国家教育部博士点基金(20030422018)
- 作品数:3 被引量:12H指数:2
- 相关作者:王志玉许洪芝宋绍霞任桂杰王桂亭更多>>
- 相关机构:山东大学更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 分子生物学技术在风疹病毒包膜糖蛋白研究中的应用被引量:2
- 2006年
- 风疹病毒(RV)是最重要的人类致畸病毒。对RV包膜糖蛋白的研究,有助于构建与表达RVRNA病毒样颗粒,用于核酸检测质控品的研究与开发;并且有助于理解RV产生免疫的机理,以研制基因工程疫苗、亚单位疫苗、多肽疫苗等新型疫苗。本文对分子生物学技术在RV包膜糖蛋白研究中的应用进展进行了综述,包括风疹病毒RNA病毒样颗粒的构建与表达、建立风疹病毒免疫学诊断方法以及制备基因工程疫苗和亚单位疫苗的研究等。
- 赵立红王志玉
- 关键词:风疹病毒包膜糖蛋白分子生物学技术
- 风疹病毒JR23株糖蛋白E1在毕赤酵母表达系统中的表达和抗原性分析被引量:8
- 2005年
- 目的 在毕赤酵母表达系统中表达风疹病毒 (rubellavirus ,RV)JR2 3株包膜糖蛋白E1 ,为研究E1蛋白的结构功能、开发基因工程疫苗和重组蛋白诊断试剂盒奠定基础。方法 E1基因的表达质粒 pGAPZαA E1经AvrⅡ线性化后用LiCl法转化酵母菌 ,在YPD(含 1 0 0 μg/mlZeocinTM)平板上两次筛选 ,挑出单菌落 ,于液体YPD中培养 ,并在不同时间收集培养物 ,用SDS PAGE和Westernblot进行分析。结果 SDS PAGE显示E1重组蛋白在毕赤酵母中高效稳定表达 ,在 4 8h时表达量达到最高 ,之后趋于稳定 ,上清和细胞中均有蛋白表达。Westernblot结果表明 ,上清中的E1重组蛋白能够分别与抗RV的阳性血清和单克隆抗体反应 ,而细胞中的E1重组蛋白只能与抗RV的阳性血清反应 ,不能与单克隆抗体反应。这说明所表达的蛋白一部分在信号肽的引导下分泌出胞 ,并经过折叠形成了正确的构像 ,能够与单克隆抗体结合 ;而另一部分由于蛋白本身的跨膜区连在了细胞膜上没有分泌出去 ,没有形成能够被单抗识别的构像 ,不能与单抗结合。结论 E1包膜糖蛋白在酵母菌中成功表达 ,且免疫反应性良好。
- 温红玲王志玉宋艳艳任桂杰陶泽新宋绍霞王桂亭许洪芝
- 关键词:毕赤酵母表达系统风疹病毒抗原性分析免疫反应性LICLE1基因
- 风疹病毒包膜糖蛋白分子生物学研究进展被引量:2
- 2005年
- 吴冰王志玉
- 关键词:包膜糖蛋白分子生物学研究病毒减毒活疫苗胎盘感染器官发育