国家自然科学基金(81000545)
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
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- 阿尔茨海默病免疫治疗研究进展
- 2011年
- AD已成为威胁人类晚年健康的一大隐患,其发病率有逐年上升之趋势,给社会带来沉重负担,对该病的研究显得非常紧迫。自1999年Schenk等人首次报道了Aβ肽疫苗免疫接种AD转基因小鼠取得的进展后,免疫治疗作为AD预防和研究的全新领域被开辟出来,并成为近年来研究的焦点之一。本文就该病的免疫治疗及疫苗研究进展作一综述。
- 袁茂运邹俊涛
- 关键词：阿尔茨海默病疫苗免疫治疗
- 新生期小鼠接种Aβ_(42)的免疫特性研究
- 2012年
- 目的观察新生期小鼠接种Aβ42后诱发的T细胞免疫效应变化,为下一步研究接种Aβ42影响小鼠认知功能做基础。方法新生24 h内的SPF级C57BL/6小鼠随机分2组,每组12只,新生24 h内皮下多点免疫接种Aβ42(80μg)加等体积量弗氏佐剂,对照组接种生理盐水加等体积量弗氏佐剂,于生后第1、2周末再加强免疫1次,4周末摘眼球采血,无菌取出小鼠脾脏。ELISA法检测抗体量,细胞流式分析CD4+/CD8+细胞的比值与Th1/Th2细胞的比值。结果 Aβ42组的抗体量是(31.03±4.15)μg/mL,高于对照组(P<0.01);与对照组小鼠脾脏细胞中CD4+/CD8+细胞的比值(0.55±0.19)相比,Aβ42组CD4+/CD8+细胞的比值(0.89±0.28)较高,Aβ42组小鼠脾脏细胞Th1/Th2细胞的比值(6.54±1.16)低于对照组小鼠脾脏细胞Th1/Th2细胞的比值(8.92±1.77),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论新生期接种Aβ42可以诱导小鼠产生抗Aβ42抗体,其免疫反应向Th2方向极化。
- 李少阳邹俊涛王淏杨俊华夏宇岑姚志彬
- 关键词：阿尔茨海默病AΒ42免疫反应
- 沉默Pokemon基因对鼻咽癌细胞株CNE-2放射敏感性的影响被引量：1
- 2012年
- 【目的】探讨沉默Pokemon基因对鼻咽癌细胞(CNE-2)放射敏感性的影响,寻求放射治疗鼻咽癌的新方法。【方法】首先利用siRNA预测软件得到3条siRNA序列,并制备合成siRNA片段,利用RT-PCR和免疫印迹法检测其沉默Pokemon基因的效果,筛选出沉默效果最佳的siRNA片段,转染CNE-2细胞后观察其对CNE-2细胞p53基因表达的影响、MTT法检测细胞的增殖活性、流式细胞术检测细胞的凋亡、克隆形成法检测转染siRNA联合放射处理后细胞的放射增敏比。【结果】成功筛选出了沉默效应最佳的siRNA片段,转染CNE-2细胞后能显著降低其Pokemon基因的表达、提高p53基因的表达、降低细胞的增殖活性、加速细胞的凋亡,同时增加了CNE-2细胞的放射敏感性。【结论】沉默Pokemon基因能增加鼻咽癌CNE-2细胞的放射敏感性,这为临床鼻咽癌的放射增敏治疗提供了新思路。
- 牛道立李建锋何芬邹俊涛周琼芳魏旋李杨陈龙华
- 关键词：POKEMON基因鼻咽癌
- 脑室内注射重组BDNF腺病毒对大鼠海马神经发生的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察脑室内注射BDNF对海马神经发生的影响。方法脑室内注射重组BDNF腺病毒4周后,Morris水迷宫进行行为学检测,双标组化染色方法观察海马新生神经元数目的变化。结果与对照组相比,实验组大鼠空间学习和记忆能力明显增强(P<0.05);实验组大鼠海马DG区Brdu/DCX阳性神经元数目明显多于对照组(P<0.05)。结论脑室内注射BDNF导致大鼠认知能力增强,海马Brdu/DCX阳性神经元数目增加,提示BDNF提高认知能力可能与其引起海马Brdu/DCX阳性神经元增加有关。
