国家自然科学基金(30871167)
- 作品数：23 被引量：64H指数：4
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- 舒洛地特对糖尿病高血压大鼠足细胞podoealyxin表达的影响被引量：25
- 2009年
- 目的研究舒洛地特对糖尿病高血压大鼠的肾脏保护作用和足细胞podocalyxin（PCX）表达的影响。方法链脲佐菌素（STZ）注射后，醋酸脱氧皮质酮（DOCA）＋盐建立糖尿病高血压大鼠模型。设对照组（CTL组）、模型组（STZ＋DOCA组）、舒洛地特治疗组（GAG组）和舒洛地特＋替米沙坦治疗组（GAG＋ARB组），每组各6只大鼠。于建模后0、2、4、6和8周测尾动脉压、尿白蛋白和8周末尿N-乙酰-β-葡萄糖苷酶（NAG）。8周末取血检测胰岛素、血肌酐（Scr）、胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、Na^＋、K^＋。HE、PAS染色观察病理改变和。肾小球正切面足细胞计数。免疫组织化学检测podocalyxin在肾小球表达和分布。RT—PCR和Western印迹法检测podocalyxinmRNA和蛋白表达。结果（1）GAG＋ARB组4周末血压显著低于STZ＋DOCA组和GAG组（P〈0．05）。GAG组和GAG＋ARB组TG、TC和胰岛素与STZ＋DOCA组差异无统计学意义。（2）6周末GAG＋ARB组尿白蛋白量显著低于STZ＋DOCA组[（52．9±7．6）mg／24h比（102．2±6．9）mg／24h，P〈0．05]；8周末GAG组和GAG＋ARB组尿白蛋白量均显著低于STZ＋DOCA组（P〈0．05），而GAG＋ARB组尿白蛋白量显著低于GAG组[（33．8±6．8）mg／24h比（85．2±8．7）mg／24h，P〈0．05]。GAG＋ARB组和GAG组尿NAG均显著低于STZ＋DOCA组（P〈0．05）。（3）GAG组和GAG＋ARB组肾小球硬化指数（GSI）和间质纤维化指数（IF）均显著低于STZ＋DOCA组（P〈0．05），各组肾小球正切面足细胞数差异无统计学意义。（4）与STZ＋DOCA组相比，GAG组PCXmRNA和蛋白表达显著增加，而GAG＋ARB组PCX表达显著高于GAG组。结论舒洛地特可通过增加足细胞podocalyxin表达，减轻糖尿病高血压大鼠蛋白尿和病理损伤，与替米沙坦联用有叠加作用。
- 梁伟余碧影丁国华李珍杨红霞
- 关键词：足细胞舒洛地特替米沙坦PODOCALYXIN
- 糖尿病大鼠肾脏肾素及其受体表达改变被引量：2
- 2010年
- 目的研究链脲佐菌素糖尿病大鼠肾脏肾素及肾素受体表达变化情况。方法 12只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(N组)、糖尿病组(DM组)。大鼠左下腹腔注射链脲佐菌素(STZ)60mg/kg建立糖尿病模型。测定第4、8周尿蛋白。8周后心脏取血检测血糖、血肌酐、血钠、血钾;取肾脏行PAS染色观察病理改变;免疫组化检测肾脏肾素和肾素受体表达水平;RT-PCR检测肾脏肾素和肾素受体mRNA表达水平。结果 DM组4周始相同时间段尿蛋白较N组升高(P<0.01),8周时DM组24h尿蛋白较N组明显升高(P<0.01);DM组8周时肾小球损伤指数明显高于N组(P<0.05);免疫组化和RT-PCR检测显示DM组肾素表达较N组明显升高(P<0.05),而肾素受体表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论肾脏肾素表达增加可能参与糖尿病肾脏早期损伤。
- 高召任志龙丁国华梁伟杨红霞
- 关键词：糖尿病肾病肾素
