中国博士后科学基金(20070421022)
- 作品数：6 被引量：42H指数：5
- 相关作者：冯志新邵国青刘茂军吴叙苏甘源更多>>
- 相关机构：江苏省农业科学院山西农业大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金江苏省农业科技自主创新基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
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- 猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立及应用被引量：15
- 2010年
- 根据GenBank中登录的猪肺炎支原体P36(L-乳酸脱氢酶)全基因序列,设计合成了2对引物,建立套式PCR方法。运用该方法对猪肺炎支原体不同菌株培养物进行了扩增,并对经肺内免疫猪支原体肺炎活疫苗后支气管肺泡灌洗液进行了检测。结果表明,不同菌种均能扩增出427 bp的目的条带,而其他病原菌未出现特异性扩增条带。建立的套式PCR方法检测猪肺炎支原体的最低检测限度为10个CCU(颜色变化单位)。支气管肺泡灌洗液检测结果表明,经肺内免疫的猪支气管肺泡灌洗液扩增结果均为阳性。
- 逯晓敏冯志新刘茂军吴叙苏甘源张映邵国青
- 关键词：猪肺炎支原体P36套式PCR
- 抗猪肺炎支原体IgA间接ELISA检测方法的建立被引量：5
- 2009年
- 为了更准确地对猪肺炎支原体感染及免疫状况进行检测,作者拟建立抗猪肺炎支原体IgA间接ELISA检测方法。在比较了猪肺炎支原体全菌抗原和粘附因子P97R1原核表达蛋白后,选择后者作为包被抗原;以羊抗猪IgA为二抗,兔抗猪IgG-HRP作为酶标三抗,并分别对包被抗原的浓度、样品的孵育时间、二抗与三抗的最佳稀释度和作用时间以及显色液的作用时间作了优化。最终建立了稳定而特异的抗猪肺炎支原体IgA的间接ELISA检测方法。批间与批内试验结果证明该方法具有很好的稳定性。初步应用表明,该方法可用于猪肺炎支原体感染或免疫状态的临床监测。
- 逯晓敏冯志新刘茂军吴叙苏甘源张映邵国青
- 关键词：猪肺炎支原体IGA间接ELISA
- 猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立
- 根据GeneBank中登录的猪肺炎支原体P36(L-乳酸脱氢酶)全基因序列,设计合成了2对引物,建立了适合猪肺炎支原体检测的套式PCR方法.运用该方法对猪肺炎支原体(168株)培养物进行了检测.结果显示,该培养物能扩增出...
- 逯晓敏冯志新刘茂军吴叙苏甘源张映邵国青
- 关键词：猪肺炎支原体P36套式PCR
- 文献传递
- 猪支原体肺炎防治研究进展
- 本文列举了目前临床上用于防治猪支原体肺炎的药物与疫苗的名称和用法用量,并分析了其作用机制及使用效果.抗生素只能抑制支原体生长,无法完全清除,只能解决暂时性问题,且一旦停止用药容易复发,并容易使支原体产生耐药性.国外使用的...
- 冯志新邵国青刘茂军
- 关键词：猪支原体肺炎抗生素疫苗
- 文献传递
- 猪肺炎支原体P46蛋白单克隆抗体制备被引量：11
- 2010年
- P46蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,且与其他支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的靶蛋白。制备针对该蛋白的特异性单抗能为猪肺炎支原体的检测及机理研究提供有效的资源。本研究取猪肺炎支原体全菌抗原免疫小鼠,用大肠杆菌表达的P46蛋白作为筛选抗原制备了2株特异性单克隆抗体1A4和3C11。结果显示,2株单抗ELISA效价最高可达1∶64 000。Western-blot结果表明,2株单抗均能与原核表达的P46蛋白及猪肺炎支原体全菌蛋白中46 000大小的蛋白发生特异性反应;2株杂交瘤细胞株经3个月冻存或连续传代3个月均能保持较高的滴度。本研究成功制备了2株针对猪肺炎支原体P46蛋白的特异、稳定且高滴度的单克隆抗体。
- 冯志新迟灵芝刘茂军王海燕甘源吴叙苏邵国青
- 关键词：猪肺炎支原体单克隆抗体
- 猪肺炎支原体黏附因子P97R1区单抗制备被引量：1
- 2009年
- 猪肺炎支原体（Mycoplasmahyopneumoniae，Mhp）与呼吸道黏膜纤毛的特异性吸附是引起猪支原体肺炎（Mycoplasmapneumoniaeofswilqe，MPS）的先决条件.Minmn等研究表明，97蛋白R1区直接参与支原体与呼吸道纤毛的黏附，同时P97的主要抗原决定簇也位于该区域。P97R1区在猪8市炎支原体的检测诊断与致病机理研究方面具有重要意义。本研究以纯化的猪肺炎支原体全菌蛋白作为免疫原，以大肠杆菌表达的P97R1融合蛋白作为筛选抗原制备锗肺炎支原体P97R1区的特异性单抗，为Mhp的诊断检测及致病机制研究提供基础。
- 冯志新刘茂军王海燕甘源吴叙苏邵国青
- 关键词：猪肺炎支原体单克隆抗体
- 猪支原体肺炎防治研究进展被引量：7
- 2008年
- 本文列举了目前临床上用于防治猪支原体肺炎的药物与疫苗的名称和用法用量,并分析了其作用机制及使用效果。抗生素只能抑制支原体生长,无法完全清除,只能解决暂时性问题,且一旦停止用药容易复发,并容易使支原体产生耐药性。国外使用的主要是灭活疫苗,但它无法激发猪体全身免疫系统,需配合优良佐剂使用。国内研制的弱毒疫苗效果很好,但免疫接种方法难度大,不易推广。本文同时综述了目前实验室关于猪支原体肺炎基因工程疫苗的研究进展,并对该病进一步的综合防控措施提出了建议。
- 冯志新邵国青刘茂军
- 关键词：猪支原体肺炎抗生素疫苗
- 雾化对猪支原体肺炎活疫苗活力的影响被引量：6
- 2009年
- 为研究经喷雾器雾化对活疫苗微生物学活性的影响,用变色单位(CCU)法分别对经过不同压力雾化前后的猪支原体肺炎活疫苗活力进行测定,结果表明,喷雾器在雾化过程中的切割力能显著降低疫苗的活力。喷雾器喷射压力越大,对疫苗活力下降的影响越大。
- 冯志新李桂兰邵国青
- 关键词：雾化猪支原体肺炎活疫苗
- 猪肺炎支原体黏附因子P97R1、膜蛋白P46单抗制备
- 目的P46蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,且与其它支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的耙蛋白或靶基因.P97蛋白是猪肺炎支原体的黏附因子,与病原的感染与致病机制相关,其中R1区是P97蛋白的主要抗原决定簇.制...
- 冯志新刘茂军王海燕甘源吴叙苏邵国青
- 关键词：猪肺炎支原体单克隆抗体
- 文献传递
