国家高技术研究发展计划(2012AA020205)
- 作品数：29 被引量：128H指数：5
- 相关作者：徐伟文杜红延侯利平傅海媛魏开华更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医科大学南方医院军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学经济管理更多>>
- 转化医学模式下疾病标志物的挖掘被引量：3
- 2014年
- 疾病标志物是用于疾病的鉴定、早期诊断及预防、治疗过程中的监控。疾病标志物的挖掘包括发现、验证、确认与应用四大核心环节,寻找和发现有价值的疾病标志物已经成为目前研究的一个重要热点。传统的疾病标志物发展途径已渐渐满足不了当今研究的需要,而填补这一从实验室到临床的鸿沟要依靠转化医学模式的发展成果,即转化医学模式下的疾病标志物挖掘方式才是最适用的。本文介绍了国内外一些转化医学在疾病标志物发现与验证确认过程中方法策略的运用,如与标志物发现紧密相关的分子分析、成像技术等,转化医学分析方法中的生物分析验证和临床验证阶段,从而进一步指出与转化医学相结合的疾病标志物的挖掘能够更好地解决标志物实验室发现与临床应用之间过渡研究的难题。
- 银一臻徐伟文
- 关键词：疾病标志物
- 非抗体结合蛋白-抗体组合的GPC3双夹心化学发光法在临床的初步应用
- 2017年
- 目的:探讨非抗体结合蛋白-抗体双夹心化学发光免疫诊断试剂检测磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)在肝细胞癌(HCC)血清学的临床诊断价值和鉴别诊断价值.方法:应用本课题前期研制的非抗体结合蛋白-抗体GPC3夹心化学发光法诊断试剂检测HCC、肝内胆管癌、胃癌、肺癌、乳腺癌、正常人群等患者血清GPC3水平,同时用GPC3免疫组织化学(IHC)检测上述疾病患者的肿瘤组织,同时分析甲胎蛋白(AFP)和本实验方法对HCC的诊断效能,进一步分析GPC3表达于不同细胞结构部位与血清水平关系.结果:非抗体结合蛋白-抗体GPC3双夹心化学发光试剂盒检测HCC组GPC3血清水平明显高于其他组(>21倍,P值均小于0.01),与GPC3 IHC结果相一致.联合GPC3和AFP的曲线下面积(AUC)为0.922,明显高于单一标志物(GPC3和AFP的AUC分别为0.899和0.821,P值均小于0.05)的诊断价值.GPC3主要表达于胞膜和混合表达(胞膜和胞质),且所有胞膜和混合表达阳性患者血清样本的GPC3均高水平表达.结论:非抗体结合蛋白-抗体GPC3双夹心化学发光试剂盒具有良好的诊断特异性及准确性,有可能用于HCC的鉴别诊断,且对分析GPC3胞膜型HCC的诊断、疗效评价及预后提供更多诊断价值信息.
- 谢春梅张轩煜王从容徐伟文
- 关键词：肝细胞癌化学发光法
- 联合UV及SDS-PAGE监测并优化碳二亚胺偶联法制备多肽免疫原被引量：3
- 2013年
- 建立了一种多肽免疫抗原偶联的双监测法,获得一种操作简便、成功率高、适用范围广的碳二亚胺偶联法,并应用于多种肿瘤相关多肽标志物的免疫抗原制备。以合成多肽SP0104为标准品,牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,碳二亚胺(EDC)为偶联剂,对加样顺序、投料比、偶联时间等关键条件进行考察,采用UV和SDS-PAGE对反应产物进行联合监测,以偶联比和偶联率联合评价反应条件。加样顺序为多肽和载体蛋白先混合再加到碳二亚胺中,三者质量比为1∶1∶1,偶联时间为12 h,偶联比在4∶1～12∶1之间,偶联率在9%～20%之间,所得SP0104多抗效价达到1∶80 000,MALDI-TOF质谱分析证实该抗体准确捕获目标抗原。用优化的偶联方法制备多肽SPC09、SPC15、SPG01、SPG03、SPG04的免疫抗原,所得免疫血清效价均在1∶1万以上,最高可达1∶51.2万。所建碳二亚胺多肽偶联联合监测法简便实用,可提高多肽抗体制备的成功率。
- 侯利平傅海媛陶亚岚黄亚娟孙云波宋纯艳夏云飞杨保安韩治国肖汉族郑俊杰甄蓓魏开华
- 关键词：抗体
