福建省自然科学基金(2010J01221)
- 作品数:7 被引量:22H指数:3
- 相关作者:余英豪陈娟范双翼刘伟吴在增更多>>
- 相关机构:南京军区福州总医院福建省肿瘤医院更多>>
- 发文基金:福建省自然科学基金南京军区医学科学技术研究“十一五”计划课题更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- N-甲基亚硝基脲诱导小鼠胸腺淋巴瘤TCR基因重排分析被引量:1
- 2010年
- 目的探讨N-甲基亚硝基脲(MNU)诱导的小鼠胸腺淋巴瘤的单克隆起源。方法采用巢式PCR方法,对8例MNU诱导的胸腺淋巴瘤组织进行T细胞受体β链(TCRβ)和γ链(TCRγ)克隆性基因重排分析,并对TCRγ基因重排的PCR产物直接测序。结果 8例胸腺淋巴瘤检测TCRβ和TCRγ均呈克隆性基因重排。DNA序列测定证实TCRγ基因PCR扩增产物为基因重排产物。结论巢式PCR TCR基因重排检测及DNA序列分析证实,MNU诱导的小鼠胸腺淋巴瘤是来源于T细胞的肿瘤。
- 黄榕芳余英豪李博
- 关键词:胸腺T细胞受体基因重排
- N-甲基亚硝基脲诱导的胸腺淋巴瘤小鼠模型改进被引量:3
- 2010年
- 本研究的目的旨在进一步提高N-甲基亚硝基脲(MNU)诱导小鼠胸腺淋巴瘤模型的成瘤率并降低其死亡率。在前期实验的基础上,对给药方案和实验周期进行了调整。第0、4周2次给C57BL/6小鼠腹腔注射MNU诱导液,分组分剂量注射。注射后观察动物一般情况。于第24周处死全部小鼠,解剖检查胸腺肿瘤的发生及其他脏器情况,并应用病理学和免疫组织化学方法,对诱发的胸腺淋巴瘤及其侵袭脏器进行研究并鉴定肿瘤细胞来源、分型。结果表明:第25周83.3%(55/66)实验小鼠产生胸腺淋巴瘤,其中5只死亡,死亡率7.6%。结论:通过调整给药方案和实验周期后,使该模型的成瘤率从以前的67.5%提高到83.3%,死亡率从10%降低至7.6%。
- 范双翼余英豪吴在增
- 关键词:胸腺淋巴瘤动物模型N-甲基亚硝基脲
- 淫羊藿素体外抗淋巴瘤细胞增殖效应被引量:6
- 2011年
- 目的本实验以小鼠T细胞淋巴瘤细胞株EL-4细胞株为模型,研究淫羊藿素(icaritin,ICT)是否抑制瘤细胞增殖,并初步探讨其作用机制。方法应用MTT比色法、透射电镜技术及流式细胞术检测ICT对EL-4细胞增殖能力的影响;用RT-PCR技术、比色法分析ICT的作用机制。结果 ICT对EL-4细胞增殖具有明显抑制作用,并呈量效及时效关系。透射电镜及流式细胞术结果显示,ICT可诱导EL-4细胞凋亡。RT-PCR显示,ICT作用于EL-4细胞后,bcl-2、P21基因的mRNA表达下调,Caspase-3、Caspase-9酶活性显著增强。结论 ICT可抑制体外培养的小鼠T淋巴瘤EL-4细胞的增殖并诱导其凋亡,可能系通过下调bcl-2、P21 mRNA表达,激活Caspase-3、Caspase-9蛋白等途径实现的。
- 范双翼余英豪
- 关键词:EL-4细胞增殖凋亡
- 转染MIP-1α和B7-1基因增强小鼠的抗淋巴瘤效应被引量:1
- 2013年
