山东省科技发展计划项目(2013GSF11839)
- 作品数：5 被引量：7H指数：1
- 相关作者：黎莉黎晓晴丁焕孙颖孙颖更多>>
- 相关机构：山东大学浙江大学山东大学齐鲁医院(青岛)更多>>
- 发文基金：山东省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 磷脂酰肌醇-4-磷酸酶Ⅱ与乳腺癌临床特点及预后的关系
- 2019年
- 目的探讨磷脂酰肌醇-4-磷酸酶Ⅱ(INPP4B)在乳腺癌中的表达以及与乳腺癌病人临床特征、预后的关系。方法收集264例乳腺癌病人病理切片,采用免疫组化技术,分析INPP4B的表达情况;并分析INPP4B表达与病人年龄、淋巴结转移数目、组织学分级、肿块大小、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人类表皮生长因子受体-2、增殖指数(Ki67)、细胞角蛋白5/6(CK5/6)、P53及乳腺癌亚型关系;通过随访获得病人无病生存期(DFS),以进一步探讨INPP4B表达与乳腺癌病人预后的关系。结果 54例病人INPP4B蛋白表达阴性,其中三阴性乳腺癌(TNBC)病人INPP4B表达阴性率明显高于其他的亚组(χ~2=3.22,P<0.05);INPP4B表达阴性与ER与PR表达阴性(χ~2=2.32、4.08,P<0.05)、CK5/6表达(χ~2=6.19,P<0.05)、无脉管癌栓(χ~2=7.98,P<0.05)、较高Ki67水平(χ~2=2.89,P<0.05)密切相关。INPP4B表达阴性与TNBC病人DFS缩短有关(χ~2=9.45,P<0.05)。结论INPP4B表达阴性在TNBC中更为常见;INPP4B表达阴性与乳腺癌病人不良预后有关。
- 孙颖刘相永黎莉
- 关键词：乳腺肿瘤免疫组织化学
- 多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂AG014699联合化疗对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖的影响被引量：7
- 2014年
- 目的研究多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）抑制剂AG014699联合多西他赛（DTX）或卡铂（CBP）对三阴性乳腺癌细胞株MDA—MB-231增殖的影响，探讨PARP抑制剂AG014699联合化疗是否有协同抗肿瘤效应。方法PARP抑制剂AG014699与DTX、CBP单独或联合作用于MDA—MB-231细胞，细胞增殖及细胞毒性实验法检测细胞增殖并用联合用药公式分析合用效应（q值0.85—1．15为单纯相加，〉1．15为协同，〈0．85为拮抗）；流式细胞仪分析细胞凋亡及周期分布。结果PARP抑制剂AG014699、DTX、CBP单独作用于MDA—MB-231细胞，均可抑制增殖，诱导凋亡，引起细胞周期阻滞；PARP抑制剂AG014699（10μmol／L）与DTX（10^-8、10^-7、10^-6、10^-5mol／L）、CBP（10^-5、10^-4mol／L）联合作用时，q值在0．85—1．15，显示相加效应；PARP抑制剂AG014699与CBP（10^-3mol／L）联合作用时，q值〉1．15，显示协同效应。PARP抑制剂AG014699联合DTX或CBP能进一步促进凋亡，并使G2／M期细胞比例增加。结论PARP抑制剂AG014699联合化疗药物DTX或CBP能显著抑制MDA—MB．231细胞增殖，发挥相加或协同抗肿瘤作用。
- 孙颖丁焕黎晓晴黎莉
- 关键词：三阴性乳腺癌多西他赛卡铂
- 人磷脂酰肌醇4-磷酸酶Ⅱ型重组慢病毒载体的构建及其在人雄激素抵抗型前列腺癌PC3细胞中的表达
- 2020年
- 目的构建人磷脂酰肌醇4-磷酸酶Ⅱ型(inositol polyphosphate 4-phosphatase typeⅡ,INPP4B)重组慢病毒表达载体,并检测其在人雄激素抵抗型前列腺癌细胞株PC3中的表达。方法以人工合成的人INPP4B基因为模板,PCR扩增目的基因片段,克隆入pGC-FU载体构建重组质粒pGC-FU-INPP4B,将其与辅助包装原件PHelper 1.0和PHelper 2.0载体经Lipofectamine TM 2000介导共转染293T细胞,包装获得携带人INPP4B基因的重组慢病毒LentiINPP4B,免疫荧光法测定病毒滴度。