国家自然科学基金(81120108003) 作品数:5 被引量:33 H指数:3 相关作者: 余细勇 李晓红 肖静 朱杰宁 林秋雄 更多>> 相关机构: 广东省人民医院 广州医科大学 广东食品药品职业学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
Cardinal roles of miRNA in cardiac development and disease 被引量:13 2011年 MicroRNAs(miRNAs) are small noncoding RNAs that are emerging as pivotal modulators in virtually all aspects of cardiac biology,from cardiac development to cardiomyocyte survival and hypertrophy.The miRNA profiling,following gain-and loss-of-function studies using in vitro and in vivo models,has identified wide-ranging functions for miRNAs in the heart,providing new perspectives on their contributions to cardiac pathogenesis,and revealing potential therapeutic targets and diagnostic biomarkers.This review summarizes current progress in regulation of miRNAs in heart development and disease. FENG YuLiang YU XiYong关键词:MIRNA CARDIAC DEVELOPMENT DISEASE HSF1/miR-34a/HSP70相互作用在干细胞移植治疗心肌梗死中的重要作用 目的:干细胞在移植后心肌中极低的存活率是影响干细胞治疗从基础到临床转化的关键障碍。本研究的目的在于探索提高干细胞移植后存活率的安全、有效方法及其中促存活的信号通路。方法与结果:小鼠骨髓间充质干细胞为研究对象,分离纯化得到... 冯宇亮 余细勇关键词:HSP 心肌梗死 细胞移植治疗 成年大鼠骨骼肌干细胞的制备与新型培养方法 被引量:3 2013年 目的:建立高效分离和扩增成年大鼠骨骼肌干细胞的实验方法。方法:通过混合酶消化法从少量成年大鼠骨骼肌样品中分离出骨骼肌干细胞;采用悬浮培养法培养获得骨骼肌干细胞团,批量扩增骨骼肌干细胞;用qRT-PCR和免疫细胞化学染色检测干细胞标志物Nanog、Oct4和骨骼肌干细胞标志物肌源性因子5(myogenic factor 5,Myf5)、配对盒蛋白7(paired box protein 7,Pax7)的表达;成脂或成骨分化诱导培养基诱导检测骨骼肌干细胞的多功能性。结果:采用混合酶消化法可获得骨骼肌干细胞单细胞,在悬浮的培养条件下能快速克隆成骨骼肌细胞团,贴壁培养后能看到骨骼肌干细胞从细胞团中爬出来,和传统的差速贴壁方法相比悬浮培养法获得的骨骼肌干细胞纯度更高,细胞状态更好,干性因子Nanog、Oct 4和骨骼肌干细胞标志物Myf5、Pax 7的表达更高(P<0.05);在不同培养基的诱导下能向骨骼肌、成骨和脂肪细胞系分化。结论:悬浮培养法能获得大批量干性好、纯度高、具有多向分化潜能的骨骼肌干细胞,从而为肌肉相关疾病的细胞治疗提供优良的种子细胞。 黄郁凯 李晓红 潘宇 林秋雄 朱杰宁 江雪燕 叶力通 余细勇关键词:成年大鼠 骨骼肌干细胞 干扰素γ刺激hUC-MSCs分泌外泌体促进调节性T细胞生成 被引量:12 2017年 目的探讨生理和炎性微环境下人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,h UCMSCs)能否通过外泌体诱导调节性T细胞的生成来发挥免疫抑制功能。方法胶原酶消化法分离h UC-MSCs,应用流式细胞术鉴定h UC-MSCs。IFN-γ模拟体内炎性微环境,以未预处理为对照,分别提取外泌体,得到Nor-h UC-exo和IFN-γ-stimulated h UC-exo,分析其浓度及粒径分布等特征、并鉴定表面标记蛋白CD63的表达。采用h UC-MSCs、Nor-h UCexo、IFN-γpretreated-h UC-MSCs、IFN-γstimulated h UC-exo与人外周血单个核细胞共培养5 d后,流式细胞术检测T细胞的增殖、调节性T细胞的比例变化。结果 h UC-MSCs高表达CD73、CD44等间充质干细胞标志物。IFN-γ刺激前后外泌体粒径无明显变化,但IFN-γ刺激后分泌量和CD63增加(P<0.05)。CFSE染料示踪结果显示,h UC-MSCs来源的外泌体抑制PBMCs增殖(P<0.01),且IFN-γ刺激后明显提高外泌体的免疫抑制能力(P<0.01)。在活化T细胞中,IFN-γ-stimulated h UC-exo组Treg比例(11.53±0.88%)与IFN-γpretreated-h UC-MSCs组(7.54±0.50%)(P<0.05)、Norh UC-exo组(6.60±0.56%)(P<0.01)、对照组(3.87±0.73%)(P<0.01)相比升高。结论 h UC-MSCs可通过分泌外泌体来发挥免疫调节作用,在炎症因子刺激下h UCMSCs分泌的外泌体明显促进调节性T细胞的生成,h UC-exo可能是潜在的免疫抑制载体。 杨翔宇 李晓红 肖静 胡洁媚 冯娟 霍然 何国东 吴岳恒 余细勇关键词:脐带 外泌体 调节性T细胞 碱性成纤维细胞生长因子对成年大鼠骨骼肌干细胞增殖和迁移的作用 目的:骨骼肌干细胞也称骨骼肌卫星细胞,主要存在于肌纤维的肌膜层与基底膜之间,具有自我更新、多向分化的能力,在骨骼肌的损伤修复中起着重要的作用,并在心肌疾病的自身修复中显示了良好的临床应用前景。本文旨在探索碱性成纤维细胞生... 