国家自然科学基金(31060025)
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 相关作者：马正海史茜侯向前朱开春玛依努尔·尼牙孜更多>>
- 相关机构：新疆大学新疆维吾尔自治区人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HPV-16 URR突变对病毒早期启动子活性影响的研究
- 2017年
- 背景与目的:新疆是宫颈癌高发区,该地区宫颈癌高发与人乳头瘤病毒16型(human papillomavirus type 16,HPV-16)感染密切相关。该研究旨在分析新疆地区妇女宫颈病样组织中HPV-16上游调控区(upstream regulatory region,URR)的突变及其功能。方法:以新疆妇女子宫颈上皮非典型增生(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈癌病样组织标本DNA为模板,PCR扩增HPV-16 URR片段,PCR产物经测序比对,筛选代表性的URR突变体构建至p GL3-Basic载体,将其转染Vero细胞,48 h后检测荧光素酶活性,分析URR突变体启动子活性。结果:采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)获得了55个HPV-16 URR DNA片段,测序及序列分析发现44个突变位点,其中nt7192(G→T)、nt7433(-→T)、nt7435(C→G)和nt7863(A→-)4个位点的突变为所有序列共有,nt7520(G→A)位点的突变存在于54个样品中,剩余39个位点的突变存在于不同样品中。根据突变的位置、频率和程度,筛选出9个URR突变体分别克隆至p GL3-Basic中荧光素酶基因前并转染Vero细胞。荧光素酶活性分析表明,不同URR突变体的启动子活性差异较大,来源于宫颈癌的URR突变体启动子活性显著高于来源于CIN的URR突变体(P<0.01),部分宫颈癌URR突变体的启动子活性显著高于Si Ha和Caski细胞来源的URR参照序列的启动子活性。结论:新疆地区分离的HPV-16URR发生多位点突变,其中部分突变增强了URR内部启动子的活性,导致HPV-16致癌活性增强。
- 宋丹史茜侯向前玛依努尔.尼亚孜马正海
- 关键词：人乳头瘤病毒16型上游调控区突变启动子
- 基因芯片筛选新疆维吾尔妇女宫颈癌差异表达基因被引量：2
- 2015年
- 新疆南部维吾尔族聚居区是宫颈癌高发区.本文旨在利用基因芯片技术筛选与维吾尔族妇女宫颈癌发生相关的基因.首先,分别提取5例新疆维吾尔妇女宫颈癌和5例子宫肌瘤组织(对照)的m RNA,逆转录成c DNA,并用Cy3-d UTP标记子宫肌瘤组织的cDNA,用Cy5-d UTP标记宫颈癌组织的c DNA,制成芯片杂交探针.为筛选出宫颈癌组织中差异表达的基因,上述标记探针分别与含有20 000条人类基因的Affymetrix基因芯片进行杂交,杂交信号用Gene Chip Scanner 3000扫描仪扫描,并用芯片图像分析软件(SAM software)分析扫描结果.筛选出的差异表达基因经GO(Gene Ontology)分析和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)信号通路分析,确定其在宫颈癌中的作用.基因芯片筛选结果显示,在宫颈癌组织中发现2 758个差异表达基因,其中1 326个上调基因,1 432个下调基因.GO分析和KEGG信号通路分析表明,表达差异在两倍以上的基因涉及168个信号通路,包括细胞粘附分子、细胞周期以及MAPK和mTOR信号通路等.上述结果表明,基因芯片技术筛选出大量与宫颈癌发生相关的基因,其中表达差异显著的基因涉及细胞粘附分子、细胞周期和m TOR等信号通路.
- 艾科热木江.台外库朱明月热孜宛古丽.阿卜力米提宋丹玛依努尔.尼牙孜马正海
- 关键词：基因芯片宫颈癌维吾尔族
- HPV-16 E1蛋白的表达、纯化及其抗体制备被引量：3
- 2011年
- 目的:在原核细胞中表达、纯化人乳头状瘤病毒16型(HPV-16)E1蛋白并制备HPV-16 E1特异性抗体。方法:PCR扩增HPV-16 E1基因,将其构建至原核表达载体pMAL-p2x,转化大肠杆菌BL-21菌株。通过改变诱导温度与IPTG浓度优化HPV-16 E1蛋白可溶性表达的条件,并用麦芽糖亲和层析法纯化该蛋白。纯化蛋白经皮下及足垫免疫新西兰白兔制备抗血清,ELISA和Western blot检测血清效价和特异性。结果:酶切和测序结果表明HPV-16 E1基因已克隆入pMAL-p2x。经优化筛选出HPV-16 E1融合蛋白诱导表达的最佳条件为28℃,IPTG浓度0.5 mmol/L。经麦芽糖亲和层析法纯化获得了HPV-16 E1可溶蛋白,纯度达到95.7%。West-ern blot检测证明制备的抗血清能与HPV-16 E1蛋白特异性结合,ELISA检测表明获得的抗血清效价达到1∶640 000以上。结论:在大肠杆菌中表达并纯化获得了HPV-16 E1蛋白,该蛋白免疫新西兰白兔制备了高效价的HPV-16 E1蛋白抗血清,为HPV-16 E1功能研究提供了抗原和检测用抗体。
