国家自然科学基金(30771141)
- 作品数:19 被引量:29H指数:4
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- Isl-1阳性咽间充质细胞分区及其在小鼠胚胎动脉囊分隔和重建中的作用
- 目的:研究弓动脉是如何从动脉囊发出并形成独立的左右弓动脉以及探讨Isl-1阳性咽间充质细胞分区及其在动脉囊分隔和重建中的作用。 方法: 我们应用免疫组织化学,免疫荧光,及三维重建的方法,通过小鼠胚胎心脏连续切片系统研...
- 王晶晶
- 文献传递
- 超级化激活环核苷酸门控阳离子通道4、连接蛋白43和平足蛋白在小鼠胚胎心的表达与心传导系的发生被引量:4
- 2012年
- 目的探讨小鼠胚胎心传导系的发生机制。方法用抗心肌肌球蛋白重链(MHC)、抗超级化激活环核苷酸门控阳离子通道4(HCN4)、抗缝隙连接蛋白43(CX43)和抗平足蛋白(podoplanin)抗体,对40只胚龄9~16d小鼠胚胎心进行连续石蜡切片并免疫组织化学或免疫荧光染色。结果胚龄9d,较强的HCN4阳性表达集中在MHC阴性的静脉窦壁,随心脏发育,HCN4较强阳性表达逐渐向窦房结转移。胚龄11d开始,CX43阴性表达显示部位特异性。CX43阴性染色经窦房结沿右心房背侧壁和左、右静脉瓣向房室管背侧壁延伸。胚龄13d,左、右静脉瓣与房间隔底部融合后,进一步延续为房室管背侧壁发育中的CX43阴性染色的房室结,继而与室间隔顶部CX43阴性的房室束相连。胚龄9~10d,在MHC阳性心肌、心包腔背侧壁脏壁中胚层心肌前体细胞及静脉窦周间充质均显示podoplanin阳性表达。胚龄11~13d,podoplanin阳性间充质细胞沿心脏外表面扩展形成podoplanin阳性间皮样心外膜。结论心脏发育早期,主起搏点位于静脉窦壁,起搏电位的产生早于收缩功能的发生。CX43阴性心肌是发育中的心传导系心肌,在胚龄11d即可观察到心传导系早期雏形。podoplanin参与促进心肌前体细胞向心肌细胞的分化。
- 乔爱秀景雅蔡玉瑾杨艳萍李海荣乔从进张涛王晓燕
- 关键词:胚胎发育连接蛋白43免疫组织小鼠
- 人胚心脏动脉端来自前心区
- 2008年
- 背景:对动物胚胎的活体标记试验表明鸡和小鼠胚胎心脏流出道及右心室来自心管外的咽部中胚层。人胚是否有相似情况作者经文献检索尚未见报道。目的:观察并验证人胚心脏动脉端心肌的来源。设计、时间及地点:单一样本观察,于2005-10/2006-10在山西医科大学组织胚胎学教研室完成。材料:山西医科大学各附属医院药物流产后绒毛膜保存完好的早期人胚标本25例。方法:体视显微镜下仔细分离出胚体。用Carnegie分期法对胚胎进行发育分期,其中C10期、C11期、C12期、C13期、C15期和C16期胚胎各3例,C14期胚胎7例。主要观察指标:应用免疫组织化学PAP法观察了α-平滑肌肌动蛋白和α-横纹肌肌节肌动蛋白在C10晚期至C16期人胚心脏及咽部中胚层的表达型,并用苏木精-伊红染色观察各期心脏及咽中胚层的形态学特征。结果:C10晚期至C12,流出道远端的脏层心包和心包腔的背侧壁为复层上皮,向壁层心包内延伸逐渐变为单层扁平上皮。背侧心包于C13至C15变为单层上皮。C10晚期至C13流出道远端α-平滑肌肌动蛋白和α-横纹肌肌节肌动蛋白表达可延伸至脏层心包及咽部间充质细胞。C14至C15,流出道逐渐延长,其远端的脏层心包细胞增生并迁至流出道,在近流出道心肌细胞处表达α-平滑肌肌动蛋白和α-横纹肌肌节肌动蛋白。结论:C10至C15,咽中胚层不断分化出心肌细胞添加至心脏的动脉端使流出道延长,为人胚的前心区;流出道远端心肌可诱导前心区细胞增殖分化为心肌细胞。人胚心脏动脉端心肌来自前心区。
- 李海荣杨艳萍曹锡梅刘慧霞景雅王彤
- 关键词:人胚心脏肌动蛋白类
- 人胚胎早期心脏流出道的发育被引量:3
- 2008年
