贵州省科技计划项目([2003]JGY005)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：方宁陈代雄刘金伟刘祖林章涛更多>>
- 相关机构：遵义医学院附属医院更多>>
- 发文基金：贵州省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人胎盘组织造血干/祖细胞的分离富集被引量：4
- 2006年
- 为了探索从胎盘组织中分离富集造血干/祖细胞(HSPC)的标化流程,采用机械法加胶原酶消化法制备人胎盘组织单个细胞悬液,用羟乙基淀粉(6%HES)法从中分离出单个核细胞(MNC),再经免疫磁珠分选法分选出CD34-、CD34+CD38-、CD34+CD38+3个细胞亚群,用流式细胞术对各阶段分选细胞进行表型分析并计算分选细胞的富集度和回收率。结果表明:机械法加胶原酶消化法制备的人胎盘组织单个细胞悬液中单个核细胞(MNC)数达(12.30±3.51)×108,与脐血初始样品所含的MNC数(8.86±5.38)×108比较差异无统计学意义,而其CD34+细胞所占百分率[(3.93±2.31)%]则明显高于脐血[(0.44±0.29)%]。胎盘组织单个细胞悬液经6%HES分离后MNC和CD34+细胞的回收率分别为(45.3±11.7)%和(51.1±9.8)%;MNC经免疫磁珠分选后,其CD34+细胞的纯度和回收率分别为(73.4±14.1)%和(52.7±11.7)%。结论:本实验所建立的"机械法加胶原酶消化法-HES分离MNC-MACS分选目标细胞"的分离纯化方法可从胎盘组织获得高丰度、高富集度、高活性的HSPC,为进一步研究胎盘HSPC提供了比较经济、效果较好的分离富集方案。
- 章涛陈代雄方宁刘祖林祁莹刘金伟
- 关键词：CD34抗原造血干细胞胎盘脐血
- 两种分离人胎盘组织单个核细胞方法的比较
- 2005年
- 目的探讨从人胎盘组织制备高丰度单个核细胞(MNC)的方法。方法采用机械法加胶原酶消化法制备人胎盘组织单个细胞悬液,再分别用羟乙基淀粉(6%HES)和Ficoll分离其中的MNC,并对分离效果进行比较。结果胎盘组织单个细胞悬液经6%HES分离后MNC的回收率为(45.3±11.7)%,而经Ficoll分离为(24.1±5.5)%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01),前者分离MNC的回收率明显高于后者。结论6%HES分离法优于Ficoll法,其可从胎盘组织获得高丰度的MNC。
- 章涛陈代雄方宁刘祖林刘金伟万卫红
- 关键词：人胎盘单个核细胞