- 史茜侯向前郭景霞朱慧马正海
- 关键词：HPV-16E1基因原核表达纯化抗体
- Aurora B表达水平与宫颈癌发生的相关性
- 2020年
- 探究Aurora B在宫颈癌组织中的表达水平以及抑制Aurora B对宫颈癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响,采集未经放疗和化疗的宫颈癌组织和子宫肌瘤组织(对照),提取总RNA,实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)检测Aurora B在宫颈癌组织中的表达水平,分析Aurora B与宫颈癌发生的相关性。以不同量的Aurora B抑制剂AZD1152-HQPA处理SiHa、HeLa和293FT(对照)细胞,CCK-8细胞增殖检测法检测对细胞增殖的抑制率,Transwell小室侵袭和Transwell迁移实验检测细胞侵袭和迁移能力。Aurora B mRNA在宫颈癌中的表达(0.00388±0.000560)极显著高于(p<0.01)在子宫肌瘤中的表达量(0.00103±0.000161),表达上调3.76倍。AZD1152-HQPA抑制Aurora B激酶活性时,宫颈癌细胞系实验组的侵袭细胞数和迁移细胞数均极显著低于对照组(p<0.01);且AZD1152-HQPA浓度从50 nmoL升高至100 nmoL时,侵袭细胞数和迁移细胞数极显著降低(p<0.01)。Aurora B在宫颈癌组织中表达水平显著提高,其可能通过促进癌细胞增殖、侵袭和迁移来促进肿瘤的发生,是宫颈癌诊断和治疗的潜在靶标之一。
- 彭瑞娟宋丹玛依热·努尔艾合麦提阿木提喀日·马木提玛依努尔·尼牙孜马正海
- 关键词：宫颈癌细胞增殖细胞侵袭
- 新疆妇女宫颈癌组织中HPV-16 E1/dup突变体分布的研究被引量：1
- 2012年
- 目的检测HPV-16 1311～1773位63bp重复序列插入突变的E1基因(E1/dup)在宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈癌病变组织中的分布及病毒的整合状态,探讨该突变对病毒致癌活性的影响.方法收集维吾尔族和汉族宫颈炎、CIN和宫颈癌临床组织标本215例,提取组织DNA,PCR检测E1/dup突变体以及病毒E1/E2基因的完整性.结果新疆地区215例宫颈病变组织中HPV-16 E1检出率为60.00%(129/215),宫颈炎、CIN及宫颈癌病样中HPV-16 E1的检出率分别为31.15%(19/61)、49.21%(31/63)和86.81%(79/91).在HPV-16E1阳性病样中,HPV-16 E1/dup突变率为37.21%(48/129),宫颈炎、CIN和宫颈癌病样中E1/dup突变率分别为15.79%、22.58%和48.10%,E1/dup突变率在宫颈癌中显著高于宫颈炎(P<0.05)和CIN(P<0.05).E1/dup突变率在汉族和维吾尔族宫颈癌病样中分别为40.00%(6/15)和50.00%(32/64),两者无显著性差异(P>0.05).在HPV-16 E1阳性病样中病毒整合率为51.72%(60/116),E1/dup突变病样中HPV16整合率[69.05%(29/42)]明显高于未发生E1/dup突变的病样[41.89%(31/74)](P<0.05).结论新疆地区E1/dup突变率在宫颈癌中显著高于宫颈炎及CIN,E1/dup与病毒致癌活性及病毒整合相关.
- 侯向前史茜朱开春玛依努尔.尼亚孜马正海
- 关键词：HPV-16宫颈癌E1
- 新疆地区宫颈癌和CIN患者HPV-16感染和血清中HPV-16L1抗体的检测及其临床意义被引量：4
- 2012年
- 目的探讨宫颈癌和宫颈上皮内瘤变(CIN)患者血清中HPV-16 L1抗体水平及其与HPV-16感染的关系。方法收集宫颈癌患者51例和CIN(包括CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ)患者44例。取患者宫颈病变组织并提取组织DNA,PCR检测HPV-16 DNA。同时取患者血样,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清样品中HPV-16 L1抗体。结果宫颈癌组中HPV-16DNA的阳性率为82.4%,CIN组为52.3%。宫颈癌组血清HPV-16 L1抗体阳性率为70.6%,CIN组为79.5%。宫颈癌组中HPV-16 DNA阳性而HPV-16 L1抗体阴性的比例为27.5%,显著高于CIN组的9.1%(P<0.05);宫颈癌组HPV-16 DNA阴性而HPV-16L1抗体阳性的比例为15.7%,显著低于CIN组的36.4%(P<0.05)。宫颈癌组HPV-16 DNA和患者HPV-16 L1抗体均阳性的重合率为54.9%,CIN组为43.2%。结论 CIN和宫颈癌患者HPV-16 L1抗体的产生与HPV-16 DNA的检出率相关,血清中HPV-16 L1抗体可作为宫颈癌和CIN病程的辅助诊断指标。
- 阿尼克孜·阿不都艾尼马正海史茜候向前玛依努尔·尼牙孜朱开春
- 关键词：人乳头状瘤病毒宫颈癌
