江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(CXZZ11-0996)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：贾筱琴郑英张露萍王海燕更多>>
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- 发文基金：江苏省普通高校研究生科研创新计划项目江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人睾丸酵母双杂交cDNA文库的构建与鉴定
- 2012年
- 目的:构建应用于酵母双杂交系统的人睾丸组织cDNA文库。方法:从正常人睾丸组织总RNA中纯化出mRNA,以SMARTШTM和CDSШ为引物,合成两端具有同源臂的双链cDNA,后者与线性质粒pGADT7-Rec共转化入感受态酵母细胞Y187,两者在酵母细胞中同源重组成环形的cDNA文库质粒,收集在营养缺陷培养板上筛选出的所有克隆,即为人睾丸酵母双杂交cDNA文库。结果:构建了具有基因多样性和库容量足够大的人睾丸cDNA文库,共获得2×106个转化子,插入的双链cDNA片段的长度在0.3～4.0 kb之间。结论:利用ClontechSMART技术,成功构建了应用于酵母双杂交的人睾丸组织cDNA文库,为探讨人精子发生的分子机制奠定了基础。
- 郑英张露萍贾筱琴王海燕
- 关键词：酵母双杂交CDNA文库睾丸
