRNA表达显著降低(P均<0.05),p/tGSK-3β3d,7d及14d时均显著升高(P值均为0.000);β-catenin表达3d时显著低于AMI组,7d时显著高于AMI组(P值均为0.000);connexin43表达显著降低(P=0.000)。结论:抑制NF-κB活性、信号通道后Wnt信号通路相关蛋白活性也发生变化,说明急性心肌梗塞后NF-κB信号通路与Wnt信号通路之间存在互通作用。
- 黄莺马依彤杨毅宁刘芬陈邦党李晓梅
- 关键词：心肌梗塞小鼠
- 新疆维吾尔族人群血红素加氧酶-1基因启动子区多态性与心肌梗死的相关性被引量：1
- 2009年
- 目的探讨新疆维吾尔族人群血红素加氧酶-1（HO-1）启动子区（GT）n重复序列多态性与心肌梗死的相关性。方法选择2006年1月至2008年6月在新疆医科大学第一附属医院急救中心急诊入院并行经皮冠状动脉造影检查确诊的维族心肌梗死患者287例（A／VII组）；对照组190例，为同期入院行冠状动脉造影排除冠心病者，体格检查及胸片、标准12导联心电图、肝胆B超、血尿便常规均未见异常。各组间性别、年龄等一般资料经统计学检验差异无统计学意义，具有可比性。以上两组入选对象如合并心力衰竭、肝功能异常、胆囊疾病、多脏器功能衰竭、全身免疫系统性疾病、血液系统疾病、感染等疾病之一者均予以排除。血生化检测指标包括血总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、血清胆红素。采用聚合酶链反应．非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法检测HO-1启动子区（GT）n重复序列多态性，同时进行血清胆红素含量测定。用Hardy-Weinberg平衡检验样本群体代表性；各组基因型和等位基因频率差异比较用X^2检验；综合评价各因素与心肌梗死相关性采用多因素Logistic回归分析；以P〈0．05为差异具有统计学意义。结果心梗组体重指数、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇及合并高血压的比例较对照组明显拜高（P〈0．01）。血红素加氧酶-1基因型分布在心梗组和对照组70值分别为2．09和0．05（P〉0．05），符合Hardy-Weinberg平衡检验，具群体代表性。AMI组和对照组L／L基因型频率（35．5％）及L型等位基因频率（57．8％）分布差异具统计学意义（X^2=11．65，P=0．001；70=11．32，P=0．003）；L／L基因型胆红素水平较S／S、L／S基因型明显下降（P〈0．01）。Logistic回归分析结果显示体重指数、高血压、甘油三酯、血胆红素�
- 王迎洪马依彤付真彦杨毅宁谢翔刘芬陈邦党
- 关键词：血红素加氧酶血清胆红素心肌梗死维吾尔族