- 目的探讨人胚早期心脏流出道的发育机制。方法29例C10~C16期[Carnegie分期法,受精后(22±1~37)d]人胚心脏连续切片,经抗α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、抗α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)、抗肌球蛋白重链(MHC)和抗活性Caspase-3抗体免疫组织化学染色,探讨心包腔背侧脏壁中胚层上皮、咽前间充质及动脉囊与心肌性流出道发生的关系。结果人胚发育C10~C15期,由于流出道由颈部向胸部移位及心包腔向胚胎背侧扩展,动脉囊逐渐突向心包腔内,其表面的心包腔背侧脏壁中胚层上皮不断分化为α-SCA和MHC阳性流出道心肌细胞。迁移至流出道动脉端前后壁的咽前间充质在C15期发生凋亡,流出道心肌细胞迁入间充质细胞团内取代凋亡的间充质细胞。C12期始,α-SMA阳性细胞在流出道心内膜垫聚集,参与形成螺旋状流出道嵴。C15~C16期,动脉囊后壁的α-SMA阳性细胞增生,形成主肺动脉隔,将动脉囊分隔为心包内升主动脉和肺动脉干。结论心包腔背侧脏壁中胚层是人胚心脏第二生心区,可不断分化为心肌细胞,使胚胎心肌性流出道长度增加。细胞凋亡染色提示,并非所有迁入流出道的咽前间充质细胞都可分化为心肌细胞。流出道嵴和主肺动脉隔的α-SMA阳性细胞可能来自神经嵴,经不同路线迁移至流出道嵴和主肺动脉隔。
- 李海荣李素云杨艳萍刘鱼珍曹锡梅刘慧霞王彤景雅
- 关键词:免疫组织化学人胚
- 小鼠胚胎气道平滑肌发育的形态学观察
- 2012年
- 目的探讨肌特异性蛋白质在小鼠胚胎气道平滑肌的表达特点。方法用抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、抗α-横纹肌肌动蛋白(α-SCA)和抗结蛋白(Desmin)单克隆抗体,对胎龄10~18d小鼠胚胎连续石蜡切片进行免疫组织化学显色。结果胎龄11~12d,前肠分隔为腹侧的气管和背侧的食管。胎龄12d,气管起始段后壁出现α-SMA阳性细胞,提示气管平滑肌开始发育,随着向气管下段延伸,α-SMA阳性逐渐减弱,肺静脉周围仅见极少量散在的α-SMA和α-SCA阳性细胞。胎龄13d,气管平滑肌α-SMA表达增强,并开始表达较弱的α-SCA和Desmin。胎龄14d,互为镜像的"C"形α-SMA阳性平滑肌表达出现在左、右支气管壁,α-SCA和Desmin的表达强度弱于α-SMA,此时肺静脉壁呈α-SMA强阳性表达。胎龄15d,α-SMA阳性平滑肌出现在细支气管壁。胎龄17~18d,平滑肌发育已延伸至终末细支气管,并显α-SMA阳性表达,而α-SCA和Desmin表达强度开始减弱。结论气道平滑肌发育始于胎龄12d气管上段,逐渐向下段延伸,胎龄18d,延伸至终末细支气管;Desmin的表达标志着平滑肌细胞骨架结构形成和气道平滑肌逐渐发育成熟,有助于气道平滑肌缓慢收缩功能的完善;气道平滑肌的发育早于肺静脉管壁平滑肌。
- 曹锡梅杨艳萍李海荣景雅
- 关键词:胚胎气道平滑肌发育免疫组织化学
- 人胚心静脉窦和传导系统的早期发育
- 2009年
- 目的探讨早期人胚心静脉窦及传导系的发生发育机制。方法用抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、抗α-横纹肌肌动蛋白(-αSCA)和抗结蛋白(DES)抗体对29例C10~C16期人胚心连续切片行免疫组织化学染色。结果人胚发育C12~C13期,系统静脉汇集形成的静脉窦出现于心包腔尾端原始横膈间充质中,静脉窦壁间充质细胞逐渐分化为-αSCA阳性的静脉窦心肌细胞。C14期,心包腔的扩张使静脉窦进入心包腔内,参与了右心房的形成。DES阳性传导系心肌的分化始于C10期心房室管右侧壁,随发育逐渐向室间沟心肌扩展,发育为房室传导系的希氏束、左右束支及心室腔面的小梁心肌。在心房,DES表达首先出现于C11期心房背侧壁,在C13期,可见静脉窦左背侧壁-αSCA、-αSMA、DES阳性心肌带与左心房底部、房室管背侧壁相延续,这条心肌带可能参与了人胚心静脉窦至房室管传导系的发育。C14~C16期,DES强阳性染色从窦房结经左、右静脉瓣及心房的背、腹侧壁延伸至房室管右侧壁,可能是原始的心房传导通路。结论心包腔尾端原始横膈间充质是人胚静脉窦心肌发生区,原始横膈间充质细胞逐渐分化为心肌细胞,添加到人胚心管静脉端,形成心静脉窦心肌。人胚心传导系...
- 李海荣杨艳萍李素云崔慧林刘鱼珍乔从进王彤景雅
- 关键词:静脉窦Α-平滑肌肌动蛋白结蛋白免疫组织化学人胚
- 中间丝蛋白desmin、LaminA与早期人胚心脏传导系统的构建
- 研究背景: 心血管系统是人和脊椎动物胚体内最早发育和发挥作用的器官系统。心脏通过一个专门的组织网络——心脏传导系统来精确地启动和传递动作电位,从而实现心房和心室的协调收缩。窦房结、房室结、房室束(希氏束)与左右束支近端...
