国家自然科学基金(30760321)
- 作品数：9 被引量：71H指数：7
- 相关作者：赵铁建韦燕飞彭岳吴光方卓更多>>
- 相关机构：广西中医学院广西中医药大学广西中医药大学附属瑞康医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西中医学院课题广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 细胞培养实验中一些细节问题的探讨被引量：6
- 2009年
- 在细胞培养实验中,血清的处理和细胞的冻存这两方面的问题,是较为复杂也是比较容易出错的。而血清处理和细胞冻存过程中的技术细节若处理不当,会对细胞培养的效果产生较明显的影响。就理论学习及实验操作中获得的经验,对血清的保存、解冻、沉淀物和热灭活的问题,及细胞冻存的方法和注意事项等细节问题作一总结。
- 彭岳赵铁建谢海源韦燕飞
- 关键词：细胞培养血清细胞冻存
- 白花丹醌对瘦素刺激人肝星状细胞转化生长因子-β_1表达的影响被引量：10
- 2010年
- 目的研究白花丹醌对瘦素刺激体外培养人HSC-LX2TGF-β1 mRNA和蛋白表达的影响。方法体外培养HSC-LX2,瘦素(leptin)刺激24h,各药物与细胞共孵育24h后,采用荧光PCR检测各组TGF-β1 mRNA的表达和免疫组织化学方法检测TGF-β1蛋白表达情况。结果与leptin组比较,白花丹醌各剂量组作用24h后,HSC-LX2细胞中TGF-β1 mRNA的水平明显降低,尤以中、高剂量组明显(P<0.01);免疫组化结果显示白花丹醌各剂量组对HSC-LX2细胞TGF-β1蛋白表达有一定的抑制作用,且作用呈剂量依赖性。结论白花丹醌抗肝纤维化作用机制之一是从mRNA和蛋白水平抑制TGF-β1表达,从而抑制HSCECM的合成,发挥抗肝纤维化作用。
- 韦燕飞刘雪梅唐爱存彭岳钟振国方卓赵铁建
- 关键词：白花丹醌瘦素肝星状细胞转化生长因子-Β1
- 桂郁金提取物对人肝星状细胞增殖、细胞周期及凋亡影响的研究被引量：15
- 2012年
- 目的观察桂郁金提取物对人肝星状细胞的作用,了解其对该细胞的增殖、细胞周期和凋亡情况的影响。方法将人肝星状细胞株(HSC-LX2)与药物孵育48 h后,用MTT比色法测定细胞的增殖抑制率。用流式细胞术(PI染色法)检测各周期细胞的DNA含量及细胞凋亡的概况。结果低、中、高浓度桂郁金提取物均可抑制HSC-LX2细胞的增殖,48h的增值抑制率分别为15.4%、49.1%、58.3%;48 h的IC50为45μmol/L;均可阻止HSC-LX2细胞进入DNA合成增殖周期,并诱导HSC-LX2细胞发生早期及晚期凋亡,48 h的S期+G2/M期细胞总数百分比分别为70.1%、63.6%、50.2%;凋亡概率分别为13.9%、18.9%、23.5%。结论桂郁金提取物具有抑制HSC-LX2细胞增殖、阻止细胞进入DNA合成增殖周期、诱导细胞发生凋亡的能力,从而可以干预肝纤维化病程;以上能力均具有剂量依赖性;且中、高剂量桂郁金提取物组以上能力明显比秋水仙碱组和复方鳖甲软肝片组强。
- 彭岳吴光韦燕飞赵铁建
- 关键词：桂郁金人肝星状细胞细胞增殖细胞周期
- 白花丹醌对瘦素诱导人肝星状细胞增殖与α-SMA表达的影响被引量：15
- 2010年
- 目的研究白花丹醌对瘦素(leptin)刺激人肝星状细胞(HSC-LX2)增殖与α-平滑肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法体外培养HSC-LX2,瘦素刺激24h,各药物组与细胞共孵育24h后,采用MTT法检测白花丹醌对HSC-LX2增殖的影响;采用荧光定量PCR检测各组α-SMAmRNA的表达和免疫组织化学方法检测α-SMA蛋白表达情况。结果白花丹醌呈剂量依赖性抑制瘦素诱导HSC-LX2增殖,以16μmol·L-1浓度时最为明显,与leptin对照组比较差异有显著性(P<0.01);白花丹醌各剂量组作用24h后,HSC-LX2细胞中α-SMAmRNA的水平降低,尤以中、高剂量组明显,与leptin组比较(P<0.01),且作用呈剂量依赖性。免疫组化结果显示白花丹醌各剂量组对HSC-LX2细胞α-SMA蛋白表达有一定的抑制作用。结论白花丹醌抗肝纤维化作用机制之一是从mRNA水平和蛋白水平抑制α-SMA表达,从而抑制HSCECM的合成,发挥抗肝纤维化作用。
- 刘雪梅韦燕飞彭岳谢海源方卓段雪琳赵铁建
- 关键词：白花丹醌瘦素增殖Α-平滑肌动蛋白
- 桂郁金提取物对人肝星状细胞增殖、凋亡影响的研究被引量：12
- 2011年
