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广东省科技计划工业攻关项目(20088030301082)
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肾癌特异性配体多肽ZT-2筛选及新标志物的研究
2009年
目的寻找肾癌早期诊断和靶向治疗的标志物。方法以肾癌细胞株A498为靶细胞,正常肾细胞株HK-2为吸附细胞,37℃下对噬菌体十二肽库进行4轮减性筛选。挑取单克隆采用ELISA方法初步鉴定噬菌体克隆亲和力;阳性克隆提取质粒,测序后合成多肽,鉴定多肽的亲和力及特异性。结果经ELISA初步鉴定,随机挑选20个单克隆中,2号多肽对A498细胞亲和力最高(AZT-2/AN月比值为3.15),命名为Phage-ZT-2。细胞免疫荧光试验证明,合成的相应多肽FITC-ZT-2对A498细胞具有特异性结合。利用荧光标记的ZT-2检测肾癌组织芯片,肾癌组织ZT-2的荧光吸光度(A)值为0.453±0.123,正常组织及非肾癌炎性组织为0.148±0.075,2组间比较差异有统计学意义(t=2.776,P〈0.01)。结论成功筛选出与肾癌细胞特异性结合的多肽ZT-2,为肾癌的早期诊断和靶向治疗提供了实验依据。
涂响安
臧林泉
赵亮
邓立文
王文卫
赵良运
梁辉
曾令友
庄锦涛
关键词:
肾肿瘤
药物筛选试验
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