- 郎洪刚曹文斌杨俊华李少阳邹俊涛
- 关键词：脑源性神经营养因子
- siRNA干扰Pokemon基因对鼻咽癌CNE-2细胞生长作用的研究被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨siRNA干扰Pokemon基因对鼻咽癌CNE-2细胞生长作用的影响。方法:利用siRNA预测软件得到3条siRNA编码DNA序列,并制备合成siRNA片段,利用RT-PCR和蛋白质印迹法检测其沉默Pokemon基因的效果,筛选出沉默效果最佳的siRNA片段。利用MTT法和流式细胞术检测CNE-2细胞生长与凋亡情况。结果:筛选出一条≥50%沉默效应的siRNA片段,转染鼻咽癌CNE-2细胞后,Pokemon基因表达明显下降(P<0.05),p14ARF和p53基因表达上调,P<0.05。鼻咽癌CNE-2细胞增殖受到抑制(P=0.015),凋亡率升高,P=0.008。结论:Pokemon基因沉默后可抑制CNE-2细胞生长,促进细胞凋亡,其机制可能与p14ARF和p53的表达上调有关。
- 牛道立李建锋何芬邹俊涛周琼芳魏璇李杨陈龙华
- 关键词：RNA干扰鼻咽肿瘤
- 重组大鼠脑源性神经营养因子腺病毒的构建及体外表达分析被引量：2
- 2011年
- 目的构建含有大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)基因的重组腺病毒(AD)载体,并分析其体外表达情况。方法将采用RT-PCR技术获取的大鼠BDNF的cDNA基因定向克隆入穿梭质粒pAdTrack-CMV中。通过与腺病毒骨架载体pAdeasy-1在细菌内同源重组形成重组腺病毒质粒pAd-BDNF,转染人胚肾293细胞后包装成有感染能力的重组腺病毒颗粒(Ad-BDNF)。重组病毒感染体外培养的Hela细胞后,用RT-PCR、Western blot及免疫细胞化学检测细胞BDNF基因及蛋白表达情况。结果 pAd-BDNF测序结果和预期一致,同源重组并经293细胞包装后形成重组腺病毒Ad-BDNF,重组病毒感染Hela细胞后能高水平表达BDNF。结论成功制备了重组腺病毒Ad-BDNF,感染细胞证实其呈分泌表达,为将其进一步应用于神经系统损伤性疾病治疗的研究打下了基础。
- 郎洪刚曹文斌牛道立何芬
- 关键词：BDNF腺病毒基因治疗脑损伤
- 柔性肽串联四价Aβ_(15)重组腺病毒的构建及纯化被引量：2
- 2010年
- 目的构建并纯化含有柔性肽串联四价β-淀粉样蛋白(Aβ15)的重组腺病毒疫苗,用于老年性痴呆的预防和治疗。方法酶切获取带有IgGк轻链信号肽序列的柔性肽串联四价Aβ15基因,定向克隆于穿梭质粒pAdTrack-CMV中。通过与腺病毒骨架载体pAdeasy-1在细菌内同源重组形成重组腺病毒质粒pAd-4×Aβ15,转染人胚肾293细胞后包装成有感染能力的重组腺病毒颗粒(Ad-4×Aβ15)。Western检测4×Aβ15在培养液中的分泌表达。氯化铯密度梯度离心纯化重组腺病毒Ad-4×Aβ15。结果 pAdTrack-4×Aβ15测序结果和预期一致,同源重组并经293细胞包装后形成重组腺病毒Ad-4×Aβ15,western检测4×Aβ15在培养上清中表达。经氯化铯密度梯度离心纯化后Ad-4×Aβ15病毒颗粒数约为4.6×1012 VP/mL。结论成功制备了重组腺病毒Ad-4×Aβ15,感染细胞证实其呈分泌表达,经氯化铯密度梯度离心纯化后得到高滴度的重组腺病毒。为老年性痴呆(Alzheimer’s disease,AD)的实验治疗打下基础。
- 邹俊涛何芬牛道立徐杰杨俊华李少阳汪华侨袁群芳姚志彬
- 关键词：Β-淀粉样蛋白重组腺病毒阿尔茨海默病
