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肝癌相关抗原calponin2的血清免疫反应及其意义被引量：5: 2010年; 目的:检测肿瘤相关抗原calponin2对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的特异性。方法:应用SEREX(serological identification of antigens by recombinant expression loning)技术检测calponin2抗原在肝癌、肺癌、胃癌、直肠癌、肝炎、肝硬化患者(各31例)及正常健康者(32人)血清的抗体阳性率。结果:相应抗体主要见于HCC患者血清,其血清阳性反应率为54.8%;肝炎、肝硬化患者血清阳性反应率均为3.2%;肺癌、直肠癌、胃癌患者的血清阳性反应率分别是3.2%、9.7%和6.5%;正常人血清阳性反应率为3.1%。Calponin2抗体在肝癌血清中的阳性率最高(P<0.01)。Calponin2阳性率与AFP阳性率及含量、癌组织病理分级、患者年龄及γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)水平无相关性。使用calponin2诊断肝癌的灵敏度、特异性和准确度分别为54.8%、95.2%和89.4%。结论:Calponin2在HCC中有一定的特异性,具有作为新的HCC血清学诊断潜在标志物的意义。; 林朝群张鹏康飞科李晓龙林文珍蔡丹昭周素芳; 关键词：肝癌相关抗原 SEREX技术

肝癌相关抗原SMP30重组基因的构建、表达及分子伴侣共表达系统的探索被引量：3: 2012年; 旨在通过应用基因工程的方法构建、表达和纯化肝癌相关抗原SMP30,研究共表达分子伴侣提高基因工程蛋白表达的可溶性及效率。PCR扩增SMP30 cDNA序列,用基因工程技术构建重组表达质粒,转化E.coliBL21(DE3)pLysS宿主菌。表达蛋白经Ni-NTA亲和柱纯化获得HIS-SMP30融合蛋白;分别将4种表达不同分子伴侣的质粒(pG-KJE8、pGro7、pKJE7、pTf16)转入E.coliBL21(DE3)中;然后再将重组质粒转入含有分子伴侣质粒的细胞中,进行分子伴侣与重组质粒的共表达,SDS-PAGE检测目的蛋白的表达量与可溶性分析。经优化表达条件后,目的蛋白以包涵体形式表达,目的蛋白占总蛋白的60%以上;纯化后纯度高达95%以上;诱导共表达后,目的蛋白在上清含量极少,不到总表达目的蛋白的10%。成功构建出高效表达的SMP30重组质粒;加入到诱导表达体系中的4种分子伴侣质粒不能有效的促进可溶性蛋白的表达,pTf16共表达系统能增加目的蛋白表达量。; 黄朋范升龙凌敏贺菽嘉周素芳; 关键词：基因工程共表达

肿瘤抗原在免疫治疗中的应用被引量：1: 2010年; 介绍肿瘤抗原分类、肿瘤细胞逃逸机体免疫监制的机制、机体抗肿瘤的免疫学机制和肿瘤抗原在免疫治疗中的应用。随着分子生物学的发展,肿瘤抗原在肿瘤免疫治疗方面将发挥重要的作用。; 林朝群周素芳; 关键词：肿瘤抗原免疫治疗

人肝癌血清对人体胚胎干细胞文库的筛选及方法改进被引量：10: 2008年; 用人肝癌血清从人体胚胎干细胞cDNA表达文库中筛选肝癌相关抗原,并对SEREX条件方法的改良作进一步的探索。将已构建好的人胚胎干细胞cDNA表达文库进行滴度计算。利用38例原发性肝癌病人血清,结合SEREX技术,应用Western blot方法,对表达文库中的相关抗原做血清学免疫筛选。同时,对SEREX技术贴膜条件及假阳性的排除方法进行改良。cDNA表达文库滴度为3.8×10~8pfu/ml,筛选出阳性克隆有31个。从人胚胎干细胞cDNA表达文库中能筛查到部分有效的肝癌肿瘤相关抗原,为后续工作提供宝贵资料。; 孙泽峰郭雪婷李雅娟程学远周素芳; 关键词：SEREX技术肝癌相关抗原

