国家自然科学基金(31060022)
- 作品数：4 被引量：57H指数：4
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- 相关领域：环境科学与工程轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 黄曲霉毒素B_1降解菌的分离鉴定及其降解特性被引量：29
- 2012年
- 【目的】黄曲霉毒素是一类强毒、致癌的真菌次级代谢产物。本文旨在筛选出能高效降解黄曲霉毒素B1(AFB1)的细菌。【方法】以AFB1结构类似物香豆素为惟一碳源进行AFB1降解菌株初筛,得到的活性菌株的培养液分别与AFB1标准品(2.5μg/mL)共同作用,以AFB1降解率为指标进行复筛。对降解活性最好的菌株通过形态、生理生化特性以及16S rRNA序列分析进行初步鉴定;并对细胞浓度、pH、温度、金属离子等对菌株降解活性的影响进行考察。【结果】初筛获得了10株在香豆素培养基上生长良好的细菌,复筛发现这些菌均具有良好的AFB1降解活性,其中从金毛羚牛粪便中筛选出的菌株F4降解活性最好,去除AFB1能力达到90.03%。根据F4菌株16S rRNA序列同源性分析,结合形态、生理生化特性,初步确定菌株F4为施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)。F4的降解活性与细胞浓度呈正相关。当pH 7.0,35℃,菌细胞作用72 h后毒素降解率达到82.91%。Mg2+可增强F4的降解活性,降解率提高7.68%,而Cu2+可抑制其降解活性,降解率降低51.1%。【结论】筛选到能高效降解AFB1的施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)F4,F4降解毒素的活性物质主要存在于菌体细胞,其作用受到温度、pH等的影响,可能是一种胞内酶。
- 李超波李文明杨文华李海星刘晓华曹郁生
- 关键词：黄曲霉毒素B1生物降解施氏假单胞菌
- 降解黄曲霉毒素微生物筛选中降解与吸附结合作用的区分被引量：17
- 2012年
- 黄曲霉毒素的污染不仅带来巨大的经济损失,而且严重危害人和动物的健康,因而生物降解真菌毒素一直引人关注。但在研究黄曲霉毒素微生物降解时,首先必须要有可靠的方法来判定毒素是被降解还是可逆的吸附结合。该文在黄曲霉毒素B1(AFB1)降解菌株筛选中,对区分降解与吸附结合作用的方法进行了研究,建立了可靠的分析方法,通过比较不同pH的影响,细胞灭活对AFB1去除的影响,分析菌株细胞水洗脱、有机溶剂萃取后AFB1的变化等方法,有效地排除了生物吸附结合以及pH的干扰,区分了降解作用和可逆的吸附作用,这些方法简单实用。据此,从动物粪便中成功筛选到了2株能高效降解AFB1的菌株F4、F7。
- 李超波李文明杨文华杨小龙曹郁生
- 关键词：黄曲霉毒素B1微生物降解
- 黄曲霉毒素B1降解酶的分离纯化及其酶学特性被引量：8
- 2014年
- 施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)F4能产生黄曲霉毒素B_1的降解酶(aflatoxin B_1-degrading enzyme,ADE),本实验通过3步法提取纯化ADE,即包括硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose阴离子交换柱层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析。结果表明,通过以上纯化方法,ADE的回收率为56%,纯化的ADE比活力为6.4x10^4U/mg,纯化了123倍。利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得ADE分子质量约为24kD;ADE与AFB_1反应的最适温度和pH值分别为30℃和6.0;CU^(2+)对ADE酶活性有抑制作用;利用双倒数作图法测得ADE表观K_m值为5.61×10^(-5)mol/L。
- 杨文华李海星刘晓华曹郁生
- 关键词：分离纯化
- 施氏假单胞菌F4对黄曲霉毒素B_1的酶解作用及其降解产物的初步分析被引量：8
- 2013年
- 施氏假单胞菌F4能高效降解黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)。研究了F4的AFB1降解活性、降解动力学以及蛋白酶K和SDS对其降解性能的影响。F4细胞悬液与毒素共培养72 h后降解率达80.03%;蛋白酶K处理对降解率没有影响,SDS处理的细胞悬液基本丧失了降解活性。不同时间点的降解液上清液仍能有效降解残留AFB1,其中以60 h的降解液上清液活性较好,与残留AFB1继续作用48 h后降解率达84.30%;而经蛋白酶K处理后降解率仅为45.42%。低浓度AFB1诱导对菌体的降解活性没有影响。上述结果提示,F4通过胞内酶作用降解AFB1。高效液相色谱对产物分析表明,F4可将AFB1酶解为至少2种产物。
- 李文明杨文华李海星刘晓华曹郁生
- 关键词：黄曲霉毒素B1酶解作用
