广东省自然科学基金(10151008901000182)
- 作品数：6 被引量：93H指数：5
- 相关作者：许林锋倪嘉延陈耀庭孙宏亮吴裕丹更多>>
- 相关机构：中山大学孙逸仙纪念医院吉林大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- HIF-1α基因干扰对大鼠CBRH-7919肝癌细胞HIF-1α与VEGF表达影响的研究被引量：14
- 2012年
- 目的:探讨沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对肝癌细胞在缺氧状态下表达HIF-1α及血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法:选用大鼠CBRH-7919肝癌细胞株作为研究对象,利用氯化钴(CoCl2)模拟缺氧状态,构建3组特异性较强的HIF-1αsiRNA表达载体,采用小分子RNA干扰技术沉默细胞HIF-1α的基因表达,分别利用real timeRT-PCR和蛋白质印迹法检测肝癌细胞HIF-1α和VEGF在mRNA及蛋白水平的表达变化。结果:在不同浓度CoCl2模拟缺氧条件下,随着CoCl2浓度的增高及时间的推移,肝癌细胞HIF-1α和VEGF的表达(mRNA及蛋白水平)较常氧对照组(0μmol/L CoCl2)显著增多,差异均有统计学意义,P<0.05。应用3组不同HIF-1α和siRNA表达载体转染缺氧条件下的肝癌细胞后,细胞的HIF-1α和VEGF的基因(mRNA)表达量与未转染HIF-1αsiRNA表达载体对照组相比较明显减少,同步检测两者的蛋白表达亦明显减少,与对照组差异均有统计学意义,P<0.05。结论:缺氧可以诱导肝癌细胞HIF-1α和VEGF的表达,siRNA沉默HIF-1α能显著抑制缺氧状态下诱导的VEGF表达。
- 倪嘉延吴裕丹黄康华许林锋
- 关键词：肝肿瘤缺氧诱导因子-1ΑRNA干扰
- 原发性肝癌TACE与RFA联合治疗临床研究的Meta分析被引量：19
- 2013年
- 目的：分析比较经动脉化疗栓塞（transarterialchemoembolization，TACE）联合射频消融（radiofrequencyabla—tion，RFA）和单独应用TACE或RFA治疗原发性肝癌的临床疗效。方法：利用计算机检索PubMed、Medline、Embase、中国期刊全文数据库（CNKI）及万方数据库收录的关于比较TACE联合RFA与单独TACE和（或）RFA治疗原发性肝癌临床疗效及预后的随机对照试验。应用ReviewManager（Version4．2．2．）软件，按照Cochrane协作网推荐的方法，对符合纳入标准的文献报道结果进行Meta分析。结果：本研究纳入6组随机对照试验，共包括原发性肝癌患者376例。根据异质性检验结果，总体生存率：I21年=0，χ21年＝0．81，P1年＝0．94；I23年＝35．5％，χ23年＝6．20，P3年＝0．18；肿瘤无复发生存率：I21年＝10．06％，χ21年＝2．24，P1年＝0．33；I23年=0，χ23年＝1．03，P3年＝0．60，应用固定效应模型进行合并分析。Meta分析结果显示，TACE序贯联合RFA治疗原发性肝癌的1年总体生存率优于单独TACE或RFA治疗，0R1年＝4．61，95％CI为2．26～9．42，P〈0．001，3年总体生存率优于单独TACE或RFA治疗，OR3年＝2．79，95％CI为1．69～4．61，P〈0．001，3年肿瘤无复发生存率优于单独TACE或RFA治疗，OR3年＝3．00，95％CI：1.75～5．13，P〈0．001；1年肿瘤无复发生存率方面，联合介入治疗与单一介入治疗差异无统计学意义，OR1年=1．55，95％CI为0．91～2．65，P=0．11。结论：TACE联合RFA治疗原发性肝癌患者显著优越于TACE和RFA单独疗法。
- 倪嘉延刘姗姗许林锋孙宏亮陈耀庭
- 关键词：肝肿瘤经动脉化疗栓塞射频消融META分析
- HIF-1α基因表达沉默对肝癌细胞PI3K/AKT信号转导通路影响的研究被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨沉默缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因表达对肝癌细胞PI3K/AKT信号转导通路的影响。方法:选用大鼠CBRH-7919肝癌细胞株作为研究对象,利用氯化钻(CoCl2)建立厌氧模型。构建HIF-1α小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)特异性载体复合物,小分子RNA干扰技术沉默肝癌细胞HIF-1α的基因表达,分别利用RT-PCR和免疫印迹法检测肝癌细胞HIF-1α、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、磷酸化AKT(p-AKT)、AKT和PI3K在mRNA和(或)蛋白水平的表达变化。结果:肝癌细胞在缺氧条件下表达HIF-1α较常氧对照组显著增多,差异具有统计学意义,PmRNA=0.002,P蛋白=0.003。特异性HIF-1αsiRNA表达载体转染肝癌细胞后,肝癌细胞HIF-1α(PmRNA和P蛋白均<0.001)、VEGF(PmRNA=0.001,P蛋白<0.001)和p-AKT(P蛋白<0.001)的表达明显减少;AKT和PI3K的表达显著增多,与对照组的差异均具有统计学意义,P蛋白值分别为0.032和0.020。结论:特异性siRNA干扰沉默HIF-1α基因表达可抑制肝癌细胞PI3K/AKT信号转导通路的激活。
