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逆转录病毒载体介导的LacZ基因在NIH-3T3细胞中的稳定表达(英文): 2005年; 精原干细胞(SSCs)介导的转基因技术很可能成为制作转基因动物及治疗雄性不育的一条新途径。为了研究逆转录病毒载体介导法转染体外培养SSCs的可行性,用脂质体介导法将携带LacZ基因的重组逆转录病毒载体pLNCL导入包装细胞PA317,用含G418的培养液筛选得到5株稳定转染的产毒细胞。收集这些克隆的产毒上清,过滤后进行倍比稀释,用NIH-3T3细胞通过X-gal染色测定其浓缩前病毒滴度。结果显示,PA3173培养上清中病毒的浓缩前滴度最高,达1.1×103CFU/mL。再将筛选到的稳定转染的NIH-3T3细胞培养至单层,进行X-gal染色检测β-半乳糖苷酶的表达。结果显示,大多数稳定转染的NIH-3T3细胞均为X-gal+,表明这些细胞成功表达了目的基因LacZ。本研究结果为后期工作中用该载体感染体外培养SSCs奠定了基础。; 张学明岳占碰杜崇涛安铁洙高丰邓旭明柳巨雄成军李德雪; 关键词：LACZ基因逆转录病毒载体基因表达精原干细胞

哺乳动物精原干细胞移植研究进展被引量：2: 2004年; 精原干细胞(SSCs)移植是将正常动物或转基因、突变动物的生精细胞移入受体睾丸曲精小管,供体细胞中的SSCs在受体睾丸内存活、迁移、定居、增殖,从而启动精子发生,甚至产生有受精能力精子的一项新技术,该技术为探讨精子发生机理、重建不育个体的精子发生、生产转基因动物等提供了新的途径.文中就SSCs移植时供(受)体的条件、供体SSCs在受体睾丸内的活动过程及SSCs移植的应用等进行了评述。; 张学明岳占碰杜崇涛李政李德雪; 关键词：哺乳动物精原干细胞细胞移植精子发生

精原干细胞的体外增殖与分化(英文)被引量：2: 2005年; 最近,由于干细胞研究普遍取得的令人鼓舞的进展以及干细胞分离、培养、移植等新技术方法的出现和发展,出生后雄性个体的生殖系干细胞———精原干细胞(spermatogonialstemcell,SSC)已成为一个愈加引人瞩目的课题。SSC位于睾丸曲细精管基膜上,既具有自增殖(self-renewal)潜能和定向分化潜能,又是自然状态下出生后个体内在整个生命期间能够进行自增殖并能将基因传递至子代的惟一成体干细胞。了解干细胞增殖与分化的调节机制,获得足够数量的种子细胞一直是所有干细胞研究共同面临的迫切问题之一。近年来,借助于SSCs移植技术这一功能性检测方法,国内外学者就SSCs体外培养的条件进行了深入探讨,取得了可喜进展。结合自己的前期工作,参考相关最新进展,就影响哺乳类SSCs体外存活、增殖、分化的因素及未来需要解决的问题进行了评述。; 张学明李德雪岳占碰; 关键词：精原干细胞曲细精管基因传递分化潜能生命期哺乳类

精原干细胞移植及体外培养研究进展被引量：2: 2006年; 精原干细胞(sperm atogon ial stem cells,SSCs)移植是近年来发展起来的一项技术,是将供体动物(正常动物或转基因动物)的SSCs移植到受体动物的睾丸内,使其在受体睾丸内迁移、定居、增殖并启动精子发生,产生有受精能力精子的过程。该技术在雄性不育的治疗、精子发生机制的探讨、干细胞生物学研究以及优质动物或转基因动物繁育等方面具有广阔的应用前景。SSCs的体外培养是制约该技术发展的瓶颈。近年来,许多研究者报道了SSCs体外培养的影响因子及其生长特点。本文就近年来SSCs的体外培养及移植的研究进展作了概要评述。; 李恩中李德雪张世庆王常勇; 关键词：精原细胞干细胞体外培养

牛精原干细胞研究进展: 2007年; 精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是雄性生殖系干细胞,位于睾丸曲细精管基膜上,既具有自我更新潜能,又具有定向分化潜能,是自然状态下出生后动物体内在整个生命过程中进行自我更新并能将基因传递至子代的惟一成体干细胞。根据国内外最新相关进展,系统评述了牛SSCs的生物学特性、分离纯化、冷冻保存、体外培养、永生细胞系的建立及移植等方面的现状及问题。; 吴建英胡铁军岳占碰张学明李子义李德雪; 关键词：精原干细胞生物学特性

17beta-estradiol stimulates proliferation of spermatogonia in experimental cryptorchid mice被引量：3: 2007年; Aim： To investigate whether estrogen stimulates the proliferation of spermatogonia or induces spermatogenesis in cryptorchid mice. Methods： Mice were surgically rendered cryptorchid, then treated with different doses of 17β- estradiol （E2） s.c. once a day. Mice were killed at sexual maturity （45 days of age）, and histological analysis and inununofluorescence were performed. Serum follicle stimulating hormone （FSH）, estradiol, testosterone and luteinizing hormone （LH） were measured. Results： Low doses of E2 had no notable effect on spermatogonia, but at higher doses, E2 stimulated the proliferation of spermatogonia. Conclusion： E2 has a dose-related mitogenic effect on spermatogonia.; En-Zhong LiDe-Xue LiShi-Qing ZhangChang-Yong WangXue-Ming ZhangJing-Yan LuCui-Mi DuanXiang-Zhong YangLi-Xin Feng; 关键词：17Β-ESTRADIOL PROLIFERATION SPERMATOGONIA

睾丸提取液、EGF、雌激素对小鼠精原干细胞体外存活和增殖的效果被引量：3: 2006年; 为探讨成年小鼠睾丸提取液(testicularabstract,TA)、表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)、雌二醇-17β(estradiol-17β,E2)对小鼠精原干细胞(spermatogonialstemcells,SSCs)体外存活及增殖的作用。用胶原酶-胰蛋白酶消化、差速贴壁法分离8d小鼠的SSCs,培养于STO细胞饲养层上,培养液中分别添加不同浓度的TA、EGF和E2,观察SSCs的存活时间和增殖能力。结果显示,添加3种因子后,SSCs的平均存活时间与对照组相比虽无显著差异。但在20～40ng/mlEGF和10～100pg/mlE2组中SSCs的平均存活时间均明显延长,且在较长时间段内观察到了处于明显增殖期的细胞。提示20～40ng/mlEGF和10～100pg/mlE2对小鼠SSCs的体外存活和增殖具有一定良好作用。; 张学明李德雪岳占碰于家傲张世庆李恩中李政; 关键词：EGF 雌激素精原干细胞小鼠

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国家自然科学基金(30200195)