- 舒洛地特对糖尿病高血压大鼠肾脏单核细胞趋化蛋白1表达的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨糖尿病高血压大鼠肾脏单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）表达变化及舒洛地特对MCP-1表达的影响。方法18只Wistar大鼠随机分为3组：对照组（C组）、糖尿病高血压组（D组）、舒洛地特治疗组（s组），每组各6只。采用链脲佐菌素（STZ）＋醋酸脱氧皮质酮（IX）CA）＋盐水建立糖尿病高血压大鼠模型。第8周测定尾动脉压、尿白蛋白。于第8周末处死动物，PAS染色观察肾小球病理改变，免疫组织化学法及逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测MCP-1蛋白及mR—NA表达改变。结果第8周末D组尿白蛋白量及肾组织MCP-1表达显著高于C组（P〈0．05），S组尿白蛋白量及肾组织MCP-1表达较D组降低（P〈0．05）。结论舒洛地特可通过降低。肾组织MCP-1表达，减轻糖尿病高血压大鼠病理损伤。
- 胡凤琪丁国华梁伟余碧影杨红霞
- 关键词：糖尿病肾脏病单核细胞趋化蛋白1
- 血管紧张素Ⅱ对足细胞nephrin磷酸化水平的影响被引量：6
- 2012年
- 目的通过建立血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）输注大鼠模型及体外足细胞培养，观察AngⅡ刺激对足细胞nephrin磷酸化水平的影响。方法30只SPF级Wistar大鼠皮下埋置渗透性微泵，随机分为AngⅡ组（AngⅡ400ng·kg-1·min-1，n=12）、替米沙坦（Tel）组（AnglI＋Tel3mg·kg-1·d-1，n=12）和正常对照组（生理盐水代替AngⅡ，n=6），于实验0、7、14、21、28d测量大鼠尾动脉收缩压，收集24h尿液，检测尿白蛋白。分别在14、28d处死动物，收集血液标本，检测血肌酐；收集肾脏标本，透射电镜观察肾小球足细胞形态，放免法检测血浆及肾组织AngⅡ水平；Western印迹检测nephrin表达及其磷酸化水平。体外培养小鼠永生化足细胞，AngⅡ（10μmol／L）刺激不同时间，并行洛沙坦（10μmol／L）干预，Western印迹法检测足细胞nephrin表达及其磷酸化水平。异硫氰酸荧光素（FITC）．鬼笔毒环肽（phalloidin）染色标记足细胞F-actin，用外周F—actin环评分系统（CFS）半定量分析足细胞骨架运动。结果（1）与正常对照组同时间点相比，AngⅡ组大鼠自7d起尾动脉收缩压开始升高（P〈O．05），随着作用时间的延长，血压持续升高。AngⅡ输注7d大鼠开始出现蛋白尿，并持续增加。各组大鼠血肌酐、尿肌酐及内生肌酐清除率无明显变化。AngⅡ输注大鼠血浆及肾组织AngⅡ浓度明显增高（均P〈0．05）。（2）与正常对照组相比，AngⅡ输注组大鼠肾小球足细胞nephrin表达明显减少，其磷酸化水平亦显著下降（P〈0．05）。（3）与正常对照组相比，AngⅡ刺激早期（3～6h），足细胞nephrin磷酸化表达即明显下调（P〈0．05），刺激12—24h维持低水平表达。（4）AngⅡ刺激后，F-actin排列紊乱，逐渐向细胞外周分布形成F-actin环，CFS评分显著高于正常对照组（P〈0．05）。结论正常状态下足细胞nephrin维持一定水平磷酸化状态，An
- 任志龙梁伟丁国华陈铖周敏徐婉杨红霞
- 关键词：足细胞
- AngⅡ对肾小球足细胞nephrin表达的影响及其机制
- 2009年
- Nephrin是特异表达于肾小球足细胞及裂孔膜上的结构和功能蛋白，Nephrin的正常表达与定位对于维持肾小球持滤过屏障结构和功能的完整性、防止蛋白尿的发生具有重要作用。AngⅡ在肾脏局部水平的升高可以影响Nephrin的表达，破坏足细胞的正常结构和功能，并导致蛋白尿的产生。
- 任志龙(综述丁国华
- 关键词：肾小球免疫球蛋白类
- 小凹蛋白-1在血管紧张素Ⅱ输注大鼠模型肾小球中表达及意义
- 2011年
