留学人员科技活动项目择优资助经费([2011]226)
- 作品数：5 被引量：50H指数：3
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- 糖原合成酶激酶3β在白藜芦醇诱导的大鼠心肌线粒体保护中的作用及其机制被引量：16
- 2012年
- 目的探讨白藜芦醇是否通过抑制糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）的活性进而阻止线粒体通透性转移孔（mPTP）的开放来发挥心脏保护作用，及其可能的信号转导机制。方法常规培养大鼠胚胎心脏组织来源的H9c2细胞株，实验随机分为对照组、白藜芦醇组、白藜芦醇＋PKG抑制剂（KT5823）组和KT5823组。激光扫描共聚焦显微镜成像法测定细胞线粒体膜电位（Aattm）的变化及细胞内一氧化氮（NO）的含量。SABC法检测白藜芦醇对H9c2细胞GSK．3βser9位点磷酸化的影响。Westernblot法检测磷酸化GSK-3β、血管扩张刺激磷蛋白（VASP）的表达水平。结果共聚焦显微镜测定Aattm结果显示，白藜芦醇组[减少到（81．9±1．1）％]能够抑制△ψm的减少，与对照组[减少到（38．6±1．9）％]比较差异有统计学意义（P〈0．05）。白藜芦醇＋KT5823组AaYm[减少到（41．8±1．2）％]明显低于白藜芦醇组（P〈0．05）。Westernblot结果显示白藜芦醇组的磷酸化GSK．3β及VASP蛋白表达水平[分别为（160．6±3．6）％和（157．9±1．3）％]明显高于对照组（P〈0．01）。白藜芦醇＋KT5823组的磷酸化GSK．3β及VASP蛋白表达水平[分别为（91．6±5．6）％和（98．0±0．5）％]明显低于白藜芦醇组（P〈0．01）。KT5823组与对照组比较差异无统计学意义。SABC结果进一步显示，白藜芦醇组GSK-3βSer9位点的磷酸化水平明显高于对照组（P〈0．01）。共聚焦显微镜测定细胞内NO的结果显示，白藜芦醇组DAF-FM的绿色荧光强度与对照组比较差异无统计学意义[分别为（71．2±5．3）％和（77．0±5．4）％]。结论白藜芦醇通过cGMP／PKG信号通路抑制GSK-3β活性，进而阻止mPTP的开放来保护心脏。NO可能未参与白藜芦醇的线粒体保护作用。
- 贺永贵孙玉洁谢宇曦郑桓张义东郭静习瑾昆
- 关键词：心肌线粒体糖原合成酶激酶3白藜芦醇
- 黄芪甲苷抑制GSK-3β活性介导大鼠心肌缺血／再灌注损伤作用的线粒体机制研究被引量：36
- 2014年
- 目的研究黄芪甲苷对心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)的线粒体保护途径,并初步探讨其可能机制。方法建立离体心脏缺血/再灌注模型,结扎冠状动脉进行心肌缺血30min,再灌注120 min,♂Wistar大鼠随机分成对照组、黄芪甲苷组、mPTP开放剂苍术苷(atractyloside)组和抑制剂环孢素A(cyclosporin A,CsA)组;生物信号采集系统检测心功能指标;TTC法测定心肌梗死面积;电镜观察心肌线粒体超微结构变化;差速离心法分离线粒体及Ca2+诱导的线粒体肿胀实验;Western blot检测缺血/再灌注区磷酸化-GSK-3β的表达。结果黄芪甲苷能明显改善心功能,明显减少心肌梗死面积,明显抑制线粒体肿胀,再灌注期GSK-3β磷酸化表达明显增多,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论黄芪甲苷对MIRI有保护作用,其机制可能与抑制GSK-3β活性,进而阻止mPTP开放有关。
- 贺永贵李王芳伊红丽郑桓习瑾昆
- 关键词：黄芪甲苷心肌缺血线粒体GSK-3ΒMPTP
- 9L/Fischer 344大鼠颅内胶质瘤显微切除模型的建立
- 2013年
