吉林省科技厅国际合作项目(20070729-20)
- 作品数：4 被引量：16H指数：2
- 相关作者：谭岩方艳秋王琦孙晓峰王中英更多>>
- 相关机构：吉林大学第一医院哈尔滨医科大学吉林省人民医院更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅国际合作项目吉林省卫生厅课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HIF-1α与VEGF在动脉粥样硬化闭塞症患者缺血下肢血管及肌组织中的表达及意义被引量：11
- 2009年
- 目的:研究缺氧诱导因子1(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)在动脉粥样硬化闭塞症(ASO)患者缺血下肢的表达及分布规律,为应用HIF-1α基因治疗缺血性疾病提供实验依据。方法:应用免疫组织化学SP法对15例ASO截肢患者肢体的血管、肌组织及3例正常人肌组织中的HIF-1α、VEGF蛋白进行检测;同时应用CD34标记血管,根据CD34阳性的血管内皮细胞数测定微血管密度(MVD)。结果:ASO患者缺血肢体主干血管及缺血肌组织内HIF-1α、VEGF表达灰度值较正常人均明显增加,MVD计数增加。增加最高的是胫后动脉(HIF-1α为932.5±545.2,VEGF为354.5±75.8,MVD为38.4±8.4),股浅动脉、胫前动脉、小腿缺血肌肌间动脉、小腿缺血肌以及足坏死肌中HIF-1α和VEGF表达量均明显低于胫后动脉;在缺血血管壁内,HIF-1α、VEGF表达量及MVD计数均随着缺血程度的加重而增加;而在缺血肌组织内,HIF-1α、VEGF表达量及MVD计数增加均与缺血程度无关联;HIF-1α、VEGF在缺血肌组织内的表达量均明显低于缺血大血管。结论:HIF-1α、VEGF在ASO患者缺血肢体主干血管和缺血肌组织中均有较高水平表达,但在缺血肌组织内的表达均明显低于缺血大血管。
- 孙晓峰所剑王琦刘婷崔阳王中英杨学明方艳秋谭岩
- 关键词：缺氧诱导因子1Α亚基缺血肢体动脉粥样硬化闭塞症
- HIF-1α治疗家兔肢体缺血模型的实验研究被引量：4
- 2008年
- 目的探讨缺氧诱导因子(HIF-1α)基因治疗家兔肢体缺血模型的疗效。方法在家兔缺血模型的肢体内注射携带/HIF-1α基因的重组腺病毒AdHIF-1α,检测HIF-1α基因在缺血肌组织中表达情况,并观察其生物学特点。实验以携带GFP基因的重组腺病毒AdGFP为对照。结果免疫组化染色均检测到HIF-1α的表达。转AdHIF-1α基因治疗组毛细血管计数及小动脉计数均高于AdGFP转导的对照组(P<0.05)。动脉造影证明基因治疗组促进缺血肢体侧支循环建立更为有效。结论家兔缺血肢体内注射AdHIF-1α能够获得外源基因蛋白质的有效表达,能有效的促进血管生成及侧支循环建立。
- 孙晓峰谭岩董春哲王琦方艳秋王中英
- 关键词：缺氧诱导因子基因治疗
- ODDD乏氧靶向HSV1-TK/GCV系统对体外肝癌细胞的杀伤作用被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨pEGFP-TK-ODDD基因表达载体乏氧特异性杀伤肝癌细胞的可行性。方法:通过LipofectamineTM2000将重组基因质粒pEGFP-TK-ODDD在肝癌细胞株SMMC7721和HepG2中进行瞬时转染。流式细胞仪分析EGFP的表达强度分析质粒转染效率。MTT法检测GCV作用24小时后转染细胞在不同氧浓度下的生存率。结果:SMMC7721细胞和HepG2细胞质粒转染效率分别为33.23%和36.97%;MTT结果显示,GCV浓度为12.5 mg/L时,缺氧环境下转染pEGFP-TK-ODDD基因表达载体的SMMC7721细胞和HepG2细胞存活率,细胞的生存率分别为81.25%和76.55%,明显低于对正常氧环境中细胞生存率的92.12%和94.36%(P<0.05)。结论:ODDD可以特异的调控HSV1-TK/GCV系统对乏氧肝癌细胞的靶向杀伤作用。
- 方艳秋刘磊谭岩蒋永兴
- 关键词：缺氧肝癌自杀基因
- ODDD调控EGFP基因的乏氧特异表达载体的构建及其意义
- 2012年
- 目的:构建乏氧诱导因子的氧依赖降解结构域(ODDD)调控的乏氧特异性表达荧光报告载体,探索其乏氧调控目的基因表达的可行性。方法:基因重组技术构建含有序列ODDD403-601aa、ODDD549-575aa和其2串联体调控增强型绿色荧光蛋白(EGFP)荧光报告载体。φA细胞中瞬时表达EGFP,应用RT-PCR技术、Westernblotting技术和流式细胞术检测ODDD调控EGFP乏氧特异性表达。结果:克隆得到了ODDD/EGFP表达载体,进行细胞转染实验,在细胞中成功表达EGFP。Western blotting检测,ODDD可以调控EGFP乏氧特异性表达。流式细胞术检测,正常氧浓度下细胞转染pEGFP-ODDD401-603、pEGFP-ODDD549-575和pEGFP-ODDD2(549-575)EGFP的荧光强度分别为(6.06±1.97)%、(11.99±1.13)%和(23.16±2.79)%,低于缺氧条件下EGFP的表达量(P<0.05)。结论:ODDD对靶基因对氧的反应性调节受细胞内的蛋白酶影响;ODDD的调控作用发生在翻译后的蛋白水平,且与细胞内蛋白酶系统功能密切相关。
- 方艳秋刘磊谭岩蒋永兴
- 关键词：缺氧增强型绿色荧光蛋白基因治疗