- 目的观察转染趋化因子MIP-1α和共刺激分子B7-1基因增强小鼠抗淋巴瘤的效应。方法将MIP-1α和B7-1基因慢病毒重组载体转染小鼠EL-4淋巴瘤细胞,应用RT-PCR检测MIP-1α和B7-1基因mRNA表达,Western blot法检测MIP-1α和B7-1蛋白表达;转基因EL-4细胞注入小鼠右腋皮下,观察成瘤情况;灭活的转基因EL-4细胞注入成瘤小鼠体内,观察其增强小鼠抗淋巴瘤效应。结果 RT-PCR检测发现EL-4/MIP-1α+B7-1细胞内有MIP-1α及B7-1mRNA表达,Western blot显示MIP-1α及B7-1蛋白表达;MIP-1α组、B7-1组较对照组成瘤时间延长,成瘤率降低,肿瘤平均体积较小,而联合组成瘤性消失;MIP-1α和B7-1治疗组的肿瘤平均体积、重量及肿瘤器官转移率明显小于对照组(P<0.05),而联合组的肿瘤平均体积及重量明显小于MIP-1α和B7-1组(P<0.05),而且联合组小鼠平均生存期,均较单基因组、对照组明显延长(P<0.05)。结论转染MIP-1α和B7-1基因能够明显增强小鼠机体抗淋巴瘤效应,明显延长荷瘤小鼠的平均生存期,为淋巴瘤的基因治疗提供了新的思路。
- 刘伟余英豪
- 关键词:淋巴瘤
- 破壁灵芝孢子粉对小鼠T细胞淋巴瘤细胞抑制作用被引量:3
- 2011年
- 目的 研究灵芝孢子粉在体内、外对小鼠T细胞淋巴瘤细胞生长的抑制作用.方法 运用噻唑蓝(MTT)法研究灵芝孢子粉在体外对EL-4细胞的抑制作用;建立MNU诱导小鼠胸腺T细胞淋巴瘤的裸鼠移植瘤模型,利用裸鼠移植瘤研究灵芝孢子粉对胸腺T细胞淋巴瘤细胞的抑制作用,HE染色观察淋巴瘤组织结构的改变.结果 灵芝孢子粉对EL-4细胞的IC50值随作用时间增加而减小,72 h达到最低,为4.76 g/L.体内抑瘤试验显示,灵芝孢子粉剂量为4 g/kg时,抑制率为45.8%,镜下观察,灵芝孢子粉高剂量治疗组肿瘤坏死区域较大,核碎屑、细胞固缩较多.结论 高浓度及高剂量的灵芝孢子粉具有抑制肿瘤细胞生长的作用.
- 陈娟余英豪
- 关键词:灵芝孢子粉T细胞淋巴瘤EL-4细胞裸小鼠
- 重组表达小鼠MIP-1α和B7-1基因的慢病毒载体的构建及鉴定被引量:2
- 2012年
- 目的构建重组表达小鼠MIP-1α和B7-1基因的慢病毒载体,为淋巴瘤基因治疗的实验研究奠定基础。方法设计引物扩增获得目的基因小鼠MIP-1α和B7-1基因的全长编码序列cDNA,将目的基因与经酶切线性化的慢病毒载体进行定向连接,其产物转化感受态细胞,对长出的阳性克隆进行PCR鉴定和直接测序序列分析。MIP-1α和B7-1目的基因质粒转染293T细胞,观察绿色荧光蛋白(GFP)表达,采用Western Blot法检测其蛋白表达,实时荧光定量PCR,检测慢病毒浓缩液的滴度。结果成功构建了重组表达小鼠MIP-1α和B7-1基因的慢病毒载体,实时荧光定量PCR证实MIP-1α、B7-1基因重组慢病毒载体的滴度均达2.00E+8 TU/mL。结论本研究成功构建并包装出高滴度的小鼠MIP-1α和B7-1基因重组慢病毒载体,为淋巴瘤基因治疗的实验研究奠定了基础。
- 刘伟余英豪
- 关键词:慢病毒载体293T细胞B7-1基因淋巴瘤
- 破壁灵芝孢子粉对裸鼠移植性淋巴瘤生长的抑制作用被引量:8
- 2012年
- 本研究通过N-甲基亚硝基脲诱导小鼠胸腺T细胞淋巴瘤模型,研究灵芝孢子粉对裸鼠移植性淋巴瘤生长的抑制作用,并初步探讨其抑瘤机制。应用透射电子显微镜观察淋巴瘤组织细胞的凋亡,用RT-PCR检测肿瘤组织中Bax、Bcl-2、Bcl-xl mRNA表达水平。结果表明,灵芝孢子粉4 g/kg(ig,每日1次,连续21 d)组肿瘤抑制率为45.8%。透射电子显微镜检结果显示,灵芝孢子粉可诱导淋巴瘤细胞凋亡。RT-PCR显示,灵芝孢子粉4 g/kg组BaxmRNA表达明显上调,Bcl-2、Bcl-xl mRNA表达稍下调。结论:灵芝孢子粉具有抑制肿瘤细胞生长的作用,并可诱导淋巴瘤细胞凋亡,其机制可能与上调Bax mRNA,下调Bcl-2、Bcl-xl mRNA表达有关。
- 陈娟余英豪
- 关键词:灵芝孢子粉T细胞淋巴瘤