国家科技重大专项(2002AA2Z3343)
- 作品数：14 被引量：95H指数：7
- 相关作者：汪世平徐绍锐王明伟余俊龙戴橄更多>>
- 相关机构：中南大学中国科学院国家新药筛选中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划中国科学院知识创新工程重要方向项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 环糊精及其衍生物的药学应用进展被引量：25
- 2005年
- 环糊精及其衍生物通过非共价结合的包合作用或与药物形成共轭化合物,在提高溶解效率、改善药剂性能和方便药物传输等方面得到了广泛的应用。近年来,环糊精及其衍生物还被用作治疗性基因载体和某些蛋白质生物大分子的新型药物制剂材料,从而开辟了一个崭新的前沿研究领域。
- 代国飞王明伟
- 关键词：环糊精包合物共轭化合物
- 日本血吸虫合抱相关未知功能基因SJCHGC00821的克隆及生物信息学分析被引量：4
- 2006年
- 目的克隆与日本血吸虫合抱相关但未知功能的新基因SJCHGC00821,构建其真核表达载体,并应用生物信息学初步探讨其功能。方法应用PCR技术从日本血吸虫成虫cDNA文库中扩增SJCHGC00821基因全长ORF,将其亚克隆到真核表达载体pcDNA3中,通过PCR、限制性酶切分析及测序进行鉴定。应用生物信息学初步分析其细胞定位、蛋白序列、结构域及功能。结果获得日本血吸虫合抱相关未知基因SJCHGC00821的克隆,序列分析结果提示该cDNA序列含有一个597bp的完整阅读框序列,编码198个氨基酸,其编码蛋白的理论分子量为22.76kDa,等电点为4.84。二级结构分析预测提示其具有一定抗原性。结论成功地克隆了日本血吸虫SJCHGC00821基因全长ORF,构建了其pcDNA3真核表达载体,为进一步研究其结构与功能创造了条件。
- 戴橄汪世平余俊龙姜孝新曾少华徐绍锐李文凯
- 关键词：日本血吸虫基因克隆生物信息学
- 外周阿片Mrg受体:镇痛药物作用的新靶点被引量：2
- 2005年
- Mrg受体(Mas-relatedgenereceptor)是一类新发现的G蛋白偶联受体,包括多个亚型,主要分布在与痛觉产生和传导有密切关系的背根神经节和三叉神经节区域,属于外周阿片受体家族。研究表明,Mrg受体参与痛觉的感受和调节等生理功能,有望成为镇痛药物作用的新靶点,受到国际医药界的高度关注。文章概述了Mrg受体的基因定位、组织分布、配体分类和信号通路等方面的研究进展。
- 严庞科谢欣王明伟
- 关键词：伤害性感受镇痛药物信号转导
- 我国六棱菊属植物化学成分研究进展被引量：17
- 2006年
- 六棱菊属植物在民间广泛用于清热解毒,我国有3种,分别为六棱菊Laggera alata、假六棱菊L.inter-media和翼齿六棱菊L.pterodonta。现代临床医学研究显示翼齿六棱菊(臭灵丹)具有良好的抗炎作用。10余年来,对本属化学成分的研究已鉴定100余种化合物。为了更好地开发和利用本属植物,作者就这一领域的研究进展进行了综述。
- 武艳琪李娜王明伟
- 关键词：菊科化学成分
- 日本血吸虫SJCWL06基因编码蛋白结构与功能的生物信息分析被引量：7
- 2006年
- 目的分析和预测日本血吸虫SJCWL06基因编码蛋白的结构与功能。方法利用国际互联网中生物信息网站如美国国家生物技术信息中心(NCBI)等的相关信息,分析与预测该编码蛋白一、二、三级结构与功能。结果该基因长861bp,有一个完整的327bp的开放读框,编码109个氨基酸,其编码蛋白有一个信号肽,多个磷酸化位点和一个ABC-三磷酸腺苷酶的结构域,与蜜蜂(Apis mel-lifera)SMC3编码的mRNA基因序列同源性最高(84%)。结论SJCWL06基因编码蛋白具有进一步研究的潜在价值。
- 曾少华汪世平张加祥吕志跃周松华刘雪琴徐绍锐姜孝新彭先楚李文凯
- 关键词：日本血吸虫生物信息学基因
- 2-羟丙基-β-环糊精包合抗幽门螺杆菌新化学实体NE-2001的实验研究
- 2006年
- 目的:应用2-羟丙基-β-环糊精(2-HP-β-CD)包合抗幽门螺杆菌新化学实体NE-2001,系统观察包合作用和计算热力学参数,确定达到最佳包合效果的制备方法。方法:通过正交实验选择NE-2001与2-HP-β-CD之间包合作用的最佳条件,采用冷冻干燥技术制备NE-2001-2-HP-β-CD包合物,经X-射线衍射(XRD)和差示扫描量热法(DSC)对后者进行鉴定,并与其他3种环糊精的包合效应进行比较。结果:包合的最优条件是主客分子物质的量比为5:1．温度为50℃,时间为45 min,此时达到本实验的最大增溶特性及结合常数。运用X-射线衍射和差示扫描量热法分析确证冻干粉末已经形成包合物。结论:经2-HP-β-CD包合后,NE-2001的溶解度获得显著提高。
- 代国飞赵伟强陈洁谢建树王明伟
- 关键词：2-羟丙基-Β-环糊精X-射线衍射差示扫描量热法
- 日本血吸虫中国株次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶真核重组质粒的构建及其动物免疫保护性研究被引量：4
- 2007年
