贵州省农业科技攻关项目(NY[2011-3105])
- 作品数：16 被引量：83H指数：6
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- 相关机构：贵州大学贵州省动物疫病研究室贵州省动物疫病预防控制中心更多>>
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- 应用荧光定量PCR筛选绵羊肺炎支原体最适生长培养基被引量：3
- 2013年
- 为筛选绵羊肺炎支原体(Mo)最适生长培养基,针对Mo 16S rRNA基因设计特异性引物FQs/FQa,建立可定量检测Mo 16S rRNA基因FQ-PCR方法,通过检测不同培养时间各Mo培养液中Mo Y98株核酸含量,比较Mo于不同培养基中培养特性,以筛选Mo最适生长培养基。结果,以Broth-ame与TSB1培养Mo 7,10和14 d时Mo核酸检测值较高,较Frey-ame、PPLO-ame更适合Mo生长。本研究为后续Mo生物学特性分析奠定了基础。
- 张双翔程振涛周碧君文明王开功李泽民覃岚崔亚兰王慧
- 关键词：荧光定量PCR绵羊肺炎支原体
- 山羊痘重组沙门菌S7207/pVAX1-P32疫苗株的安全性及稳定性研究被引量：1
- 2012年
- 对山羊痘重组沙门菌S7207/pVAX1-P32疫苗株的安全性、稳定性及S7207/pVAX1-P32在动物体内散布规律进行测定。选择60只小鼠,随机分为4组,1组为生理盐水对照组,2组～4组为试验组,用上述沙门菌株S7207以108、109、1010cfu的剂量口服免疫小鼠,2周后相同剂量加强免疫,通过在不同时间段称量小鼠体重显示,试验组小鼠生长情况与对照组无明显差异,不同组别小鼠大体及内脏器官也未发生病变,说明S7207/pVAX1-P32安全性良好;通过PCR方法检测P32基因在体内各组织分布情况,在7d后体内各组织中都检测出目的基因,说明DNA在小鼠体内广泛分布。体外传代含pVAX1-P32和不含pVAX1-P32菌株,含质粒菌株经60代传代后含重组质粒菌的比例在50%以上,传代至120代时仍在10%以上,而不含质粒菌株明显低于含质粒菌株,结果证明含质粒菌株稳定性较好。研究结果提示,利用减毒沙门菌为载体传递S7207/pVAX1-P32疫苗具有良好的安全性和稳定性,其质粒在小鼠体内分布广泛,对未来口服疫苗的使用提供了参考依据。
- 朱时杰周碧君文明王开功程振涛殷俊磊
- 关键词：山羊痘安全性稳定性
- 绵羊肺炎支原体贵州株16SrRNA基因的克隆与序列分析
- ：通过绵羊肺炎支原体(Mo)贵州分离株的遗传进化特征分析,为贵州省采取针对性措施防控CCPP爆发流行提供科学依据. 材料方法：采用分子克隆技术对所分离支原体进行分子鉴定,从Mo贵州分离TZ株与WN株的DNA中扩增1...
- 周碧君程振涛肖超能文明王开功张双翔陈军义江楠崔亚兰
- 关键词：绵羊肺炎支原体核糖核酸基因克隆
- 贵州省山羊流产主要病原菌分离鉴定及致病性试验被引量：2
- 2013年
- 研究了贵州省山羊流产主要病原菌的组成、分布和致病情况,为贵州省山羊流产细菌的防控提供理论参考。对贵州省6个地(州、市)10个规模养羊场91只流产山羊的胎儿、子宫与母羊的阴道棉拭子进行细菌样本的采集并分离,通过革兰氏染色和生化试验鉴定,并对山羊阴道棉拭子中分离鉴定的4种主要优势菌株作小白鼠致病性试验。在贵州省山羊生殖系统中共分离到13种(科、属)细菌共计159株,其中在流产山羊中分离到的细菌种类显著多于健康山羊;4种主要优势菌株对小鼠均存在一定致病性,对小鼠致死率高低依次为溶血巴氏杆菌、化脓链球菌、腐生葡萄球菌和大肠埃希氏菌,分别为83.3%、50%、8.3%和8.3%。
- 罗意周碧君李涛张元鑫张华王开功文明程振涛李世静
- 关键词：山羊流产主要病原菌致病性试验
- 山羊传染性胸膜肺炎并发流产病例诊断
- 为对贵州省某规模养羊场临床表现咳嗽、消瘦及流产症状病死山羊进行病因确定性诊断,采用分子生物学方法对病死山羊进行山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)病原与山羊流产衣原体核酸检测。结果,从病死母羊肺组织中检测到绵羊肺炎支原体(Mo...
