国家自然科学基金(31060128)
- 作品数：16 被引量：103H指数：6
- 相关作者：陶站华刘军贤孙美娟王桂文袁玉峰更多>>
- 相关机构：广西科学院广西师范大学东卡罗莱纳大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西研究生教育创新计划更多>>
- 相关领域：理学生物学医药卫生机械工程更多>>
- 利用冰核蛋白N末端结构域在大肠杆菌表面展示粘质沙雷氏菌脂肪酶被引量：4
- 2012年
- 【目的】利用细胞表面工程技术将活性脂肪酶展示于大肠杆菌细胞表面并对展示脂肪酶的酶学性质进行研究。【方法】将丁香假单胞菌冰核蛋白N末端结构域序列与粘质沙雷氏菌脂肪酶编码基因融合,构建成脂肪酶表面展示载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。【结果】重组菌以终浓度0.05 mmol/L异丙基硫代-D-半乳糖苷(IPTG)、25°C条件下诱导培养,16 h后表面展示脂肪酶活力达到最大值1 852 U/g细胞干重。表面展示酶的最适pH为9.0,最适反应温度为40°C,表面展示酶热稳定性较游离酶有较大提高,在40°C孵育1 h后仍能保持90%以上的酶活力。【结论】以上结果表明细菌表面展示技术为脂肪酶固定提供了一个很有前景的替代方法。
- 陶站华张搏
- 关键词：脂肪酶粘质沙雷氏菌大肠杆菌
- 红外光谱结合化学计量学评价不同产地何首乌被引量：6
- 2011年
- 目的建立快速评价不同产地何首乌的方法。方法运用化学计量预处理方法处理4个产地何首乌样品的红外光谱,分析各产地样本的平均光谱,建立主成分分析鉴别和SIMCA预测模型。结果 ①何首乌含有蒽醌类、二苯乙烯类、磷脂类、多糖和苷类等化学成分。②主成分分析模型能基本鉴别不同产地何首乌。③不同产地何首乌的差异主要体现在芳香族化合物、草酸钙、磷脂、糖蛋白、多糖和苷类共6种化学成分上。④SIMCA模型预测未知样品的准确率达到100%。结论 红外光谱结合化学计量学是一种快速、无损地评价何首乌的有效方法。
- 袁玉峰陶站华田昌海刘军贤黄庶识
- 关键词：红外光谱何首乌主成分分析SIMCA
- 红外光谱结合主成分分析鉴别不同产地黄柏被引量：45
- 2011年
- 利用傅里叶变换红外光谱仪收集6个不同产地黄柏的红外光谱,原始光谱经过多点基线校正、五点平滑预处理后,统计各个产地黄柏的平均光谱,结果显示,6个产地黄柏的平均红外光谱整体上相似;在指纹特征区域1 800~500 cm-1,选取经过归一化的红外光谱,建立主成分分析鉴别模型。建模结果表明,三个主成分能代表98%的指纹区变量信息,样本在主成分空间中聚集成为不同的类别,基本实现不同产地黄柏的鉴别,此外,在一定程度上,样本分布疏密度反映样本的亲缘关系。提取模型的载荷因子,分析显示,6个产地黄柏的差异主要在蛋白质、糖类、脂类、生物碱类、黄柏甾醇类、黄柏内酯、黄柏酮、黄柏酮酸八种物质成分上体现。因此,红外光谱结合主成分分析法可以快速、无损地鉴别不同产地黄柏,并且能反映不同产地黄柏物质成分含量的差异。
- 袁玉峰陶站华刘军贤田昌海王桂文黎永青
- 关键词：红外光谱法黄柏主成分分析
- 拉曼光谱法结合薄层层析分析红酵母色素被引量：1
- 2012年
- 利用薄层层析色谱法分离红酵母色素,结果显示,红酵母细胞能合成至少三种色素,即β-胡萝卜素、红酵母红素、圆酵母红素;采集三种色素的拉曼光谱,光谱数据经过背景扣除、基线校正、三点平滑等方法预处理,统计不同色素的平均光谱,结果表明三种色素的CC拉曼位移不同,并且β-胡萝卜素的拉曼位移最多,红酵母红素和圆酵母红素的含量较多;定量分析色素特征峰高比值,各色素峰高比值差异不大,峰高比值能用作参数,为深入研究活体细胞内色素的相对含量提供参考。以上结果表明,拉曼光谱法结合薄层层析能够分析红酵母色素,可以提供红酵母色素的丰富信息,是研究色素的有效方法。
- 袁玉峰陶站华王雪黎永青刘军贤
- 关键词：拉曼光谱法薄层层析
- 光镊拉曼光谱技术结合响应面法优化红酵母产类胡萝卜素的发酵条件
- 2014年
- 拉曼光谱具有快速、实时、无损分析的特点,在生物学领域应用广泛。作者利用光镊拉曼光谱技术(LTRS)测定红酵母细胞中类胡萝卜素。采用Plackett-Burman法对影响红酵母发酵的相关因素进行评价,发现葡萄糖、蛋白胨、pH和温度对类胡萝卜素的产量影响显著。利用BoxBehnken设计和响应面分析法对影响类胡萝卜素产量的关键因素进行优化,获得的最优发酵条件为:葡萄糖42.86 g/L,蛋白胨5 g/L,酵母提取物5 g/L,KH2PO41 g/L,MgSO4。7H2O 0.5 g/L,pH 7.0,温度28.3℃,优化后类胡萝卜素产量较优化前提高了45%。
