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国家自然科学基金(30400461)
作品数:
3
被引量:32
H指数:3
相关作者:
康春生
浦佩玉
王广秀
裘明哲
张志勇
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相关机构:
天津医科大学总医院
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发文基金:
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医药卫生
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3篇
天津医科大学...
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天津大学
作者
3篇
王广秀
3篇
浦佩玉
3篇
康春生
2篇
贾志凡
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张志勇
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裘明哲
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李彦和
1篇
原续波
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董伦
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传媒
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中华实验外科...
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年份
1篇
2007
1篇
2006
1篇
2005
共
3
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靶向性表皮生长因子受体siRNA表达载体的构建和表达
被引量:3
2005年
目的 构建靶向性表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的小分子干扰RNA(sm all interfering RNA,si RNA)表达载体并在TJ90 5人脑恶性胶质瘤细胞系表达。方法 在人EGFR细胞外区受体结合结构域和细胞内区酪氨酸激酶结构域各选择1个si RNA靶序列、进行了psi RNA- Neo G2表达载体的构建,进而以反义EGFR表达载体p- anti- h EGFR为对照进行了脂质体介导的TJ90 5人脑恶性胶质瘤细胞系表达。应用免疫荧光和蛋白印迹检测EGFR的表达。结果 成功构建以psi RNA- Neo G2为载体的si RNA表达质粒,并分别使其在稳定转染TJ90 5细胞后EGFR表达下调90 %和92 % ;反义EGFR表达载体p- anti- h EGFR使EGFR表达下调82 %。结论 靶向EGFR的si RNA表达载体可以特异性地抑制EGFR的表达,可以成为胶质瘤靶向性EGFR基因治疗的一种新策略。
康春生
浦佩玉
王广秀
董伦
李彦和
王虎
关键词:
表皮生长因子受体
靶向性
胶质瘤细胞系
脂质体介导
胞内区
反义表皮生长因子受体RNA对U251胶质瘤细胞生长的抑制作用
被引量:24
2006年
目的探讨反义靶向表皮生长因子受体(EGFR)在体内外对U251细胞生长抑制作用。方法构建反义EGFR的pcDNA3表达质粒并进行了脂质体介导的U251人脑恶性胶质瘤细胞系基因转染。应用RT-PCR检测EGFR表达水平,应用MTT法、流式细胞术、Matrigel基质生长实验和Transwell方法评价肿瘤细胞转染前后的生物学行为。进一步应用裸鼠皮下荷瘤模型观察脂质体介导反义EGFR基因治疗对U251细胞生长抑制作用。对肿瘤组织应用免疫组织化学的方法进行EGFR、PCNA和GFAP表达比较。结果脂质体介导反义EGFR可显著抑制U251细胞ECFR表达,MTT法分析显示反义EGFR转染组胞生长抑制率为68%;与对照组和pcDNA3转染组比较,细胞周期分析结果表明p-anti-hEGFR转染组G0~G1期细胞数没有明显变化,进入S期的细胞数较对照组减少了,而进入G2期细胞则增加。Matrigel基质生长实验显示对照组和peDNA3转染组细胞呈正常形态贴壁生长。而p-anti-hEGFR转染组细胞不能贴壁生长,呈团块状簇集生长。Transwell方法显示肿瘤细胞的体外侵袭能力显著下降。裸鼠皮下荷瘤模型实验显示反义EGFR RNA可以显著抑制皮下肿瘤生长,组织病理学分析显示治疗组EGFR表达下降而GFAP表达上调。结论反义EGFR可以显著抑制U251细胞的EGFR表达,在体内外对U251细胞生长均产生明显抑制作用。
康春生
浦佩玉
张志勇
王广秀
贾志凡
裘明哲
原续波
常津
关键词:
RNA
U251细胞
胶质瘤
细胞生长
组织病理学
靶向表皮生长因子受体的shRNA抑制U251胶质瘤生长的实验研究
被引量:5
2007年
目的 探讨靶向表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的RNA干涉(RNAi)技术抑制恶性胶质瘤体外细胞系U25l的EGFR表达后,在体内外对U251细胞生长抑制作用。方法 在人EGFR开放阅读框的细胞内区酪氨酸激酶结构域选择1个siRNA靶序列、进行短发夹RNA(shRNA)表达载体psiRNA-2400的构建,并以含有随机序列的psiRNA-scr表达质粒为对照进行了脂质体介导的U251人脑恶性胶质瘤细胞系表达。应用RT-PCR检测EGFR表达水平,应用MTT法、流式细胞术和Matrigel基质生长实验评价肿瘤细胞转染前后的生物学行为。进一步应用裸鼠皮下荷瘤模型观察脂质体介导shRNA基因治疗对U251细胞生长抑制作用。对肿瘤组织应用免疫组化的方法进行EGFR、PCNA和GFAP表达比较。结果脂质体介导、靶向EGFR的shRNA可显著抑制U251细胞ECFR表达,Mr兀’法分析显示psiRNA-2400转染组细胞生长抑制率为68%;与对照组和psiRNA-scr转染组比较,细胞周期分析结果表明psiRNA-2400转染组G0~G1期细胞数没有明显变化,进入s期的细胞数较对照组减少了12.7%~13%,而进入G2期细胞则增加了10.5%~11、7%。Matrigel基质生长实验显示对照组和psiRNA-scr转染组细胞呈正常形态贴壁生长,而psiRNA-2400转染组细胞不能贴壁生长,呈团块状簇集生长。裸鼠皮下荷瘤模型实验显示psiRNA-2400显著抑制皮下肿瘤生长,组织病理学分析显示治疗组EGFR表达下降、PCNA标记指数降低而GFAP表达上调。结论靶向EGFR的RNAi技术可以显著抑制U251细胞的EGFR表达,在体内外对U251细胞生长均产生明显抑制作用。因此,shRNA表达质粒介导的基因治疗可以成为胶质瘤靶向性EGFR治疗的新策略。
康春生
浦佩玉
张志勇
王广秀
贾志凡
裘明哲
周宏旭
于士柱
关键词:
表皮生长因子受体
短发夹RNA
神经胶质瘤
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