- 抗ANXA2单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 2014年
- 目的制备ANXA2特异性单克隆抗体（McAb），为研究ANXA2的生物学功能和检测该蛋白提供有力的抗体工具。方法用经IPTG诱导表达的基因重组PGEX-4T-1-ANXA2抗原免疫BALB／c小鼠．利用常规杂交瘤技术和间接ELISA法筛选抗ANXA2杂交瘤细胞，用ELISA法鉴定所得单抗腹水的效价及Western blot鉴定McAb特异性。单抗纯化和Eu3＋标记后，分别包被聚苯乙烯板及作为铕标单抗，利用时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）筛选出检测ANXA2蛋白的最佳配伍单抗。结果经细胞融合、筛选、克隆化，获得了16株可分泌高效价单抗的杂交瘤细胞，间接ELISA显示16株McAb与空载体PGEX．4T．1均未发生交叉反应．抗体特异性良好．16株抗体腹水效价为1：8000，1：256000，培养上清效价为1：256～1：512，纯化的腹水单抗经配对试验，2D6和9H9-Eu3＋配对最佳。结论获得16株能稳定分泌高特异性抗ANXA2的杂交瘤细胞．能用于后续研究。
- 尹江丽陈少琅万勇李明
- 关键词：单克隆抗体ELISA
- 血清多肽SPG01、SPG03、SPG04检测鼻咽癌放疗敏感性的初步研究
- 2014年
- 应用血清多肽SPG01、SPG03、SPG04的多抗（PcAb）酶联免疫吸附方法（ELISA）,用于鼻咽癌放疗敏感性的检测。以碳二亚胺偶联法制备多肽免疫抗原,免疫动物制备兔血清多抗,用Protein A亲和层析法纯化多抗,选择3种多抗的工作滴度,应用多抗ELISA法检测63份鼻咽癌血清样本。紫外（UV）和聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）联合监测表明多肽偶联到BSA（牛血清白蛋白）上;动物免疫获得3种兔血清多克隆抗体各40 mL;纯化后的多抗纯度在90%以上,效价均在1∶100 000以上;3种多抗的检测滴度分别为1∶20 000,1∶100 000,1∶10 000;间接ELISA最低检测限为0.03μg/mL,相对标准偏差（RSD）为5.6%。t检验分析3种多肽区分鼻咽癌放疗敏感组与不敏感组,均呈显著差异（P〈0.000 1）。ROC曲线表明,3种多肽检测鼻咽癌放疗敏感性的特异性在90%以上,灵敏度为73%~93%。3种多肽标志物均能显著区分鼻咽癌放疗敏感组与不敏感组,所应用的多抗ELISA方法检测鼻咽癌放疗敏感性特异性好,灵敏度高,可用于鼻咽癌个体化治疗的放疗敏感性辅助诊断。
- 侯利平宋纯艳孙云波陶亚岚傅海媛杨保安郑俊杰夏云飞甄蓓魏开华
- 关键词：鼻咽癌多抗放疗敏感性
- GPC3在肝癌诊治中的价值及存在问题被引量：3
- 2016年
- 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3,GPC3)是一种硫酸乙酰肝素糖蛋白,通过糖基化磷酯酰肌醇连接到细胞膜表面。在细胞生长、形态发生和肿瘤发展中有重要作用。近年来的研究表明,GPC3与肝细胞癌的发生、发展关系密切。本文就GPC3在肝癌中的作用及作为肝癌肿瘤标志物的研究进展作一综述。
- 谢春梅徐伟文
- 关键词：GPC3肝细胞癌肿瘤标志物靶向治疗
- 血清GPC3在中国人群和国外人群诊断原发性肝癌的价值：一项基于meta分析的比较研究被引量：2
- 2016年
