国家杰出青年科学基金(30125040)
- 作品数：65 被引量：391H指数：13
- 相关作者：黄跃生杨宗城张家平党永明李晓东更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院中南大学第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划全军“十五”指令性课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 烧伤休克延迟快速复苏补液公式的临床研究被引量：15
- 2003年
- 目的 探讨烧伤休克延迟快速复苏治疗方案。方法 伤后 4～ 8h后入院的大面积烧伤病人 2 0例 ,分为血浆复苏组和4%琥珀酰明胶复苏组 ,在血流动力学监护下快速补液。监测血流动力学、血液流变学、组织氧合指标和主要脏器功能及损伤指标。结果 快速补液后 2h内输入量加院外补液量占第 1个 2 4h公式计算量的百分比为 48 3 4%,第 1个 2 4h实际输入量较公式计算量多3 1 42 %;快速补液后 ,各观测指标均获改善。结论 根据本研究结果 ,提出延迟快速复苏补液公式和方法如下 :⑴第一个 2 4h预计补液量 (m1) =TBSA( %)×体重 (kg)× 2 6+水分 2 0 0 0mL ,胶体与电解质之比为 1∶1。在血流动力学严密监护下 ,复苏的前 2h将第一个 2 4h液体总量的 1/2快速补入 ;⑵第二个 2 4h预计补液量 (m1) =TBSA ( %)×体重 (kg)× 1+水分 2 0 0 0mL ,胶体与电解质之比为 1∶1。
- 黄跃生阎柏刚杨宗城
- 关键词：烧伤休克补液公式血液流变学补液治疗
- c-jun反义基因转染对缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞保护作用的分子机制研究被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨c -jun反义基因转染对缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞保护作用的分子机制。方法 烧伤血清采自3 0 %TBSAⅢ度烫伤Wistar大鼠 ;采用含 1%O2 的混和气体作为缺氧模型 ;采用基因重组技术构建c -jun反义基因重组体 ;由Lipo fectaminekit介导心肌细胞转染 ;缺氧复合烧伤血清处理后 12、2 4和 48h不同时相点采用Westernblot检测c -jun蛋白 ,PKCα和JNK的表达变化。结果 加入烧伤血清并造成缺氧的非转染心肌细胞 (非转染组 ) ,c -jun蛋白 ,PKCα和JNK均显著表达 ,2 4h达最高峰 ;转染c -jun反义基因重组体 (转染组 )后 ,c -jun蛋白 ,PKCα和JNK表达均明显下降。结论 c
- 胡安根黄跃生
- 关键词：PKCΑJNK基因转染PCDNA3.1(+)心肌细胞保护作用
- 烧伤早期心肌组织几种炎症相关基因表达变化的实验研究被引量：18
- 2003年
- 目的 :观察烧伤后心肌组织几种炎症相关基因表达变化 ,探讨其与心肌损害的关系。方法 :采用大鼠4 0 %体表面积 度烫伤模型 ,于伤后 0 h(正常组 )、1h、3h、6 h、12 h、2 4 h用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测心肌组织肿瘤坏死因子 α(TNFα)、白介素 1β(IL 1β)、诱导型一氧化氮合酶 (i NOS)及胞浆型磷脂酶 A2 (c PL A2 ) m RNA水平 ,四道生理记录仪监测左室收缩压 (L VSP)、左室舒张末压 (L VEDP)和左室压力最大上升 /下降速率 (± dp/dtmax)变化。结果 :烫伤后 1h TNFα和 c PL A2 m RNA表达显著上调 (P均 <0 .0 1) ,此后一直维持高表达状态 ;IL 1β m RNA于伤后 3h表达明显升高 (P<0 .0 1) ,伤后 12 h降至正常水平 ;i NOS m RNA水平除伤后 1h稍上调外 ,其余时间点反而下降。左室收缩功能 (L VSP、+dp/dtmax)和舒张功能 (L VEDP、 dp/dtmax)于伤后 3h显著下降 (P均 <0 .0 1) ,12 h达谷底。左心功能变化与 TNFα、c PL A2表达呈负相关 (P均 <0 .0 5 )。结论 :炎症相关基因 TNFα、c PL A2 及 IL 1β参与了烧伤后心肌局部失控性炎症反应 ,其上调表达可能是烧伤后心肌损害的重要原因之一。
- 张家平黄跃生杨宗城
- 关键词：烧伤心肌损害肿瘤坏死因子磷脂酶A
