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国家科技重大专项(2008ZXlO003-003q)

作品数:1 被引量:9H指数:1
相关作者:陆俊梅胡忠义杨华张丽婷王洁更多>>
相关机构:山西省临床检验中心同济大学更多>>
发文基金:上海市科学技术委员会资助项目国家科技重大专项更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇噬菌体
  • 1篇肽库
  • 1篇细菌
  • 1篇细菌噬菌体
  • 1篇结核
  • 1篇结合肽
  • 1篇菌体
  • 1篇分枝杆菌
  • 1篇杆菌

机构

  • 1篇同济大学
  • 1篇山西省临床检...

作者

  • 1篇李连青
  • 1篇刘忠华
  • 1篇崔振玲
  • 1篇杨焕森
  • 1篇王洁
  • 1篇张丽婷
  • 1篇杨华
  • 1篇胡忠义
  • 1篇陆俊梅

传媒

  • 1篇中华结核和呼...

年份

  • 1篇2011
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
结核分枝杆菌H37Rv结合肽的筛选研究被引量:9
2011年
目的应用噬菌体展示随机7肽文库,筛选MTB标准株H37Rv的结合肽,并初步鉴定其与MTB的结合能力。方法以H37Rv灭活菌体为靶分子,应用噬菌体展示随机7肽文库进行筛选,并于第2~4轮的筛选中加入耻垢分枝杆菌灭活菌体进行反筛,经4轮生物淘选后,随机选取单噬菌体进行测序,间接酶联免疫吸附测定(ELISA)法鉴定阳性克隆。将亲和性最强的阳性单噬菌体所展示的短肽进行体外合成及荧光标记,观察其与16种分枝杆菌标准株及3种非分枝杆菌(铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌)的结合活性。结果通过4轮生物淘选,能与靶分子特异性结合的噬菌体得到明显富集。单噬菌体测序分析共获得5种共同序列。间接ELISA检测出5个单噬菌体均为阳性克隆,其中单噬菌体H8与H37Rv及耻垢分枝杆菌的亲和性均较强。荧光显微镜下观察到,荧光标记H8可与H37Rv结合,与包括耻垢分枝杆菌在内的其他15种分枝杆菌有一定亲和力,而与3种非分枝杆菌均不结合。结论利用噬菌体展示随机肽库技术淘选可获得MTB标准株H37Rv的结合肽,与MTB的结合活性及特异度较高,这为以标记肽为基础探索新的MTB体外检测方法提供了思路。
杨华张丽婷李连青杨焕森刘忠华崔振玲王洁陆俊梅胡忠义
关键词:分枝杆菌结核肽库细菌噬菌体
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