- 目的建立稳定的9L/Fischer 344大鼠颅内脑胶质瘤显微切除模型。方法采用立体定向技术,在Fischer 344大鼠右侧额叶尾状核接种5×104个9L细胞。在9L细胞种植后第7天应用神经外科显微技术近全切除大鼠颅内胶质瘤,分批处死动物。观察未手术大鼠及术后大鼠的生存状态及生存时间,观测颅内肿瘤的生长情况及形态学特点;通过免疫荧光法检测神经胶质酸性蛋白和中间丝蛋白在脑胶质瘤切除术前及术后复发肿瘤中的表达。结果未手术大鼠平均生存时间为(16.5±1.6)d,手术切除肿瘤可提高大鼠的生存状态,延长生存时间[术后大鼠的平均生存时间为(28.4±2.3)d],但最终会因肿瘤复发而死亡。免疫荧光法检测显示术后复发的肿瘤无论是形态学还是生物学特性方面与术前相比都无明显变化。结论近全切除9L/Fischer 344大鼠原位脑胶质瘤良好地模拟了人颅内脑胶质瘤手术切除的疾病发展过程,具备该肿瘤的形态学及生物学特性,模型成功。
- 张雪鹏曹恒聪陈光华刘英邢爱春
- 关键词：脑胶质瘤手术切除动物模型
- 光动力学疗法治疗脑胶质瘤亚急性期大鼠缺氧诱导因子lα和血管内皮细胞生长因子的表达被引量：3
- 2013年
- 目的观察光动力学疗法（PDT）治疗Fischer344大鼠9L胶质瘤亚急性期肿瘤内及肿瘤旁组织中血管内皮细胞生长因子（VEGF）及缺氧诱导因子1α（HIF—α）的表达情况。方法32只雄性Fischer344大鼠颅内种植9L脑胶质瘤细胞后，随机分为对照组、PDT治疗组（40J／cm2组、80J／cm2组和120J／cm2组）。接种9L细胞后第7天治疗组大鼠接受相应能量的5-氨基乙酰丙酸（ALA）介导的PDT治疗。治疗后第7天处死所有动物，通过HE染色法检测颅内肿瘤的生长情况；利用Westernblot法检测肿瘤内和肿瘤旁组织中VEGF及HIF-1d的表达情况。结果对照组及治疗后40J／cm2组、80J／cm2组和120J／cm2组的肿瘤体积分别为（103．27±8．83）、（73．93±7．55）、（57．89±7．53）、（48．57±6．86）mm3。与对照组比较，所有PDT治疗组的肿瘤体积明显减小，差异有统计学意义（F=216．183，P=0．000）。与40J／cm2相比，80J／cm2和120J／cm2组的肿瘤体积减少得更明显，差异有统计学意义（P均〈0．001）。Westernblot检测发现对照组及不同能量ALA—PDT组中治疗后肿瘤组织内的VEGF和HIF-1α的表达均很高，多组间比较差异无统计学意义（VEGF：F=1．867，P=0．155；HIF-α：F=2．106，P=0．119）；但在肿瘤旁组织中，对照组的VEGF和HIF-α略有表达，随着ALA-PDT治疗能量的增高，VEGF和HIF-1α的表达较对照组明显增高（VEGF：F=37．065，P=0．000；HIF1α：F=39．775，P=0．000），尤以120J／cm2组最为显著。结论ALA—PDT可有效治疗脑胶质瘤，但ALA—PDT在治疗的同时可促进肿瘤旁组织中的HIF-1α和VEGF的表达增高。
- 张雪鹏李明赵莹张媛媛丁华吴丽君
- 关键词：脑胶质瘤光动力学治疗
- 9L/Fischer 344大鼠颅内胶质瘤模型的建立
- 2012年
- 目的建立稳定的9L/Fischer 344大鼠颅内脑胶质瘤模型。方法采用立体定向技术,在34只Fischer 344大鼠右侧额叶尾状核接种5×104个9L细胞。在接种9L细胞后第3、7、10和14天分别随机选取6只大鼠处死,1只的标本行冰冻切片处理,其余5只的标本行石蜡切片处理。余下10只大鼠自然死亡。观察大鼠的生存状态及生存时间,观测颅内肿瘤的生长情况及形态学特点;通过免疫荧光法检测神经胶质酸性蛋白(GFAP)和中间丝蛋白(Vimentin)在脑胶质瘤中的表达。结果 34只大鼠脑内均见肿瘤生长,成瘤率100%。大鼠平均生存时间为(16.5±1.6)d,在接种9L细胞初期无明显不良反应,随着肿瘤的生长而逐渐出现相应的表现,其过程符合临床脑胶质瘤的发展过程。HE结果显示Fischer 344大鼠颅内生长的9L胶质瘤具有该肿瘤的病理形态学特点,免疫荧光结果显示9L脑胶质瘤细胞高表达特异性的蛋白Vimentin,肿瘤周围有表达GFAP的胶质细胞。结论 9L/Fischer 344大鼠原位脑胶质瘤模型良好地模拟了人颅内脑胶质瘤的发展过程,具备该肿瘤的形态学及生物学特性,模型成功。
- 曹恒聪张雪鹏陈光华刘英邢爱春
- 关键词：脑胶质瘤动物模型