用Lenti-INPP4B感染PC3细胞(Lenti-INPP4B组),以慢病毒Lenti-GFP(携带GFP基因)感染的PC3细胞为阴性对照,RT-PCR及Western blot检测PC3细胞中INPP4B m RNA水平和蛋白的表达,CCK8法检测PC3细胞增殖;Western blot检测PC3细胞中p-AKT水平。结果经PCR及测序鉴定,重组质粒p GC-FU-INPP4B构建正确;Lenti-INPP4B病毒滴度达2×10-8 TU/mL。与阴性对照组比较,Lenti-INPP4B组PC3细胞中INPP4B m RNA水平显著提高(P<0.05),细胞活力抑制显著(P<0.05),细胞内p-AKT水平降低;INPP4B蛋白在Lenti-INPP4B组细胞中表达,在阴性对照组中未表达。结论成功构建了INPP4B慢病毒表达载体,其在PC3细胞中的表达能显著抑制细胞增殖,可能是通过下调p-AKT水平发挥作用。本文为靶向治疗雄激素抵抗型前列腺癌提供了新思路。
- 丁焕孙颖黎莉
- 关键词：PC3细胞
- 转染INPP4B基因对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖的影响
- 2013年
- 目的检测转染聚磷脂酰肌醇4-磷酸酶Ⅱ(INPP4B)基因对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖的影响。方法采用反转录PCR法、Western blotting印迹法检测INPP4B在三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231中的表达;通过慢病毒转染,使MDA-MB-231细胞表达INPP4B;实时定量PCR法检测转病毒后MDA-MB-231细胞INPP4B mRNA的相对表达量;Western blotting印迹法检测转病毒后MDA-MB-231细胞磷酸化丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶B(p-AKT)以及INPP4B的蛋白表达。CCK-8法、流式细胞术分别检测转病毒后MDA-MB-231细胞增殖、凋亡及周期分布。结果 INPP4B在三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231中低表达;慢病毒转染使MDA-MB-231细胞INPP4B mRNA和蛋白的表达均上调,p-AKT蛋白的表达降低;转病毒后MDA-MB-231细胞增殖受到明显抑制,并阻滞于G0/G1期。结论 INPP4B基因能明显抑制三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的增殖,并可通过影响PI3K/AKT信号通路发挥抗肿瘤作用。
- 孙颖丁焕黎晓晴黎莉
- 关键词：慢病毒三阴性乳腺癌增殖
- PARP抑制剂联合吉西他滨或多西他赛对雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞增殖的影响
- 2014年
- 目的探讨多聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)抑制剂AG014699联合吉西他滨或多西他赛对雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞增殖的影响。方法体外培养PC3细胞,实验分PARP抑制剂AG014699组、吉西他滨组、多西他赛组、PARP抑制剂联合吉西他滨组、PARP抑制剂联合多西他赛组。采用CCK-8法检测各组细胞活力;流式细胞术分析不同浓度的PARP抑制剂对PC3细胞凋亡及周期分布的影响。结果 PARP抑制剂AG014699能显著抑制PC3细胞的活力,促进凋亡,并具有浓度-时间依赖性(P<0.05);吉西他滨或多西他赛单药组均能抑制PC3增殖且具有浓度依赖性(P<0.05);吉西他滨或多西他赛与PARP抑制剂联合作用于PC3细胞后,相对单药组,细胞活力进一步降低(P<0.05)。结论 PARP抑制剂AG014699联合吉西他滨或多西他赛均可显著抑制雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞的增殖,有望成为雄激素非依赖性前列腺癌的治疗方法之一。
- 丁焕孙颖黎晓晴黎莉
- 关键词：雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞PARP抑制剂吉西他滨多西他赛