- 缺氧诱导因子1α对缺氧条件下大鼠心肌细胞糖酵解的影响被引量：12
- 2005年
- 目的观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对缺氧状态下大鼠心肌细胞糖酵解的影响。方法常规分离、培养大鼠心肌细胞,分为单纯缺氧组:使用无糖培养基在低氧混合气体(体积分数94%N2、5%CO2、1%O2)中培养;HIF-1α抑制组:先利用RNA干扰技术构建HIF-1α蛋白低表达的细胞模型,再作上述缺氧培养。两组细胞均设缺氧前(常规培养)及缺氧1、3、6、12、24h6个时相点,采用生物化学方法检测细胞中糖酵解关键酶己糖激酶(HK)、磷酸果糖激酶(PFK)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性以及培养上清液中乳酸(LA)的含量。结果(1)HK、PFK活性:与缺氧前比较,两组心肌细胞两酶活性均呈先升高后下降的变化趋势。单纯缺氧组两酶活性峰值分别为(159±13)、(298±44)U/g.HIF-1α抑制组两酶活性在缺氧1、3、6h时均明显低于单纯缺氧组(P<0.05或0.01),其峰值分别为(133±55)、(188±55)U/g.(2)LDH活性、LA含量:与缺氧前(92±12)U/g比较,单纯缺氧组细胞LDH活性缺氧后显著升高,6h时达高峰(2568±125)U/g(P<0.01),随后逐渐下降;各时相点培养上清液中LA含量也成倍增加。HIF-1α抑制组细胞的LDH活性于缺氧3h时达峰值(2125±126)U/g,明显高于缺氧前(P<0.01);培养上清液中LA含量亦较缺氧前增高(P<0.01),但增幅较小。结论缺氧条件下大鼠心肌细胞中HIF-1α高表达是细胞糖酵解持续增强的直接原因,此为心肌细胞应对缺氧环境的重要内源性保护机制。
- 党永明黄跃生周军利张家平颜洪张铭
- 关键词：缺氧心肌糖酵解RNA干扰缺氧诱导因子1Α
- 烧伤患者血清对单核细胞核因子κB核移位的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 观察烧伤患者血清 (以下称烧伤血清 )对单核细胞核因子κB(NF κB)异二聚体p5 0、p6 5核移位及核抑制因子κBα(IκBα)降解的影响 ,进一步探讨烧伤血清对单核细胞活化的作用。 方法 收集体外培养的人外周血单核细胞 (PBMC),分别用正常人血清、烧伤血清、烧伤血清 +吡咯烷二硫代氨基甲酸盐 (PDTC)刺激PBMC(依次分为对照组、烧伤血清组、PDTC组 ) ,应用激光共聚焦显微镜观察血清刺激 30、6 0、12 0、4 80min后PBMC的p5 0、p6 5核移位 ;采用Western印迹法检测刺激 30、6 0、90、12 0min时PBMC的IκBα蛋白降解情况。 结果 与对照组比较 ,刺激 30min后烧伤血清组PBMC中p5 0、p6 5即发生核移位 ,30～ 6 0min达高峰 ,12 0min后核内聚集减少 ,回复至刺激前状态。刺激 30min后烧伤血清组PBMCIκBα发生降解 ,刺激 6 0min后含量几乎为零 ,与对照组比较差异有非常显著性意义 (P <0.0 1),12 0min后表达水平逐渐恢复。PDTC组PBMCIκBα降解 [刺激 6 0min后含量为 (11 5 7± 1.98)× 10 4积分灰度值 ]及p5 0、p6 5核移位程度比烧伤血清组轻 (P <0 0 1)。 结论 烧伤血清可导致PBMCIκBα降解和 p5 0、p6 5核移位 ,进而活化NF κB,诱导PBMC分泌细胞因子。
- 李志清黄跃生杨宗城王甲汉
- 关键词：烧伤血清单核细胞
- 烧伤后早期心肌线粒体DNA大片段缺失的实验研究被引量：4
- 2004年
- 目的 观察严重烧伤后早期大鼠心肌的过氧化损伤对其线粒体DNA(mtDNA)的影响。方法 将 36只SD大鼠随机分为假烫组、30 %TBSAⅢ度烫伤 1、3、6、12、2 4h组 ,半定量PCR法测定大鼠心肌mtDNA缺失情况 ,取各组大鼠心肌组织匀浆后测定超氧化物歧化酶 (SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。 结果 假烫组大鼠心肌mtDNA未见缺失 ;伤后 1、3、2 4h组大鼠心肌mtDNA出现4 834bp大片段的部分或完全缺失 (P<0.0 5或 0 .0 1)。与假烫组比较 ,伤后 1h组大鼠心肌组织中SOD活性明显下降 ,而MDA含量明显升高 (P <0.0 5 );伤后 6h组SOD活性达最低值 (76 .90± 8.30 )U/mg、MDA含量达最高值 (3.17± 0 .80 )nmol/mg( P <0.0 1)。 结论 烧伤后早期大鼠心肌组织受到严重的过氧化损伤 。