- 目的克隆日本血吸虫次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(SjHGPRT)全长编码基因,研究其DNA疫苗诱导小鼠的免疫保护作用。方法将全长SjHGPRT基因克隆到真核表达载体pcD- NA3上,构建真核表达质粒pcDNA3-SjHGPRT,用经双酶切、PCR和测序鉴定正确的真核表达质粒免疫昆明小鼠3次,每次间隙2周,第3次免疫后第2周进行日本血吸虫尾蚴攻击感染,感染后42 d处死小鼠,收集成虫、肝脏和24 h粪便,计算减虫率和减卵率。结果成功构建真核表达质粒pcDNA3- SjHGPRT。动物免疫实验结果显示:pcDNA3-SjHGPRT疫苗组减虫率23.17%、肝减卵率41.64%、粪减卵率40.57%,每雌虫子宫内卵减卵率26.95%,与对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。每雌虫子宫内卵减卵率及肝、粪减卯率明显高于减虫率,表明pcDNA3-SjHGPRT疫苗可能主要在抗血吸虫卵胚发育或抗生殖方面起作用。结论日本血吸虫次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶DNA疫苗可诱导抗血吸虫卵胚发育或抗生殖作用,具有潜在的疫苗研究与开发价值。
- 余俊龙汪世平何卓戴橄徐绍锐刘雪琴
- 关键词：日本血吸虫DNA疫苗
- 游离脂肪酸受体的结构、分布及功能被引量：3
- 2005年
- 游离脂肪酸的生理功能及其与某些疾病的相关性长期以来受到人们的关注。由于特异性膜受体一直未被发现,关于其分子机制的认识无法深入。最近的研究表明,长链脂肪酸是孤儿型G蛋白偶联受体GPR40的配基,而短链脂肪酸则是孤儿型G蛋白偶联受体GPR41和GPR43的配基。体外实验显示,长链脂肪酸通过GPR40增强胰岛β细胞的分泌功能;短链脂肪酸经GPR41刺激脂肪细胞中瘦蛋白(leptin)的产生。GPR43在白细胞活化过程中发挥一定的作用。作为潜在的药物作用靶点,游离脂肪酸特异性受体为寻找治疗代谢性疾病的新手段指明了的方向。
- 张瑞谢欣王明伟
- 关键词：短链脂肪酸G蛋白偶联受体信号转导
- 日本血吸虫中国大陆株琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白的克隆与表达被引量：2
- 2006年
- 目的:克隆日本血吸虫琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白(SjSDISP)全长编码基因,并对所获基因在大肠杆菌中进行表达。方法:根据基因库中SjSDISP对应的EST(BU804141)以及日本血吸虫成虫cDNA文库载体λgt11多克隆位点邻近核苷酸序列设计引物,以日本血吸虫成虫cDNA文库为模板,采用锚式PCR对SjSDISP基因不完整的3′端和5′端进行扩增、测序,用电子软件拼接成全长cDNA,将其克隆到表达载体pGEX-4T-1上,经琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶消化、PCR和测序鉴定后,选择阳性克隆进行表达及Western印迹分析。结果:获得1071bp全长cDNA,其理论推导为编码278个氨基酸残基的蛋白质。SjSDISP基因在大肠杆菌BL21中获得良好表达。该融合表达产物相对分子质量约为56kD,且能被日本血吸虫成虫抗原免疫血清特异识别。结论:编码日本血吸虫琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白全长cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达获得成功。
- 余俊龙汪世平何卓戴橄姜孝新曾少华肖晓芹周松华李文凯徐绍锐吕志跃彭先楚
- 关键词：日本血吸虫基因克隆基因表达
- 日本血吸虫中国株次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶的克隆、表达及其免疫保护性研究(英文)被引量：15
- 2006年
- 根据基因库中日本血吸虫次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)EST(BU803192)以及日本血吸虫成虫cDNA文库载体λgt11多克隆位点邻近核苷酸序列设计引物,以日本血吸虫成虫cDNA文库为模板,采用锚式PCR对SjHGPRT基因不完整的3′端和5′端进行扩增、测序,用电子软件拼接,获得SjHGPRT全长cDNA(1270bp),经序列分析,推断该片段含有编码SjHGPRT基因的完整阅读框,其编码基因与曼氏血吸虫次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(SmHGPRT)全长编码基因碱基一致性为82%,其理论推导的氨基酸组成与曼氏血吸虫次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶的一致性约为83%.将其编码基因克隆到表达载体pQE30上,在大肠杆菌M15中获得准确、高效表达,表达产物分子质量约为28ku.用日本血吸虫成虫抗原免疫血清对表达产物进行蛋白质印迹检测,在预测位置上出现明显的识别条带.重组蛋白动物免疫保护性结果显示:在虫荷、每克肝卵、每克粪卵和雌子宫内卵数方面,疫苗组与对照组比较差异均具有显著性(P<0.05,P<0.01).结果表明,日本血吸虫次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(SjHGPRT)全长cDNA成功克隆并在大肠菌中得到表达,表达产物具有良好的抗原性和动物免疫保护效果,是一种潜在的具有部分免疫保护性的抗血吸虫病疫苗候选分子.
- 余俊龙汪世平何卓戴橄李文凯姜孝新曾少华肖小芹徐绍锐吕志跃彭先楚周松华刘雪琴
- 关键词：日本血吸虫基因克隆基因表达
