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国家自然科学基金(30871234)

作品数：7 被引量：11H指数：2
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文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 7篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 3篇CUEDC2
  • 2篇细胞
  • 2篇细胞系
  • 2篇活性
  • 1篇信号
  • 1篇信号通路
  • 1篇有丝分裂
  • 1篇原核
  • 1篇酸酶
  • 1篇体外
  • 1篇通路
  • 1篇同步化
  • 1篇突变体
  • 1篇转基因
  • 1篇转基因小鼠
  • 1篇转录
  • 1篇转录活性
  • 1篇稳定细胞系
  • 1篇细胞同步化
  • 1篇下调

机构

  • 7篇军事医学科学...

作者

  • 6篇于鸣
  • 6篇穆蕊
  • 6篇巩伟丽
  • 5篇李腾
  • 5篇高彦飞
  • 4篇张维娜
  • 4篇甄诚
  • 4篇李慧艳
  • 4篇陈亮
  • 3篇王芊艺
  • 3篇常艳
  • 2篇梁冰
  • 2篇韩秋影
  • 2篇徐金敬
  • 2篇周杰
  • 1篇柏兆方
  • 1篇周涛

传媒

  • 7篇科学技术与工...

年份

  • 7篇2011
共 7 条 记 录，以下是 1-7
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排序方式：
磷酸酶PPM1G与IKKi相互作用下调IRF的转录活性
2011年
为了研究磷酸酶PPM1G对IRF信号通路的影响,首先在真核细胞中成功表达了HA-PPM1G蛋白质。应用双荧光报告系统,研究了PPM1G对IRF信号通路的影响。结果显示,过表达PPM1G能够显著抑制IKKi激活的IRF转录活性。进一步免疫共沉淀的实验结果表明,PPM1G和IKKi在细胞内存在相互作用。
陈亮穆蕊甄诚高彦飞李腾周杰于鸣巩伟丽张维娜
关键词：IRF转录活性
Tet-on系统诱导乳腺特异表达CUEDC2转基因小鼠的制备
2011年
建立Tet-on系统诱导乳腺特异表达CUEDC2的转基因小鼠模型,构建转基因表达载体,经细胞诱导表达验证后,酶切得到含有CUEDC2的线性DNA片段,并采用显微注射的方法及后续筛选鉴定,得到CUEDC2转基因小鼠。进而通过与乳腺特异表达的MMTV-rtTA转基因小鼠交配,得到CUEDC2/rtTA双阳性转基因小鼠。利用2 mg/mL的多西环素(Doxycycline)诱导小鼠体内CUEDC2表达。通过Western Blot、免疫组化检测表达。结果表明经诱导CUEDC2/rtTA双阳性转基因小鼠的2个Founder的F1、F2代在转录水平和蛋白水平均成功表达CUEDC2,并具有乳腺特异性。表明Tet-on系统诱导乳腺特异表达CUEDC2的转基因小鼠制备成功。为后续CUEDC2的功能研究奠定了技术基础。
王芊艺柏兆方梁冰王玉博周涛
关键词：CUEDC2转基因小鼠
Tet-off诱导表达CUEDC2稳定细胞系的建立
2011年
CUEDC2(CUE domain containging protein 2)是近年来发现的一个功能尚未十分明确的蛋白质。实验室前期的研究表明,CUEDC2通过影响孕激素受体PR抑制乳腺癌细胞生长。此外,研究还发现CUEDC2通过招募PP1磷酸酶,促进IKK复合体的去磷酸化,抑制NF-kB信号通路的激活。为了深入研究CUEDC2的功能,构建了CUED2可诱导表达载体(p617-neo-T-CUEDC2-I-tTA4),并通过逆转录病毒系统获得tet-off可诱导表达CUEDC2的稳定细胞系。该诱导表达细胞株的建立为CUEDC2功能基因的研究提供了必要的手段。
徐金敬王玉博王芊艺周杰梁冰穆蕊于鸣巩伟丽张维娜
关键词：CUEDC2稳定细胞系
CUEDC2突变体的构建及在原核和昆虫表达系统中的表达被引量：1
2011年
为构建CUEDC2的突变体并在原核和昆虫表达系统中表达验证,根据人cuedc2序列设计引物,以其突变体质粒为模板PCR扩增目的片段,酶切后连接至pET28a原核表达载体以及pFastBac1-Flag-N和pFastBac-HTA昆虫表达系统的表达载体。转化至DH5α后提取质粒,经菌液PCR、测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3)及DH10Bac感受态细胞中。原核表达载体在E.coli中表达后用Ni-NTA亲和纯化,SDS-PAGE检测。昆虫表达载体提取杆粒,转染至昆虫细胞Sf9中表达。最后用western进行鉴定。结果成功构建了CUEDC2的突变体,并在原核和昆虫表达系统中表达。说明在原核和昆虫表达系统中,成功表达的CUEDC2突变体蛋白为CUEDC2的结构和功能研究奠定了基础。
王玉博高彦飞李腾常艳穆蕊徐金敬王芊艺巩伟丽于鸣李慧艳
关键词：CUEDC2昆虫突变体
HeLa/GFP—H2B细胞系的构建及对其有丝分裂进程的动态观察被引量：3
2011年
准确的染色体分离依赖于有丝分裂过程的精确调控,包括有丝分裂的时间,及纺锤体检查点的正确调控等。通过动态观察有丝分裂染色体的运动可对上述研究进行精确定量。结果显示,利用逆转录病毒系统成功构建了稳定融合表达绿色荧光蛋白GFP—H2B的HeLa细胞系,结合细胞同步化方法,建立了一套利用活细胞荧光共聚焦显微镜观察HeLa细胞有丝分裂的实验体系。
李腾高彦飞常艳王玉博穆蕊陈亮甄诚韩秋影于鸣巩伟丽张维娜李慧艳
关键词：有丝分裂细胞同步化
体外APC/C活性体系的建立及其影响因素的研究
2011年
为获得具有细胞周期后期促进复合物(APC/C)活性的细胞裂解液并建立APC/C体外活性检测体系,以其底物Cyc-lin B及Securin的降解为检测指标,分别从细胞阻滞于有丝分裂期的时间,UBCH10(APC/C的E2酶)的浓度以及裂解液浓度等几个方面研究了各种处理因素对APC/C活性的影响,并且用体外翻译底物验证了其活性及相关结论。此项工作为进一步探索APC/C相关分子事件奠定了基础。
高彦飞李腾常艳王玉博穆蕊陈亮甄诚韩秋影于鸣巩伟丽张维娜李慧艳
关键词：CYCLINSECURINUBCH10活性
高内涵筛选NF-κB信号通路的技术体系建立被引量：7
2011年
NF-κB是参与免疫调节、炎症反应、肿瘤发生等过程重要的转录因子,在TNFα、IL-1β、LPS等因子诱导下NF-κB发生核转位并激活其转录活性。尝试利用高内涵筛选(High Content Screening,HCS)和RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术建立NF-κB核转位高通量筛选体系,该体系的应用将有助于发现新的NF-κB信号通路调节因子,为免疫与肿瘤的机制研究提供线索。
穆蕊李腾高彦飞甄诚陈亮于鸣巩伟丽李慧艳
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