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基因重组神经营养蛋白-3的生物学活性: 1999年; 目的 :测定NT -3cDNA/CHO细胞表达的基因重组NT -3的生物学活性。方法 :体外培养 8日龄鸡胚背根神经节 (DRG) ,加入条件培养基 ,测量背根节神经突起生长的长度。结果 :NT -3cDNA/CHO细胞培养 4 8h后的无血清条件培养基 1∶2 4稀释后即能促进DRG神经突起的生长 ;随着其中NT -3浓度增加 ,神经突起长度也逐渐延长 ,有明显的量效关系 ;DRG培养 4 8h长出的神经突起与 2 4h相比 ,明显长而致密 ;NT -3生物活性的EC50 值为1 6.7ng/ml;NT -3浓度为 1 2 5ng/ml时 ,神经突起的长度达到最大值 ;NT -3cDNA/CHO细胞培养 72h的条件培养基中NT -3的活性高于培养 4 8h的条件培养基 ;NT -3单克隆抗体 3W 3的浓度为 0 .5μg/ml即能抑制NT -3的生物活性 ;抗体浓度为 1 μg/ml时 ,NT -3的生物活性降低一半。结论 :基因重组NT; 季爱民舒斯云李明秦建强邹恒琴张忠义; 关键词：基因重组生物活性

双位酶免疫法测定NT-3cDNA-CHO细胞上清中rNT-3含量: 1999年; 目的：定量测定ＮＴ３ｃＤＮＡＣＨＯ细胞培养上清中基因重组ＮＴ３的含量。方法：利用ＮＴ３的ＭｏＡｂ，建立了双位ＥＩＡ法。结果：该法检测限为５．０ｐｇｍｌ，批内差的变异系数为６．２％～１１．４％（ｎ＝６），批间差变异系数为５．４％～８．２％（ｎ＝６）。４株阳性细胞培养上清中有高水平的目的产物。结论：该ＥＩＡ法简单准确；用该法成功筛选到一最高表达基因重组ＮＴ３的单克隆细胞株。; 季爱民李梅张忠义邹恒琴

基因重组神经营养蛋白-3在中国仓鼠卵巢细胞中的表达: 1999年; 建立了能表达基因重组NT 3的中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞系 ;通过Southernblot分析表明克隆细胞染色体中有明显的NT 3基因插入 ;用DotELISA和Westernblot实验证实了目的蛋白的表达及其分子量约为 1 4ku .利用EIA方法测定了阳性细胞株表达NT 3的量平均为 2 1 0 0ng/( 1 0 6细胞·48h) ;rNT 3可促进鸡E8背根神经节神经突起生长 ,其长度与rNT 3浓度有明显的量效关系 ;rNT 3的EC5 0 值为 1 6 .7ng/mL ;单克隆抗体 3W3可中和所表达的rNT 3的生物活性 .; 季爱民舒斯云李明包新民邹恒琴张忠义; 关键词：CDNA 基因重组卵巢细胞

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广东省自然科学基金(960364)