- 王慧王开功张双翔周碧君文明程振涛龙冲冲尹鑫罗意
- 关键词：山羊传染性胸膜肺炎流产病例
- 文献传递
- 丝状支原体山羊亚种贵州株的分离与鉴定被引量：6
- 2013年
- 为确定贵州毕节地区某养殖场疑似山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)的病原,通过分子生物学方法对疑似CCPP山羊肺组织进行病原核酸检测,并进行病原分离及初步鉴定。结果显示:从疑似CCPP山羊肺组织中检测到丝状支原体山羊亚种(Mmc)核酸,并从肺组织中分离到具有典型煎蛋样菌落的菌株,命名为GZ-DF;分离菌株进行生化试验,结果与参考株PG3相符;同源性分析及进化树比较结果显示,分离株GZ-DF与Mmc参考株PG3(Mmc PG3)、丝状支原体大菌落型(MmmLC Y-goat)、丝状支原体小菌落型(MmmSC PG1)同源性高达99%,且与MmcPG3共同形成基因树的一个分支;动物回归试验成功复制出CCPP的典型症状和病例剖解变化。结果表明:本次疫情应为Mmc感染羊群所致,研究结果为疫情控制提供方向。
- 王慧周碧君张双翔罗成波贺纛孔令萍文明尹鑫程振涛王开功
- 关键词：山羊传染性胸膜肺炎丝状支原体山羊亚种分子生物学鉴定
- 绵羊肺炎支原体DnaK B细胞抗原表位预测及其蛋白结构分析被引量：3
- 2014年
- 以绵羊肺炎支原体(Mo)热休克蛋白Hsp70(DnaK蛋白)氨基酸序列为基础,运用DNAStar软件和在线服务器等生物信息学分析工具,在同源性分析的基础上,通过Jameson-Wolf法、Kyte-Doolittle法、Emini法、Karplus-Schulz法及Welling法分别预测其抗原指数、亲水性、柔韧性、表面可极性等参数,综合分析、预测了该蛋白的B细胞抗原表位,并进行了蛋白的二级结构预测和3D结构模拟。结果表明,Mo贵州分离株的Hsp70蛋白与其它可致羊发病支原体的Hsp70蛋白同源性较低,说明该蛋白具有良好的特异性;Mo Hsp70蛋白整体抗原性较好,同时呈现较规则的空间结构,其中以C末端较稳定,区域也最大(第394-598区段),为优势B细胞抗原表位区域。
- 王慧罗成波贺纛孔令萍周碧君文明程振涛王开功
- 关键词：绵羊肺炎支原体蛋白结构B细胞抗原表位
- 绵羊肺炎支原体热休克蛋白Hsp70的生物信息学分析被引量：6
- 2014年
- 本试验旨在了解绵羊肺炎支原体(Mo)标准Y98株Hsp70基因生物学特性,以期利用该基因表达蛋白建立ELISA方法。本研究应用DNAStar、Bioedit 7.0、ClustalX 3.0、Mega 4.0软件与Protparam、TMpred、IEDB在线工具对Hsp70蛋白的理化参数、跨膜结构、信号肽、二级结构、B细胞表位及与其他支原体Hsp70蛋白进化关系进行了比对分析。结果显示,Mo Y98株Hsp70蛋白理论分子质量为66.14ku,pI值为5.08,为稳定的可溶性蛋白。该蛋白无跨膜结构,不分泌信号肽,存在多处具有免疫原性的肽段,具有形成抗原表位的优势结构,是建立免疫学方法较为理想的靶蛋白。与多种支原体Hsp70基因进化关系分析结果表明,该蛋白与Mo进化关系最近,与丝状支原体簇成员亲缘关系较远,为进一步分析Mo致病机理提供了理论依据。
- 张双翔程振涛唐宇冉隆仲李涛周碧君文明王开功王慧
- 关键词：绵羊肺炎支原体HSP70基因生物信息学
- 山羊传染性胸膜肺炎继发流产病例的诊断被引量：1
- 2012年
- 为对贵州省某规模养羊场临床表现咳嗽、消瘦及流产症状病死山羊进行病因确定性诊断,采用分子生物学方法对病死山羊进行山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)病原与山羊流产衣原体核酸检测。结果表明,从病死母羊肺组织中检测到绵羊肺炎支原体(Mo)核酸,未检测到丝状支原体山羊亚种(Mmc)核酸,病死母羊子宫组织中山羊流产衣原体检测均为阴性,病例确诊为CCPP。序列分析显示Mo感染可能与流产症状有关。研究结果将为贵州省预控此类疫病流行暴发提供技术支持。
- 王慧王开功张双翔周碧君文明程振涛龙冲冲尹鑫罗意
- 关键词：山羊传染性胸膜肺炎流产病例
- 2012年贵州羊蓝舌病血清流行病学调查及影响因素分析被引量：11
- 2013年
- 为了解2012年贵州省各地区羊蓝舌病血清流行病学情况,以便合理进行疫病预警和防控。本研究收集2012年贵州省不同地区羊血清样本1869头份,采用ELISA方法对羊蓝舌病血清抗体进行检测,分别就不同地区、年龄阶段、性别、海拔高度及不同类型养殖模式五种因素对BTV血清抗体阳性率影响进行分析。结果显示:贵州省7个市(州)的羊群均检出BTV血清抗体阳性样本,总体阳性率为25.79%(482/1869),各地区间存在差别,以黔东南州最高,铜仁市最低,但差异不十分显著;对不同养殖模式下羊群BTV血清抗体阳性率进行比较,呈现散养户>养羊小区>规模养殖场趋势;不同年龄阶段及性别对BTV血清抗体阳性率影响不大;不同海拔高度对BTV血清抗体阳性率影响呈现一定的规律性,海拔最低处羊群阳性率较低,700m以上海拔高度的羊群BTV抗体阳性率均较高,并且随着海拔不断升高又呈现下降趋势。研究结果表明,贵州省各地区均存在BTV隐性感染风险,应根据影响因素采取合理措施进行防控。
- 王慧覃岚尹鑫周碧君文明程振涛王开功
- 关键词：蓝舌病血清流行病学调查影响因素
