国家自然科学基金(30270591)
- 作品数：7 被引量：5H指数：2
- 相关作者：钱桂生黄桂君吴国明陈杰冯起甲更多>>
- 相关机构：第三军医大学新桥医院第三军医大学西南医院解放军第303医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市卫生局医学科研项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 原发性肺癌肿瘤组织染色体变异比较基因组杂交分析被引量：1
- 2006年
- 目的:分析原发性肺癌肿瘤组织染色体异常变化,了解肺癌组织染色体畸变规律。方法:应用比较基因组杂交技术分析55例原发性肺癌患者肿瘤组织染色体。结果:原发性肺鳞癌常见染色体扩增区是2q、5p、11q、22q,常见缺失区是1p、4q、5q、6q、8p、9p、10q、11p、13q、18q、21q。肺腺癌常见扩增区是5p、8q、11q,常见缺失区是10p、19。腺鳞癌、肺泡细胞癌、小细胞癌等染色体变化各有不同。结论:原发性肺癌存在广泛的遗传物质不平衡现象,不同病理分型的染色体基因扩增和缺失可能是其发生、发展的基础。
- 熊玮钱桂生黄桂君
- 关键词：原发性肺癌比较基因组杂交染色体
- NHE-1反义基因对人耐药小细胞肺癌细胞增殖及凋亡的影响
- 2007年
- 目的探讨NHE-1反义基因表达存肿瘤细胞内pH(pHi)调节及凋亡调控中的作用。方法以NHE-基因的反义基因转染人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞,采用荧光标记法研究反义基因对肺癌细胞的酸化效应,使用细胞计数的方法进行细胞生长检测,采用免疫组织化学方法研究细胞凋亡基因Caspase3的表达,使片流式细胞仪双染法研究NHE-1反义基因对细胞凋亡的影响,采用透射电镜的方法检测NHE-1反义基因转染的肺癌细胞是否存在细胞凋亡。结果细胞酸化效应显示,NHE-1反义基闪转染的人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞可使pHi下降至6.86±0.01,与空载体转染的人耐药小细胞肺癌细胞H446/CDDP(7.25±0.02)相比明显降低(P<0.01)。反义基因转染的人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞在48 h后生长明显受到抑制。免疫组织化学方法显示转染NHE-1反义基因的人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞凋亡基冈Caspase3有表达,而空载体转染的人耐药小细胞肺癌细胞H446/CDDP Caspase3没有表达。流式细胞仪双染法研究显示NH-1反义基因转染组比空载体组的人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。透射电镜发现NHE-1反义基因转染的人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞存在细胞凋亡,细胞脱落大量小块胞质,细胞体积明显缩小。结论细胞酸化能使人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞生长受到抑制,凋亡基因表达增强,产生细胞凋亡。人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞NHE-1基因表达能通过阻止其胞内酸化,对维持其抗凋亡生长性质具有重要作用。
- 李树钧钱桂生王关嵩黄桂君吴国明冯起甲戢福云
- 关键词：细胞内肺癌NHE-1
- 肺腺癌多药耐药细胞株特异表达的新基因cDNA片段在肺癌组织中表达的研究
- 2004年
- 目的 检测人肺腺癌多药耐药细胞株特异表达的新基因cDNA片段在多种肺癌组织及其相应癌旁正常组织中的表达情况。方法 分别运用原位杂交技术和Northernblot方法检测该基因cDNA片段在肺癌组织中的表达及定位情况。结果 组织原位杂交和Northernblot的检测结果均显示 ,在 12例肺腺癌组织中有 6例表达阳性 (5 0 % ) ,在其他肺癌组织及其癌旁正常组织中无表达 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5或P <0 0 1)。图像分析显示 ,该基因在肺腺癌组织的相对表达量显著高于其癌旁正常组织 (P <0 0 5 )。结论 新基因片段在部分肺腺癌组织有表达 ,可能与临床上部分肺腺癌化疗效果不佳及MDR的产生有关。
- 李昆霖吴国明黄桂君钱桂生徐智陈杰
- 关键词：基因MDR
- 一条肺癌多药耐药相关基因的功能鉴定及染色体定位
- 2004年