- 目的:观察桂郁金提取物对人肝星状细胞的作用,了解其对该细胞的增殖和凋亡的影响。方法:将人肝星状细胞株(HSC-LX2)与药物孵育48h后,用MTT比色法测定细胞的增殖抑制率。用流式细胞术(ANNEXIN V-PE/7-AAD双染色法)检测细胞凋亡各阶段的情况。结果:低、中、高浓度桂郁金提取物均可抑制HSC-LX2细胞的增殖,48h的增值抑制率分别为15.4%、49.1%、58.3%;48h的IC50为45μmol/L;均可诱导细胞发生早期及晚期凋亡,48h的总凋亡细胞百分比分别为20.7%、29.8%、34.4%。结论:桂郁金提取物具有抑制HSC-LX2细胞增殖、诱导细胞发生凋亡的能力,从而可以干预肝纤维化病程;以上能力均具有剂量依赖性;且中、高剂量桂郁金提取物组以上能力明显比秋水仙碱组和复方鳖甲软肝片组强。
- 彭岳吴光韦燕飞赵铁建
- 关键词：桂郁金人肝星状细胞细胞增殖抗纤维化
- HPLC测定不同采收途径及不同部位白花丹中白花丹醌的含量被引量：7
- 2012年
- 目的:分析不同采收途径及不同部位的白花丹中白花丹醌含量,寻找富集白花丹醌的药用部位和白花丹的最佳采收途径。方法:采用HPLC法测定不同采收途径白花丹和不同部位中白花丹醌的含量:色谱柱为Hypersil ODS(25cm×4.6mm,25μm),流动相为甲醇-水(65∶35),流速为1.0mL/min,检测波长为213nm,柱温30℃。结果:白花丹醌在0.01μg～0.32μg含量范围呈线性关系,Y=18211600X+10434.57758,r=0.99946,RSD=1.28%(n=6);新鲜的白花丹根部、茎部及叶中白花丹醌的含量分别为0.026%、0.006%和0.014%;干燥的白花丹根部、茎部及叶中白花丹醌的含量分别为0.324%、0.082%和0.174%;枯萎的白花丹茎部、叶及穗中白花丹醌的含量分别为0.002%、0.001%和0.003%。结论:干燥组白花丹中白花丹醌含量高于新鲜组和枯萎组,白花丹根部的白花丹醌含量最高,其次是穗,叶、茎。本法简便、准确,灵敏度高,重复性好,可用于控制白花丹药材的质量。
- 韦燕飞张园李景强赵铁建
- 关键词：白花丹白花丹醌高效液相色谱法
- 白花丹醌对瘦素刺激的人肝星状细胞周期及其相关蛋白表达的影响被引量：10
- 2012年
- 目的研究白花丹醌对瘦素刺激的体外培养人肝星状细胞(HSC-LX2)细胞周期及周期相关蛋白表达的影响,探讨白花丹醌抗肝纤维化的作用机制。方法 ELISA法检测HSC-LX2细胞培养上清液中自分泌瘦素水平。将HSC-LX2细胞分成对照组,瘦素组,白花丹醌2、8μmol/L组,秋水仙碱6.25μg/mL阳性对照组。除对照组外,其余各组细胞用瘦素100μg/mL刺激24 h、再与药物共同培养24 h后,流式细胞仪检测HSC-LX2细胞周期,Western blotting法检测细胞周期相关蛋白cyclin D1、cyclin E1、p21的表达。结果 HSC-LX2细胞自分泌瘦素的浓度先随着培养时间的延长而递减,24 h达到低谷值,48 h后又升至6 h水平,每个时间点分泌的瘦素量无显著差异(P>0.05)。与对照组相比,瘦素组HSC-LX2细胞增殖能力显著增强,S期和G2/M期细胞比例显著增加;白花丹醌2、8μmol/L干预HSC-LX2细胞后,G0/G1期细胞的比例明显提高,而S期和G2/M期细胞比例明显降低,且呈明显的浓度相关性。与对照组比较,瘦素组HSC-LX2细胞经瘦素刺激后细胞周期相关蛋白cyclin D1、cyclin E1的量显著增加,p21蛋白的表达受到抑制;白花丹醌2、8μmol/L和秋水仙碱明显降低cyclin Dl、cyclin E1蛋白水平,增强p21蛋白表达。结论白花丹醌可明显抑制瘦素诱导的HSC-LX2细胞增殖,该作用主要是通过抑制细胞由G0/G1期向S期转变而产生的,作用机制可能与其降低cyclin Dl、cyclin E1蛋白水平,增加p21蛋白表达相关。
- 韦燕飞李景强张志伟张园王玖恒赵铁建
- 关键词：白花丹醌瘦素人肝星状细胞细胞周期细胞周期相关蛋白
- 人胚胎肝细胞体外培养相关技术研究进展被引量：1
- 2008年
- 肝脏是人体代谢、生物转化的重要器官。肝脏疾病临床、药物代谢以及药效药性评价等医药研究都需要一个肝脏的体外模型作为研究平台。目前国内外研究认为,人胚胎肝细胞是构建肝脏体外研究模型的较理想材料。随着肝脏临床及基础研究的日益深入,对胚胎肝细胞体外模型的数量和质量的要求将越来越高。主要对人胚胎肝细胞的分离、培养、鉴定及冻存技术的研究进展进行综述。
- 彭岳赵铁建
- 关键词：冻存
- 肝纤维化血瘀证研究及动物模型构建的思考被引量：9
- 2010年
- 血瘀证是大部分肝纤维化疾病的基本病理改变、是其本质之一,可从血瘀证的角度出发研究肝纤维化的形成和逆转机制。要进行中西医结合的肝纤维化血瘀证研究,应在中医血瘀证的理论的指导下,改良造模方法构建新型的血瘀型肝纤维化动物模型。该模型应在复制人类肝纤维化疾病的同时,具有血瘀证的病变特点和病机特色。
- 彭岳吴光苏傲蕾赵铁建
- 关键词：肝纤维化血瘀证实验动物模型