- 目的通过meta分析探讨血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3,GPC3)在中国人群和国外人群诊断肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的价值,并分析产生差异的原因。方法检索中国知网、万方、中国生物医学、Pub Med、Ovid Lippincott Williams&Wilkins、Cochrane Library等数据库获取国内外关于GPC3肝癌诊断价值的相关文献。依据纳入及排除标准筛选文献并提取数据,对纳入文献进行质量评价、异质性分析并计算合并的诊断准确度指标。结果共有31篇文献入选本研究,以研究地所在国家划分为国内组19篇,国外组12篇,合并后的敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比和诊断比值比、综合受试者工作s ROC曲线的曲线下面积、Q指数及相应的95%CI如下:国内组:0.65(0.63-0.68),0.91(0.90-0.92),7.43(4.82-11.44),0.35(0.28-0.44),23.01(11.99-45.28),0.8723和0.8027;国外组:0.61(0.57-0.64),0.85(0.82-0.87),6.35(3.04-13.29),0.51(0.41-0.63),19.15(6.62-55.37),0.8344和0.7667。结论在中国人群中应用血清GPC3的检测对于HCC的诊断较之国外人群具有更高的价值。人种的差异很可能是导致国内外关于GPC3诊断效能不同的主要原因之一。
- 银一臻徐伟文
- 关键词：GPC3原发性肝癌
- 血管紧张素II2型受体——肿瘤细胞凋亡诱导因子
- 2012年
- 血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)是由8个氨基酸组成的线性小肽,是肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)的主要效应因子。血管紧张素Ⅱ1型(angiotensinⅡ1receptor,AT1R)和血管紧张素Ⅱ2型受体(angiotensinⅡ 2 receptor,AT2R)分别是AngⅡ作用的靶细胞的表面特异性G蛋白偶联1型和2型受体。AngⅡ通过上述2种受体参与调节血管舒缩、水盐平衡、细胞增殖、炎性反应、细胞凋亡等生物学功能。目前对AT1R的研究较多,在多种组织和器官中AT1R几乎介导了AngⅡ所有已知的生物学功能,但还不十分明确AT2R功能。随着对AngⅡ受体与肿瘤关系认识的深入,AT2R与肿瘤之间的联系也越来越受到重视。近年来AT2R诱导细胞凋亡的作用在肿瘤细胞中也有所发现,这提示AT2R可能作为肿瘤凋亡诱导因子来发挥作用,并有望成为肿瘤治疗的新靶点。
- 段世超费扬黄植杜红延李红卫李明
- 关键词：AT2R肿瘤凋亡
- 新型肝损伤血清标志物Pep5定量检测方法的建立及临床应用被引量：1
- 2013年
- 目的建立定量检测血清多肽Pep5的酶联免疫吸附方法(ELISA),用于判定肝损伤进程的研究。方法以待测血清样本稀释液包被酶联板,5%脱脂奶粉封闭,辣根过氧化物酶标记的抗Pep5单克隆抗体作为标记抗体,建立定量检测人血清多肽Pep5的ELISA,并用于临床检测690例肝损伤及健康血清样本。结果灵敏度为1.25ng/mL;线性范围(0～24ng/mL)内相关系数为0.998 7;与乙酰胆碱酯酶、层黏连蛋白、透明质酸、三型前胶原交叉反应率小于1.00%;添加回收率在99.09%～107.08%;批内、批间变异系数(CV)分别为5.62%～7.32%、6.21%～6.45%。与其他肝损伤指标乙酰胆碱酯酶试剂盒进行对比试验,表明两种检测方法有一定的相关性(r=0.68)。临床检测结果表明血清多肽Pep5水平随着肝损伤程度加重而升高,与正常血清差异有统计学意义(P<0.01)。结论多肽Pep5可用于肝损伤进程定量血清学检测,检测方法简便、可靠,为后续深入研究多肽Pep5的功能及相关诊断试剂盒的研制和开发提供了科学依据。
- 傅海媛侯利平周晓明黄亚娟宋纯艳孙云波汪洋杨保安肖汉族甄蓓魏开华王海滨
- 关键词：酶联免疫吸附法肝损伤血清学诊断
- HE4在早期卵巢癌诊断中的价值被引量：12
- 2013年
- 卵巢癌在女性妇科肿瘤中致死率占首位,但其发病隐匿导致早期诊断困难。随着国内外研究的不断深入,人附睾分泌蛋白4(human epididymis secretory protein 4,HE4)在诊断早期卵巢癌方面的价值也越来越受到普遍关注。本文就此方面做一综述。
- 张琼余娟平徐伟文
- 关键词：卵巢癌HE4肿瘤标志物