黄郁凯 李晓红 潘宇 林秋雄 朱杰宁 江雪燕 叶力通 林曙光 余细勇关键词:骨骼肌干细胞 成年大鼠 碱性成纤维细胞生长因子 THE PROFIBROTIC ROLE OF MICRORNA-208B IN DIABETIC MYOCARDIAL FIBROSIS Myocardial fibrosis plays a critical role in the process of diabetic cardiac remolding. MicroRNAs are endogeno... 林秋雄 郭林林 朱杰宁 黄帅 邓春玉 余细勇 单志新Stemness and differentiation of pre-existing cardlosphere-derived cells were modulated by telocyte microenvironment <正>Aim:Many studies have shown the existence of telocytes as a distinct type of cell in human and mammalian my... Xi-yong YU Yu-kai HUANG Yu PAN Xiao-hong LI Qiu-xiong LIN Zhi-xin SHAN Min YANG关键词:MICROENVIRONMENT DIFFERENTIATION 文献传递 衰老对缺氧刺激下心脏干细胞生物学功能的影响 2015年 目的 探讨衰老对缺氧损伤刺激下心脏干细胞(CSC)生物学功能的影响.方法 原代分离小鼠干细胞抗原1 (Sca1)+ CSC,培养6代后采用衰老β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色鉴定细胞衰老情况.比较正常培养和缺氧培养第1代和第6代Sca1+ CSC增殖速度,血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)-A、PDGF-B mRNA水平,及VEGF和PDGF-BB分泌水平.将12只青年小鼠和12只老年小鼠各均分为心肌缺血组和假手术组,心肌缺血组采用冠状动脉前降支结扎法建立心肌缺血模型,术后3d取心脏分离细胞,采用流式细胞仪检测Sca1+ CSC水平.结果 第6代Sca1+ CSC与第1代Sca1+ CSC比较体积明显增大,SA-β-Gal蓝染,第1代Sca1+ CSC未见SA-3-Gal蓝染细胞.第6代Sca1+ CSC增殖率明显低于第1代Sca1+ CSC[(18±5)%比(103±27)%](P<0.01).缺氧培养后,第1代Sca1+ CSC增殖率[(58±11)%]明显降低(P<0.05),第6代Sca1+ CSC增殖率[(26±8)%]无明显改变(P>0.05).缺氧培养与正常培养比较,第1代CSC中VEGF、PDGF-A和PDGF-B mRNA水平明显增加,第6代Sca1+ CSC中VEGF、PDGF-A和PDGF-B mRNA水平无明显变化,第1代Sca1+ CSC中VEGF和PDGF-BB分泌水平明显增加[(150±37) μg/L比(18±6)μg/L、(288±37) μg/L比(35±6)μg/L],差异有统计学意义(均P<0.01),第6代Sca1+ CSC中VEGF和PDGF-BB分泌水平无明显变化,差异无统计学意义(均P>0.05).心肌缺血组老年和青年小鼠Sca1+ CSC水平均明显高于假手术组[(13.2±4.2)%比(1.5±0.4)%、(31.7±6.5)%比(5.0±0.6)%](P<0.05),2组老年小鼠Sca1+ CSC水平均明显低于青年小鼠(P<0.05).结论 衰老可致缺氧损伤刺激下Sca1+ CSC增殖能力、分泌能力以及损伤后的动员能力下降. 潘宇 肖静 李晓红 蔡飒 余细勇关键词:衰老 心脏干细胞 缺氧 MICRORNA-16 MODULATES CELL CYCLE ARREST IN CARDIOMYOCYTES CONTRIBUTING TO INHIBITION OF MYOCARDIAL HYPERTROPHY MicroRNAs play an important role in many cardiovascular diseases through modulation of gene expression at the ... 单志新 黄帅 朱杰宁 林秋雄 符永恒 邓春玉 余细勇转染isl1基因促进骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化 被引量:5 2012年 目的:Isli蛋白在心脏发生和多能心脏祖细胞分化调节中发挥着重要作用,本文旨在探寻转染isl1基因是否能提高骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的能力。方法:利用携带isl1基因的慢病毒(LVS-isl1)感染人骨髓间充质干细胞,通过Puromycin筛选获得稳定细胞株,并对其进行RT-PCR和Western blotting鉴定。以共培养为基础,用real-time PCR、Western blotting以及免疫荧光法检测Isl1蛋白的心肌诱导能力。结果:RT-PCR和Western blotting表明成功获得稳定细胞株BMSC-isl1,real time-PCR结果显示BMSC-isl1组较之BMSCs组和BMSC-vehicle组GATA结合蛋白4、NK2转录因子5、肌细胞增强因子2C和兰尼碱受体2的表达量分别提高了2.3、2.7、2.6和3.2倍;Western blotting以及免疫荧光法结果均提示BMSC-isl1组内心肌肌钙蛋白T、心肌肌钙蛋白I和α-辅肌动蛋白的表达均比BMSCs组和BMSC-vehicle组要高。结论:转染isl基因的BMSCs不仅可以稳定表达Isli蛋白,而且在微环境共培养条件下,可以提高BMSCs向心肌细胞分化的能力。 李杏肖 李晓红 林秋雄 肖定璋 刘晓颖 单志新 朱杰宁 麦丽萍 夏慧苏 余细勇关键词:骨髓间充质干细胞 慢病毒 心肌样细胞