四川省应用基础研究计划项目(02NY029-079)
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 相关作者：龙章富刘世贵张海英徐敏刘海华更多>>
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- 发文基金：四川省应用基础研究计划项目教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 胞内表达猪生长激素基因的重组酵母菌构建与鉴定被引量：3
- 2007年
- 将猪生长激素(pGH)cDNA定向插入毕赤酵母胞内表达载体pPIC 3.5k质粒,重组构建了pPIC 3.5k-pGH/GS115酵母表达系统,其表达产物的SDS-PAGE和Western blot结果表明,pGH蛋白在胞内获得正确表达,表达量达378 mg/L.
- 付若彬刘海华张海英张莉刘世贵龙章富
- 关键词：猪生长激素基因毕赤酵母真核表达
- 牛蛙生长激素基因cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2007年
- 以成体牛蛙脑垂体总RNA为模板进行RT-PCR,克隆到牛蛙生长激素基因(bullfroggrowth hormone,bfGH)cDNA编码序列,其长度为651 bp,编码的前体GH蛋白序列经BLAST分析,与已报道的牛蛙GH蛋白质序列AAB24792、AAB19428、CAA31038的同源性分别为98.1%、96.3%、95.3%,其在Genbank的登录号为AY251538;将bfGH亚克隆到原核表达载体pGEX1-λt构建成牛蛙GH原核表达载体VGBfGH,转化BL21(DE3)E.coli得到重组菌,0.01 mol/L的IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE分析,bfGH表达率达到29.3%,融合蛋白的分子量为51 kDa.回收BfGH融合蛋白注射免疫家兔获得兔抗血清,以其为一抗,经ELISA-RA检测分析表明回收的重组蛋白能与牛蛙肝膜受体蛋白结合.
- 张海英喻麟刘海华刘崑刘世贵龙章富
- 关键词：牛蛙生长激素克隆原核表达
- 猪生长激素基因与白介素-6基因在小鼠体内的表达效应分析被引量：1
- 2007年
- 比较研究了阳离子脂质体包裹VpGH、VpGH联合VpIL-6以及脂质体(对照)腹腔注射昆明小鼠的增长效应与免疫应答.结果表明,VpGH注射小鼠、VpGH联合VpIL-6注射小鼠在体重增长幅度和血清GH水平上均较对照组显著增高,在注射后第4周效果最明显;VpGH联合VpIL-6注射小鼠较仅注射VpGH小鼠在增重幅度和血清GH水平显著增高的趋势明显.但在白细胞数量、红细胞数量上较对照组除第1,2两周外,其余时间段无显著差异.在IgG表达上各组均无显著差异.
- 谭俊杰杨涛徐敏刘润叶刘世贵龙章富
- 关键词：GHIL-6基因表达小鼠
- 草鱼生长激素基因在COS7细胞中转染表达的研究被引量：1
- 2006年
- 应用RT-PCR技术克隆草鱼生长激素(gcGH)的cDNA,将此cDNA定向插入真核表达载体VR1020中,构建成重组真核表达质粒VgcGH.利用脂质体法使质粒VgcGH转染哺乳动物细胞COS7,对转染后的COS7细胞进行RT-PCR、ELISA和免疫荧光检测,分别在转录和翻译水平证实gcGH基因在COS7细胞中得到了持续和正确的转染表达.
- 高庆张莉王立洪杨涛刘世贵龙章富
- 关键词：真核表达质粒转染COS7细胞
- 牛蛙生长激素基因在COS_7细胞中的转染表达
- 2007年
- 应用RT-PCR技术克隆牛蛙生长激素(BfGH)的cDNA,T-A克隆法构建反向插入的pMD18-T/BfGH重组质粒,回收BamHⅠ酶切的BfGH cDNA片段,并与去磷酸化处理的真核表达载体VR1020/BamHⅠ,酶切鉴定方法筛选BfGH正向插入的重组真核表达质粒VBfGH.脂质体法介导质粒VBfGH转染哺乳动物细胞COS7,对转染后的COS7细胞进行RT-PCR、ELISA和免疫荧光检测,分别在转录和翻译水平证实BfGH基因在COS7细胞中得到了正确的转染表达.
- 尉研喻麟崔佳杨土凤刘燕飞刘世贵龙章富
- 关键词：真核表达质粒转染COS7细胞
- 草鱼生长激素基因在毕赤酵母中的表达被引量：6
- 2006年
- 将草鱼生长激素基因(cGH)的cDNA亚克隆到酵母表达载体pPIC9K中,经电击转化导入毕赤巴斯德酵母GS115菌株,获得转化子。菌落PCR技术筛选证实cGH已经整合到了酵母染色体上。对重组酵母进行诱导表达,SDS-PAGE和Western印迹分析,结果表明cGH在毕赤巴斯德酵母GS115菌株中获得了高效表达。
- 孟亚鹏徐敏代焕梅丁秀琼张海英殷雪刘世贵龙章富
- 关键词：草鱼生长激素基因毕赤酵母
