国家自然科学基金(81202152)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：周美娟黄海波丁振华林志祥刘明更多>>
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- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金广东省博士启动基金更多>>
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- 紫外线B辐射敏感的miR-365在皮肤鳞癌发生中的作用研究被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨紫外线（UVB）辐射敏感miR-365在皮肤鳞状细胞癌发生中的作用，方法 取对数生长期正常人皮肤角质细胞HaCaT分为对照组和照射组,照射组给予50 J/m^2的UVB照射，照射后培养不同时间,分析miRNA的表达谱，实时荧光定量PCR分析HaCaT细胞和皮肤鳞癌细胞系A431、Tca8113和HSC-1的miR-365的表达.平板克隆形成实验和Transwell小室细胞运动实验分别检测细胞的克隆形成能力和体外运动能力，构建miR-365高表达的HaCaT细胞系HaCaT^Pre-miR-365-2.裸鼠皮下注射HaCaT^pre-miR-365-2观察其成瘤能力，结果 UVB照射后,HaCaT差异表达的miRNAs共30个,其中miR-365最敏感,且照后6h升高最明显,为对照的6.7倍;皮肤鳞癌细胞系A431、Tca8113和HSC-1的miR-365的表达均高于HaCaT细胞（P＜0.05）,其中,A431增加最多,为（15.67±1.12）倍,Tca8113最少,为（4.72 ±0.85）倍;抑制皮肤鳞癌细胞系miR-365的表达可以显著抑制其克隆形成能力（=13.68,P＜0.05）和体外细胞迁移能力（t=19.98,P＜0.05）,而提高HaCaT的miR-365的表达则可以显著提高其克隆形成能力（t=7.11,P＜0.05）和体外细胞迁移能力（t=22.03,P＜0.05）,且能够在裸鼠皮下成功地成瘤，结论 miR-365是一种皮肤鳞状细胞癌的促癌基因。
- 周美娟黄海波林志祥丁振华
- 关键词：皮肤鳞状细胞癌癌基因
- P53对MEF细胞UVB损伤中miR-465的表达的影响
- 目的研究UVB损伤时,p53对MEF细胞的miR-465表达的影响。方法实验采用野生型小鼠胚胎成纤维细胞(MEFp53+/+)和p53缺失的小鼠胚胎成纤维细胞(MEFp53-/-),首先分别验证了这两株细胞的p53蛋白表...
- 周美娟耿继武高素珍
- 文献传递
- 14-3-3σ在中波紫外线诱导的HaCaT细胞增殖和周期中的作用被引量：1
- 2016年
- 目的 初步研究14-3-3σ在中波紫外线（UVB）照射诱导的HaCaT细胞增殖和周期阻滞中的作用。方法 不同剂量UVB（0、10、20、30、40、50、60和80 mJ/cm2）照射HaCaT细胞和14-3-3σ稳定干扰细胞系（HaCaTKD14-3-3σ,以下简称HaCaTKD）。照后48 h,结晶紫染色法观察细胞生长密度。30 mJ/cm2UVB照射后,CCK-8法检测HaCaT和HaCaTKD细胞的增殖变化,流式细胞术分析细胞G2/M期细胞比例的变化,Western blot检测UVB照射后两种细胞的14-3-3σ、Cdc2、Cdc25c和Cyclin B1蛋白表达水平。结果 UVB照后48 h,两种细胞存活率均呈剂量依赖性下降,且HaCaTKD在10 mJ/cm2即可出现明显下降（t=8.83~49.63,P〈0.05）。HaCaTKD细胞的增殖能力显著低于HaCaT细胞（F=32.89,P〈0.05）;30 mJ/cm2的UVB照射后,HaCaT细胞在24 h后恢复增殖能力,但HaCaTKD细胞在72 h仍未见增殖变化。HaCaTKD细胞在各观察点G2/M期细胞比例均未改变（P〉0.05）;30 mJ/cm2UVB照射后,HaCaT细胞在6~18 h发生G2/M期阻滞（t=7.41、9.22、9.16,P〈0.05）,HaCaTKD细胞G2/M期细胞比例未发生改变（P〉0.05）。UVB照后6、12、18、24 h和照前相比,HaCaT细胞中14-3-3σ表达量上调（t=5.42~9.57,P〈0.05）;HaCaT和HaCaTKD两种细胞中的Cdc25c和Cyclin B1的表达水平在照后均下调（t=3.95~11.21,P〈0.05）;Cdc2在HaCaT细胞中下调（t=4.93~5.37,P〈0.05）,在HaCaTKD细胞中无变化（P〉0.05）。结论 UVB照射或不照射,14-3-3σ的表达情况均能影响HaCaT细胞的增殖变化和细胞周期,UVB照射能诱导HaCaT细胞发生G2/M期阻滞,这种阻滞可能是由14-3-3σ的表达所介导,进而引起周期相关蛋白Cdc2、Cdc25c和Cyclin B1的表达改变而引发的。
- 黄海波周良王同帅周美娟
- 关键词：中波紫外线增殖细胞周期
- p53、14-3-3σ、miR-365在UVB致HaCaT细胞G_2/M期阻滞中的作用被引量：1
- 2013年
- 目的:研究30mJ/cm2的UVB照射后,HaCaT细胞周期的改变及其可能机制。方法:以人永生化上皮细胞(HaCaT)为研究对象,波长305nm的UVB为干预因子,首先观察了HaCaT细胞在30mJ/cm2的UVB作用后其细胞周期的变化;其次观察了UVB照后不同时间点p53蛋白、14-3-3σ蛋白表达的改变;最后用miR-365高表达的HaCaT细胞分析了miR-365在UVB所致了的周期阻滞中的可能作用。结果:HaCaT细胞在30mJ/cm2的UVB作用后18h出现较明显的G2/M期阻滞;p53、磷酸化的p53以及14-3-3σ蛋白在UVB照射后均有明显升高;miR-365高表达的HaCaT细胞,14-3-3σ蛋白的mRNA表达下降,且在UVB照射后无明显改变。结论:30mJ/cm2的UVB照射可诱导HaCaT细胞发生G2/M期阻滞,p53、14-3-3σ、miR-365可能在其中发挥了重要作用。
- 郭院霞王颖慧李明芳刘明周美娟
- 关键词：G2M期阻滞P53
