浙江省公益性技术应用研究计划项目(2012C37084)
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 相关作者：吴宝金杨伟伟顾美儿李高天刘桂杰更多>>
- 相关机构：杭州师范大学浙江大学江苏大学更多>>
- 发文基金：浙江省公益性技术应用研究计划项目卫生部科学研究基金浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- Plcd1转基因小鼠的制备被引量：1
- 2013年
- 通过制备Plcd1转基因小鼠研究Plcd1基因功能.首先逆转录PCR获得约2.2kb的Plcd1基因全长,T载体克隆后测序验证;以pMD19-T-Plcd1为模板,通过设计引物及PCR扩增引入酶切位点,与pEF6/V5-His同时进行酶切、连接,构建pEF6/V5-His-Plcd1表达载体;经真核表达验证后,酶切获得目标片段,显微注射681枚受精卵,在82只仔鼠中获得转基因阳性首建鼠15只,其中13只稳定遗传并建系.PLCD1-HIS融合蛋白在睾丸组织中表达,在皮肤组织中无表达.Plcd1转基因小鼠为Plcd1功能研究奠定了基础.
- 杨伟伟殷筱舒殷黎静张艳丽李高天刘桂杰俞利平顾美儿吴宝金
- 关键词：显微注射转基因小鼠
- 三例眼部突变小鼠的培育及特征分析
- 2014年
- 目的筛选培育眼部突变表型小鼠,为人类相关疾病的研究提供材料。方法采用N-乙基-N-亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)诱变处理G0代小鼠,繁育获得G1代,筛选眼部突变表型个体,进行遗传力试验、临床诊断及病理学观察。结果本实验繁殖G1代小鼠2782只,经筛查获得眼部突变表型小鼠65只,可稳定遗传小鼠3例,分别表现为:角膜混浊、小眼球和虹膜异常等特征。角膜混浊者其角膜症状严重程度差异较大,角膜病变部位明显增厚,部分伴有新生血管;小眼球者睑裂较小,甚至上下眼睑粘连,外观眼球不可见,病理学检查可见内有发育异常的小眼球;虹膜异常者可见瞳孔偏大,明显偏离中心位置,偏向位置不定,对光无反射,病理学观察可见虹膜晶状体粘连、虹膜缺损,严重者伴有视网膜异常等。结论本实验成功培育了3例眼部突变表型小鼠,为人类相关疾病的研究提供良好的材料。
- 杨伟伟金红颖吴晓玲周祥李高天刘桂杰顾美儿俞利平宋晓明吴宝金
- 关键词：眼部疾病小鼠模型诱变
- 豚鼠基因组26个多态性微卫星标记的筛选被引量：5
- 2014年
- 目的筛选豚鼠基因组的多态性微卫星标记,为豚鼠遗传质量控制及基因定位等工作奠定基础。方法采用磁珠富集法和豚鼠基因组数据库筛选法获取微卫星位点序列,通过分析和初步筛选,挑选部分候选位点,根据其序列设计引物,对5种不同来源的豚鼠基因组DNA标本进行PCR扩增,以期获得多态性分子标记。结果本实验采用磁珠富集法共获得微卫星序列304个,设计引物125对,最终获得多态性位点1个,暂未发现多态性的特异性位点17个;用数据库筛选法共获得微卫星序列292个,设计并合成相应引物178对,最终发现多态性位点25个,暂未发现多态性的特异性位点28个。结论本实验获得26个多态性微卫星标记,45个潜在的候选标记,为微卫星标记在豚鼠遗传质量监测及突变基因定位等工作的应用奠定了基础。
- 刘迪文杨伟伟吴宝金
- 关键词：微卫星