- 张东霞黄跃生赵颂涛李晓东
- 关键词：烧伤心肌线粒体DNA丙二醛
- 线粒体缺氧损害机制研究进展被引量：6
- 2006年
- 邝勇黄跃生
- 关键词：烧伤线粒体细胞低氧
- 大鼠反义p38αMAPK腺病毒载体的构建被引量：2
- 2004年
- 目的 构建大鼠反义p3 8αMAPK腺病毒载体。方法 用RT PCR法扩增大鼠p3 8αcDNA片段 ,连接到T载体进行测序 ,经测序正确后与pAdtrack cmvvector重组 ,最后转入AdEasy(tm)XLAdenoviralVectorSystem系统中 ,得到p3 8α基因腺病毒载体。结果 成功构建大鼠p3 8α腺病毒载体。结论 为在基因水平研究p3 8α的作用提供了良好工具。
- 郑军黄跃生黄晓元范鹏举贺伟峰张小容蒋建新粟永萍
- 关键词：腺病毒载体反义Α基因RT-PCR法T载体CDNA片段
- 双链小片段干扰RNA抑制缺氧条件下乳鼠心肌细胞缺氧诱导因子1α表达被引量：2
- 2004年
- 目的 构建含缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)小片段干扰RNA(siRNA)靶序列的U6启动子表达框结构 ,观察其对缺氧条件下乳鼠心肌细胞HIF 1α表达的影响。 方法 分离培养乳鼠心肌细胞 ,分为常规培养液对照组、RNA干扰 (RNAi)组 (转染无效干扰序列Ⅳ )、RNAi抑制组 (转染有效干扰序列并按下游引物不同分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组 )。设计、合成 3对 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ )含HIF 1α编码基因片段(正、反义 )和 1对 (Ⅳ )随机序列 (正、反义 )的PCR下游引物。PCR法构建U6启动子表达框及相应正、反序列表达框 ,同时转染心肌细胞。每组每时相点 5皿细胞。于缺氧 1h后 ,用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定其蛋白水平表达 ,免疫组织化学法检验干扰效果。缺氧 6h后采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法检测HIF 1αmRNA的表达。 结果 筛选出的最佳抑制片段为Ⅱ组序列。缺氧 1h,对照组、RNAi组心肌细胞HIF 1α蛋白水平显著增高 ,Ⅰ、Ⅱ、ⅢRNAi抑制组HIF 1α蛋白水平较对照组明显降低 ,其中Ⅱ组降低最为显著 (P <0.0 1);缺氧 6h,RNAi组心肌细胞HIF 1αmRNA水平较常氧条件下明显增高 (P <0.0 1);RNAi抑制Ⅱ组未见明显增高 (P >0.0 5 )。 结论 构建的HIF 1αⅡ组表达框能有效地抑制缺氧乳鼠心肌细胞HIF
- 党永明黄跃生杨宗城张东霞李晓东张铭陈丽峰
- 关键词：细胞低氧心肌细胞蛋白免疫印迹法
- c-jun反义基因转染与缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞凋亡关系的研究
- 2003年
- 目的 探讨c jun反义基因转染与缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞凋亡的关系。方法 烧伤血清采自 3 0 %TBSAⅢ度烫伤Wistar大鼠 ;采用含 1%O2 的混和气体造成缺氧模型 ;采用基因重组技术构建c jun反义基因重组体 ;用Li pofectaminekit介导心肌细胞转染 ;用核苷酸末端转移酶介导的dUTP末端标记法 (TUNEL)检测心肌细胞的凋亡情况 ,同时对凋亡心肌细胞进行计数并作统计学分析。结果 加入烧伤血清并造成缺氧 (下文称非转染组 )后 12h ,2 4h和 48h ,凋亡心肌细胞数 (每高倍视野均数 )分别为 ( 7 1± 0 842 ) ,( 2 8 4± 1 63 5 )和 ( 13 2± 1 5 2 5 ) ;转染c jun反义基因 (下文称转染组 )后 12h ,2 4h和 48h ,凋亡心肌细胞数分别为 ( 4 1± 0 716) ,( 12 3± 1 45 5 )和 ( 8 5± 1 3 41) ,两组比较差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 c jun反义基因转染可以减轻缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞凋亡性损伤。
- 胡安根黄跃生
- 关键词：反义基因转染C-JUN凋亡