- 蒋玉凌孙美娟陈越范伟刘军贤陶站华
- 关键词：响应面法类胡萝卜素红酵母
- 激光镊子拉曼光谱法优化红法夫酵母合成虾青素条件被引量：1
- 2013年
- 用激光镊子拉曼光谱法优化红法夫酵母生产虾青素的条件。首先,将红法夫酵母细胞拉曼光谱与虾青素标准品溶液拉曼光谱进行对比,找出定量虾青素的拉曼特征峰;然后对照红法夫酵母生长曲线与不同时间点红法夫酵母细胞内虾青素含量曲线,进行发酵时间的优化;最后将红法夫酵母分别用不同氮源、碳源培养基培养,对比其细胞的虾青素拉曼特征峰强度,最终优化培养基。由实验可得,适宜定量虾青素的拉曼特征峰是1520cm-1峰;最佳发酵时间为72h;最佳优化培养基氮源含硫酸铵4g/L+硝酸钾4g/L,碳源含蔗糖60g/L。从上述结果可知,用激光镊子拉曼光谱法对红法夫酵母合成虾青素的条件进行优化,充分发挥了其操作简便、耗时短、样品用量少、对样品无损伤等优势,使所得结果更准确可信。因此,激光镊子拉曼光谱法是红法夫酵母细胞合成虾青素条件优化的理想选择。
- 王雪孙美娟刘军贤邓洋鸽莫玉香陶站华
- 关键词：光谱学红法夫酵母虾青素
- 拉曼光谱技术在微生物学中的应用被引量：4
- 2012年
- 拉曼光谱具有快速、灵敏、无损、实时监测等显著特点,在微生物学领域得到广泛应用。分别介绍共焦显微拉曼光谱、共振拉曼光谱、表面增强拉曼光谱、拉曼成像、相干反斯托克斯拉曼光谱、激光镊子拉曼光谱和Raman-FISH的原理和特点,并重点总结和分析不同拉曼光谱技术在微生物的结构、化学组成,以及代谢过程等相关研究中的应用优势。合理利用这些技术在基础微生物、发酵微生物和微生物诊断等方面具有潜在的应用价值。
- 孙美娟刘军贤王雪陶站华
- 关键词：拉曼光谱微生物
- 光镊拉曼光谱法分析红法夫酵母内虾青素含量被引量：5
- 2012年
- 建立一种用激光镊子拉曼光谱法快速定量红法夫酵母细胞内虾青素含量的方法。测定不同浓度虾青素标准品溶液的拉曼光谱,取其1 520cm-1峰峰高绘制虾青素标准曲线;取不同氮源、碳源的红法夫酵母细胞,一部分用激光镊子拉曼光谱法测定,一部分用紫外-可见分光光度法测定;最后分析两者间的相关性。结果表明虾青素标准曲线的相关系数到达0.998 3。在单位质量红法夫酵母虾青素含量与单位体积红法夫酵母发酵液虾青素产量方面,对比激光镊子拉曼光谱法与紫外-可见分光光度法,两种方法所得数据具有良好的相关性,其相关系数分别达到0.917 7和0.905 4,表明激光镊子拉曼光谱法能够达到紫外-可见分光光度法的测定效果,是定量分析红法夫酵母细胞内虾青素的更有效方法。
- 王雪孙美娟刘军贤邓洋鸽莫玉香陶站华
- 关键词：光谱学红法夫酵母虾青素
- 激光镊子拉曼光谱技术分析圆红冬孢酵母生成油脂和类胡萝卜素被引量：9
- 2013年
- 采用激光镊子拉曼光谱(LTRS)技术对圆红冬孢酵母合成油脂和类胡萝卜素进行定量分析,考察不同碳氮比、碳磷比以及碳硫比对圆红冬孢酵母在细胞水平油脂和类胡萝卜合成能力的影响。测定不同浓度植物油的拉曼光谱,其1751cm-1峰峰高与油脂浓度线性关系良好,相关系数R2可达0.97349,说明激光镊子拉曼光谱法是定量分析油脂的有效手段。以1751cm-1峰和1520cm-1峰峰高定量细胞内油脂和胡萝卜素含量,分析不同样品圆红冬孢酵母细胞的拉曼光谱,结果表明,随着碳氮比、碳磷比和碳硫比的升高,圆红冬孢酵母细胞内油脂含量逐步增加,而类胡萝卜素的含量则显著降低。以上结果说明,激光镊子拉曼光谱技术是实时检测圆红冬孢酵母细胞油脂及类胡萝卜素合成和优化发酵培养基的有效工具。
- 孙美娟蒋玉凌来爱华陶站华刘军贤
- 关键词：光谱学油脂类胡萝卜素
- 活体糖尿病小鼠中单个白细胞的拉曼光谱分析被引量：8
- 2012年
- 利用拉曼光镊并结合多元统计分析方法无损地对活体糖尿病(DM)小鼠中的白细胞(WBC)进行了研究,分别检测了糖尿病和正常小鼠活体中的白细胞拉曼光谱,利用主成分分析(PCA)建立拉曼光谱诊断多元统计算法模型。结果表明,患糖尿病小鼠和正常小鼠白细胞拉曼光谱差别明显,且实验存在较好的重现性。利用PCA统计分析方法得到诊断特异性和灵敏度达到了98%。在活体糖尿病小鼠白细胞中出现较高的蛋白质的特征峰1302cm-1,表明活体糖尿病白细胞中的蛋白质浓度比正常状态高。糖尿病小鼠内的白细胞与正常相比,DNA磷酸骨架基团强度和蛋白质酰胺强度升高,表明DNA双螺旋结构、蛋白质主链和氢键体系发生变化,二级构象改变。
- 牛丽媛林漫漫李雪董云亮魏坤莲匡志鹏刘军贤姚辉璐
- 关键词：光谱学拉曼光谱糖尿病白细胞活体