- 倪嘉延吴裕丹许林锋孙宏亮陈耀庭
- 关键词：缺氧诱导因子-1ΑRNA干扰蛋白激酶B
- 联合介入治疗中晚期原发性肝癌远期疗效及影响因素分析被引量：38
- 2013年
- [目的]评价经导管动脉化疗栓塞（TACE）联合微波消融（MWA）治疗中晚期原发性肝癌的远期临床疗效及主要影响因素.[方法]本研究随访2005年1月至2011年12月间在中山大学孙逸仙纪念医院介入科接受TACE联合MWA治疗的86例中晚期原发性肝癌患者,其中男性76例,女性10例,年龄11～78（54.97＋15.43）岁.利用SPSS17.0版统计软件,单因素分析采用Kaplan-Meier方法及Log-rank检验,多因素分析采用Cox逐步回归方法.[结果]本组患者中位生存时间为21.5个月,1、2、3、5年累积生存率分别为72.3％、44.7％、31.5％、13.1％.单因素分析与预后有关的因素有肿瘤大小、BCLC分期、Child-Pugh分级、门脉癌栓、动静脉瘘、MWA治疗次数、ECOG评分及靶向药物治疗.Cox逐步回归多因素分析与预后有关并具有显著意义的因素变量为肿瘤大小、BCLC分期、门脉癌栓、MWA治疗次数、ECOG评分及靶向药物治疗.[结论]肝癌靶向药物治疗及适当重复MWA治疗可延长中晚期肝癌患者的生存时间,为预后保护性因素;大肝癌、临床分期较差及门脉癌栓为预后危险性因素.
- 倪嘉延许林锋陈耀庭孙宏亮谭绮尹胡仁美
- 关键词：原发性肝癌经导管动脉化疗栓塞微波消融
- HIF-1α基因沉默对大鼠肝癌CBRH-7919细胞p27和Ki67表达的影响被引量：13
- 2012年
- 目的:探讨沉默缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)基因对大鼠肝癌CBRH-7919细胞在缺氧状态下p27和Ki67表达的影响。方法:选用大鼠肝癌细胞株CBRH-7919作为研究对象,利用氯化钻(CoCl2)模拟缺氧状态。构建HIF-1αsiRNA特异性载体,利用小分子RNA干扰技术沉默肝癌细胞HIF-1α基因。应用real-time RT-PCR和Western blotting方法分别检测肝癌细胞HIF-1αmRNA和蛋白的表达变化,用Western blotting方法检测肝癌细胞p27和Ki67蛋白的表达变化。应用流式细胞术检测细胞周期的变化。结果:在缺氧条件下,肝癌细胞HIF-1αmRNA及蛋白表达显著增多(P<0.05)。HIF-1α基因被沉默后,HIF-1αmR-NA和蛋白表达以及Ki67蛋白表达量明显减少(P<0.05),p27蛋白表达量显著增多(P<0.05)。转染组G0/G1期的肝癌细胞数量明显多于对照组,S期细胞显著减少(P<0.05)。结论:缺氧可以诱导肝癌细胞HIF-1α的表达;特异性siRNA沉默HIF-1α,可能通过促进p27的表达和抑制Ki67的表达,在一定程度上抑制了肝癌细胞的增殖。
- 许林锋倪嘉延陈耀庭孙宏亮吴裕丹
- 关键词：缺氧诱导因子P27蛋白KI67蛋白CBRH-7919细胞
- 沉默HIF-1α基因表达对大鼠肝癌细胞增殖的影响被引量：7
- 2013年
- 目的:探讨沉默缺氧诱导因子1α(HIF-1α)基因表达对缺氧状态下肝癌细胞增殖的影响。方法:选用大鼠CBRH-7919肝癌细胞株作为研究对象,利用氯化钴(CoCl2)建立缺氧模型。制备3组特异性较强的HIF-1αsiRNA-脂质体复合物,转染于肝癌细胞。利用real-time RT-PCR、Western blotting等方法分别检测肝癌细胞HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)、p21和cyclin D1在mRNA和(或)蛋白水平的表达。MTT及BrdU掺入实验检测细胞增殖的变化。结果:缺氧条件下,肝癌细胞的HIF-1α和VEGF mRNA及蛋白表达显著增多(P<0.05)。HIF-1α基因表达沉默后,HIF-1α、VEGF及cyclin D1 mRNA和(或)蛋白表达明显减少(P<0.05),p21蛋白表达明显增加(P<0.05)。HIF-1αsiRNA转染组的BrdU阳性细胞比例明显少于对照组(P<0.05)。结论:沉默HIF-1α基因表达对缺氧状态下肝癌细胞的增殖有显著抑制作用。
- 吴裕丹倪嘉延陈耀庭孙宏亮许林锋
- 关键词：缺氧诱导因子1ΑP21蛋白细胞周期蛋白D1CBRH-7919细胞