- 目的 进一步分析从肺癌多药耐药细胞株 (SPC A 1/CDDP)克隆出的差异表达基因染色体的定位 ,并鉴定其耐药相关功能。方法 登录美国国家生物技术信息中心网 (www ncbi nlm nih gov) ,根据克隆的目的基因序列数据 ,查询人类基因库 ,分析确定该基因在人类染色体上的位置。以DNA重组技术构建该目的基因的反义表达载体 ,电穿孔法将其转染多药耐药细胞株SPC A 1/CDDP ,采用半定量RT PCR研究该基因表达受抑情况 ,并以MTT法分析转染细胞对几种化疗药物的敏感性改变。结果 电子信息学确定该目的基因定位在人类染色体的 19q13 3～19q13 4位点上。成功构建该基因的反义表达载体 ,转染反义表达载体的SPC A 1/CDDP细胞的目的基因mRNA含量明显减少 ,即基因表达受抑。MTT药敏测试发现转染了反义表达载体的SPC A 1/CDDP细胞对顺铂、阿霉素、5 氟尿嘧啶、长春新碱、足叶乙苷和丝裂霉素 6种化疗药物的耐药指数分别是 3 87、3 2 8、6 71、2 6 5、2 11、5 0 2 ;对前五种化疗药物的耐药指数与对照细胞相比分别下降了 2～3倍。表明该基因与肿瘤细胞的化疗敏感性密切相关。结论 该差异表达基因是一条肺癌耐药相关新基因 ,其在人类染色体的位置为 19q13 3～ 19q13 4。
- 黄桂君钱桂生陆卫忠余时沧李玉英李树均陈杰
- 关键词：肺肿瘤基因MDR反义技术染色体
- 一条新肺腺癌多药耐药细胞cDNA片段在胃癌中表达的研究被引量：2
- 2003年
- 目的 我们在前期工作中通过抑制消减杂交技术 (Suppressionsubtractivehybridization ,SSH)在肺腺癌细胞中发现了 1条新的耐药相关基因片段。本研究主要探讨该片段在胃癌及癌旁正常组织中的表达情况。方法 利用随机引物法将新片段用地高辛标记为探针 ,通过组织原位杂交技术 (Insituhybridizationhistochemistry ,ISHH)检测其在胃癌及癌旁正常组织中的表达情况。结果 该片段在大多数 ( 12 16例 )胃腺癌组织中有表达 ,在癌旁正常组织中没有表达 ,二者之间相差非常显著 (P <0 .0 1) ,而印戒细胞癌组织中无该片段表达 ,与腺癌相比较相差非常显著 (P <0 .0 1)。结论 在大多数被检测的胃腺癌组织中有该片段的表达 ;该片段可能是一些肿瘤组织本身所具有的 。
- 李昆霖吴国明黄桂君钱桂生陈杰
- 关键词：胃癌肺腺癌多药耐药抑制消减杂交技术
- 一条新肺腺癌多药耐药相关基因cDNA片段在肺癌组织中表达的研究
- 2003年
- 目的 检测所获得的一条新肺腺癌多药耐药相关基因 c DNA片段在多种肺癌组织及其相应癌旁正常组织中的表达情况。方法 (1)用地高辛和32 P分别将回收的目的基因片段标记为探针 ;(2 )运用原位杂交技术和 Northernblot方法分别确定这条 c DNA片段在细胞中的定位及表达情况。结果 (1)组织原位杂交结果显示 :在检测的 12例肺腺癌标本中 10例表达阳性 ,阳性率 83.3% (5 1.6 %～ 97.9% ) ,癌旁正常组织中无表达 ,在其他检测的肺癌组织及其癌旁正常组织中无表达。 (2 ) Northern blot检测结果显示 :在检测的 12例肺腺癌标本中 8例表达阳性 ,阳性率 6 6 .6 7% (34.9%～ 90 .1% ) ,癌旁正常组织中无表达 ,在其他检测的肺癌组织及其癌旁正常组织中无表达。结论 目的基因片段在部分肺腺癌组织中有表达 ,这可能与部分肺腺癌的化疗效果较差有关 。
- 吴国明李昆林田柳蒙伟宗黄桂君钱桂生
- 关键词：多药耐药基因NORTHERNBLOT
- 一种肺癌新耐药基因的反义基因抑制Bcl-2基因在人耐药小细胞肺癌细胞表达的研究被引量：2
- 2008年
- 目的通过构建一种肺癌新耐药相关基因的反义基因,抑制该基因在人耐药小细胞肺癌H466/CDDP细胞中的表达,进一步研究新耐药相关基因的功能和调控。方法构建该新耐药相关基因的反义基因逆转录病毒载体,通过RT-PCR检验转染新耐药相关基因的反义基因或空载体的人耐药小细胞肺癌H466/CDDP细胞中该基因mRNA的表达,使用MTT方法检测人耐药小细胞肺癌H466/CDDP细胞对化疗药物的敏感性。采用免疫组织化学方法研究人耐药小细胞肺癌抗凋亡基因Bcl-2的表达。结果成功构建新耐药相关基因的反义基因逆转录病毒载体。药物敏感性检测显示,与空载体组相比,转染新耐药相关基因反义基因的耐药小细胞肺癌细胞H446/CDDP对部分化疗药物的敏感性增强,差异显著(P<0.01)。免疫组织化学方法显示转染新耐药相关基因反义基因的耐药小细胞肺癌细胞H446/CDDP抗凋亡基因Bcl-2的表达,与空载体组相比明显减弱(P<0.01)。结论新耐药相关基因是与CDDP致人耐药小细胞肺癌H466/CDDP细胞耐药密切相关的一条新基因。该新耐药相关基因的反义基因能够抑制抗凋亡基因Bcl-2的表达,可能在肺癌MDR发生中的起着重要作用。
- 李树钧钱桂生王关嵩戢福云周向东张芳冯起甲
- 关键词：肺癌BCL-2基因
