贵州省自然科学基金(J[2006]2122)
- 作品数:1 被引量:4H指数:1
- 相关作者:马欣荣管晓燕唐琳张绍伟吴志刚更多>>
- 相关机构:遵义医学院中国科学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金贵州省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 变异链球菌表面蛋白PAc基因A区与霍乱毒素B亚单位融合基因植物表达载体的构建被引量:4
- 2011年
- 目的构建变异链球菌表面蛋白PAc A区与霍乱毒素B亚单位的植物表达载体,为可食嵌合体防龋疫苗的进一步研究提供实验基础。方法从中间载体pBPC55获得含35s启动子、NOS终止子和多克隆位点的片段,定向连接到植物双元表达载体pCAMBIA2301上,构建重组载体p2355;通过PCR扩增从重组质粒pEAC10中获得表面蛋白PAcA区与霍乱毒素B亚单位的融合基因pacA-ctxB,克隆至重组质粒p2355中,构建植物表达载体p2355-PAcA/CTB,电转化法导入根癌农杆菌EHA105。PCR及酶切鉴定。结果 PCR扩增得到了含35s启动子、NOS终止子和多克隆位点的1.1kb大小片段,经酶切鉴定,该片段已经插入到植物双元载体pCAMBIA2301中。PCR扩增得到了pacA-ctxB基因;构建的质粒p2355-PAcA/CTB经XhoⅠ和KpnⅠ双酶切及PCR检测,均得到1.7kb大小的片段,与预计的嵌合目的基因片段大小相同。结论成功构建pacA-ctxB融合基因的植物表达载体p2355-PAcA/CTB。
- 吴家媛马欣荣唐琳张绍伟管晓燕洪献忠吴志刚张剑梁文红刘建国
- 关键词:变异链球菌植物表达载体表面蛋白霍乱毒素B亚单位