- 刘慧霞
- 关键词:中间丝蛋白
- 文献传递
- 小鼠胚胎流出道心内膜α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞的分布被引量:1
- 2009年
- 背景:早期胚胎心脏流出道心内膜α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞参与了流出道的分隔,但在流出道分隔中的分布规律及作用机制仍然不明。目的:观察心内膜α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞在流出道分隔过程中分布的时空规律,探讨其与流出道分隔的关系。设计、时间及单位:单一样本观察,于2006-06/2007-12在山西医科大学组织胚胎学教研室完成。材料:鼠龄3个月的雌性中国昆明小鼠30只,体质量30~32g。方法:妊娠小鼠经乙醚麻醉,收集9~16d胎龄胚胎共32只,制作心脏切片。连续切片每10片取1片做苏木精-伊红染色,其余9片进行免疫组织化学染色。主要观察指标:抗α-平滑肌肌动蛋白、抗结蛋白、抗α-横纹肌肌节肌动蛋白单克隆抗体在胎龄9~16d小鼠胚胎心脏流出道的表达。结果:胎龄10d,可见α-平滑肌肌动蛋白阳性主肺动脉隔形成,同时,α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞沿弓动脉壁迁入流出道心胶质。胎龄11d,流出道心内膜内,α-平滑肌肌动蛋白阳性和α-平滑肌肌动蛋白阴性间充质细胞聚集形成流出道嵴。胎龄12~13d,主肺动脉隔将半月瓣远端流出道分隔为升主动脉和肺动脉干,主肺动脉隔分化为升主动脉和肺动脉干相对的内侧壁。胎龄13d后,半月瓣以下,流出道嵴愈合形成流出道隔,将流出道近段分为左右心室流出道。流出道隔中可见部分α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞聚集呈漩涡状。间充质性流出道隔形成与其肌性化相伴随。结论:流出道心内膜和主肺动脉隔的α-平滑肌肌动蛋白强阳性细胞来自神经嵴。流出道不同部位的α-平滑肌肌动蛋白阳性神经嵴细胞功能不同,与流出道其他细胞成分相互作用,完成流出道的分隔和重建。
- 杨艳萍李海荣曹锡梅景雅崔慧林
- 关键词:Α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞
- 心肌细胞凋亡不参与小鼠胚胎心脏流出道的缩短机制研究
- 2008年
- 目的探讨小鼠胚胎心脏流出道缩短的机制。方法用抗α-横纹肌肌动蛋白(α-SCA)抗体、抗活性Caspase-3(Cas-3)抗体对25只胎龄10~12 d(E10~12)小鼠胚胎心脏连续切片进行免疫组织化学过氧化物酶-抗过氧化物酶复合体(PAP)法染色。结果小鼠胚胎心脏流出道绝对长度于胎龄第12天8:00后开始缩短,至20:00流出道远端心肌界已退至半月瓣水平。在流出道缩短前及缩短过程中,流出道心肌细胞未见Cas-3阳性细胞。结论同鸡胚一样,心肌细胞凋亡不是小鼠胚胎心脏流出道缩短的主要机制。
- 李海荣杨艳萍曹锡梅景雅乔从进王彤
- 关键词:小鼠胚胎辅肌动蛋白免疫组织化学
- 小鼠胚胎心脏流出道嵴的发育被引量:3
- 2010年
- 目的探讨小鼠胚胎心脏流出道嵴内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞的来源及流出道嵴融合时间充质细胞超微结构的变化。方法用抗α-SMA、抗α-横纹肌肌动蛋白(α-SCA)单克隆抗体、PlexinA2探针,对胚龄10~14d小鼠胚胎心脏切片进行免疫组织化学和原位杂交染色;透射电镜观察胚龄12.5d时小鼠心流出道嵴的融合过程。结果胚龄10~11d,小鼠神经管及其周围、动脉囊和弓动脉壁可见PlexinA2阳性细胞,并沿动脉囊壁迁入流出道嵴内,部分细胞同时表达α-SMA。胚龄12d,PlexinA2阳性细胞分布在脊神经节、咽前间充质、主肺动脉隔以及主、肺动脉壁。主肺动脉隔显α-SMA强阳性,但动脉壁仅见少量α-SMA阳性细胞。胚龄12.5d,流出道嵴内致密间充质细胞团形成并开始融合,PlexinA2表达较弱,α-SMA表达呈强阳性。在流出道嵴融合开始后,嵴表面的内皮细胞带形成继而断裂消失,由含微丝少、排列稀疏的间充质细胞取代。两侧致密细胞团逐渐靠拢、融合。有的间充质细胞内含较多线粒体和微丝,细胞之间形成细胞连接点;有的间充质细胞含微丝少,细胞膜间断融合。结论流出道心内膜垫内α-SMA阳性间充质细胞来自神经嵴;内皮细胞-间充质细胞转化可能参与了流出道嵴融合;致密细胞团内间充质细胞富含微丝束和细胞连接点或发生细胞膜融合有助于流出道嵴的融合。
- 杨艳萍赵瑞庆李海荣崔慧林乔从进张涛景雅
- 关键词:胚胎免疫组织化学小鼠