衰老标记蛋白30 mRNA在癌细胞中的表达研究被引量：3: 2010年; 目的:检测衰老标记蛋白(SMP)30 mRNA在不同癌细胞系中的表达情况,探讨其在不同细胞中的表达差异。方法:分别采用RT-PCR与荧光定量PCR检测SMP30 mRNA在正常肝细胞、肝癌细胞、胃癌细胞、乳腺癌细胞、宫颈癌细胞中的表达,并用SPSS13.0进行统计学分析。结果:SMP30 mRNA在所有被检测的细胞株中均有表达,在癌细胞中的相对表达量分别为肝癌细胞(0.926±0.340)、胃癌细胞(0.922±0.379)、乳腺癌细胞(0.614±0.356)、宫颈癌细胞(0.608±0.346),而在正常肝细胞中为0.175±0.158,显示SMP30 mRNA在癌细胞中的表达量较正常肝细胞中高(P<0.05),且在肝癌细胞中的表达量比在其他癌细胞中更高。结论:SMP30 mRNA在癌细胞中的表达高于正常肝细胞,且在肝癌细胞中的表达高于其他癌细胞,具有临床应用价值。; 李晓龙康飞科雷鸣蒋玲玉林朝群周素芳; 关键词：MRNA RT-PCR 实时荧光定量PCR

肝癌相关抗原MRP-L28血清学特异性研究及其临床意义被引量：1: 2010年; 目的检测肝癌相关抗原MRP-L28的肝癌血清学特异性。方法应用SEREX技术检测MRP-L28在肝癌、胃癌、肺癌、直肠癌、肝炎、肝硬化病人及正常人血清中的抗体阳性率。结果相应抗体主要见于HCC患者血清,肝癌病人血清阳性反应率为48.4%;肝炎、肝硬化病人血清阳性反应率均为6.5%;肺癌、直肠癌、胃癌的病人血清阳性反应率分别是6.5%、9.7%和3.2%;正常人血清阳性反应率为3.1%。经比较,MRP-L28抗体在肝癌血清中的阳性率最高(P<0.05);其余各组之间MRP-L28抗体阳性率无统计学意义。同时,本文还比较了MRP-L28抗体阳性率与AFP阳性率及含量、病理分级、年龄和γ-谷氨酰转肽酶(GGT)的关系,结果显示无统计学意义。使用MRPL-28诊断肝癌的灵敏度、特异性和准确度分别为48.4%、94.1%和87.6%。结论 MRP-L28在HCC检测中有一定的特异性,在肝癌血清学诊断方面具有一定的临床意义,可以考虑作为新的HCC血清学诊断标记物。; 林朝群张鹏康飞科李晓龙林文珍蔡丹昭周素芳; 关键词：SEREX技术肝癌相关抗原

钙结合蛋白S100A13在肝癌组织中的表达及其临床意义被引量：4: 2011年; 目的:探索钙结合蛋白S100A13(S100 calcium binding protein A13,S100A13)在肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义。方法:收集广西医科大学第一附属医院34例HCC及相应癌旁组织、18例正常肝组织标本,商业购置197例肝癌及相应癌旁高密度组织芯片。应用原位RT-PCR技术检测HCC组织、癌旁组织、正常肝组织中S100A13 mRNA的表达,使用免疫组织化学技术检测HCC组织、癌旁组织、正常肝组织中S100A13蛋白的表达,并用Image-ProPlus软件分析免疫组织化学光密度值。结果:S100A13 mRNA在HCC、相应癌旁和正常肝组织中表达的阳性率分别为70.21%、51.06%和33.33%;S100A13 mRNA定位主要在胞核,多表达于核膜。S100A13蛋白在HCC、相应癌旁和正常肝组织中表达的阳性率分别为55.84%、38.96%及26.32%,HCC组织中的平均D值最高(0.038±0.051),其次是癌旁组织(0.022±0.034),正常肝组织(0.01±0.009)最低(P<0.05);S100A13蛋白主要表达于HCC细胞的胞质中,部分细胞核偶见表达,此外在癌旁次生胆小管中及部分炎细胞中也存在高表达。S100A13蛋白在HCC中的表达与患者的性别、年龄及病理分级无关。结论:HCC组织高表达S100A13蛋白,S100A13可能具有作为肝癌治疗靶点的潜力。; 张鹏黄朋郭先文雷荣娥岳成思凌敏林文珍蔡丹昭贺菽嘉唐文珏周素芳

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国家自然科学基金(30760233)

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