- 目的观察血管紧张素Ⅱ输注大鼠模型肾小球小凹蛋白-1表达及分布，探讨小凹蛋白-1在肾小球损伤中的作用。方法18只雄性Wistar大鼠皮下埋置渗透性微泵，随机分为3组。A组为正常对照组，由生理盐水代替血管紧张素Ⅱ。B组用血管紧张素Ⅱ以400ng·kg^-1·min^-1持续输注28d。C组在B组基础上加用替米沙坦3mg·kg^-1·d^-1进行干预。每周末测量尾动脉收缩压、24h尿白蛋白定量，于28d处死大鼠。心脏采血，检测血肌酐。留取肾组织，光镜、电镜下观察肾组织病理学改变。免疫组织化学法、免疫荧光分别检测肾小球小凹蛋白-1表达及小凹蛋白-1磷酸化水平。结果（1）血管紧张素Ⅱ输注后，大鼠血压逐渐升高，尿蛋白持续增加，肾小球系膜区增生加重，替米沙坦治疗可以明显降低血压和减少尿蛋白，减轻肾小球系膜区增生。（2）血管紧张素Ⅱ输注大鼠肾小球小凹蛋白-1表达无明显改变，但其磷酸化水平明显增高，替米沙坦干预后小凹蛋白-1磷酸化水平明显降低。结论小凹蛋白-1在血管紧张素Ⅱ诱导肾损伤中可能发挥重要作用。
- 周敏王志龙梁伟陈铖丁国华
- 关键词：肾小球
- 醛固酮对肾小球系膜细胞凋亡的影响被引量：3
- 2011年
- 目的研究醛固酮（Aid）对大鼠肾小球系膜细胞（MC）凋亡的影响并探讨其可能机制。方法24只SPF级SD大鼠，腹腔埋置渗透性微泵，随机分为对照组（Con组，生理盐水代替Ald处理28d；n=8）、Ald输注组（Ald组，1．5μg／h，28d；n=8）、依普利酮干预组（Epl组，Ald 1．5μg／h＋依普利酮100mg·kg^-1·d^-1，28d；n=8）。药物处理0d、7d、14d、21d、28d时，分别测量大鼠尾动脉收缩压并收集24h尿液，测定尿白蛋白排泄率（UAER）；于28d时心脏采血并分离大鼠双侧肾脏，检测血肌酐、血钾及血Ald水平；PAS染色观察肾小球病理改变；TUNEL法检测MC凋亡。体外培养大鼠MC，Annexin V—PI双染流式细胞仪检测MC凋亡；实时定量PCR检测Bcl-2、Bax mRNA表达，Western印迹检测Bad磷酸化水平。结果Ald组大鼠血压及UAER自7d时起显著高于同期Con组（P〈0．05），28d时Ald组大鼠血浆Ald水平约为Con组的6倍（P〈0．05），血钾显著低于Con组（P〈0．05），血肌酐与Con组差异无统计学意义（P〉0．05）。PAS染色显示Ald组大鼠肾小球系膜区增宽，基质增多，部分出现节段硬化。TUNEL检测发现，Ald组大鼠MC凋亡显著高于Con组及Epl组（均P〈0．05）。体外实验发现，随着Ald作用时间的延长，MC凋亡数明显增加（P〈0．05）；Aid组Bcl-2mRNA表达下降（P〈0．05），Bax mRNA表达升高（P〈0．05）；Ald组Bad蛋白磷酸化水平显著低于Con组（P〈0．05）。依普利酮能显著逆转Ald诱导的上述作用。结论Ald能促进大鼠MC凋亡，依普利酮干预可以明显降低Ald的促凋亡效应。Bad蛋白的去磷酸化作用可能是Ald致MC凋亡过程中的重要环节。
- 任志龙梁伟丁国华胡凤琪杨红霞
- 关键词：醛固酮系膜细胞细胞凋亡
- ACE2在早期糖尿病大鼠肾脏的表达及意义
- 2009年
- 目的观察早期糖尿病大鼠肾脏血管紧张素转化酶2（ACF2）的表达改变。方法链脲佐菌素（STZ）注射建立1型糖尿病大鼠模型，正常对照组和糖尿病组各6只动物，于建模后0、2、4、6和8周测尾动脉压、尿白蛋白，8周末取血检测胰岛素、血肌酐（SCr）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、血钠和血钾。免疫组织化学染色检测ACE2在肾脏的表达和分布；RT-PCR检测肾脏中ACE2及ACE mRNA表达水平。结果①8周末糖尿病组血压高于正常组（P〈0．05），2周末始糖尿病组尿蛋白高于正常组（P〈0．05），8周末糖尿病组TG较正常组明显增高（P〈0．05），SCr、血钾及血钠无明显差异（P〉（0．05）；②糖尿病组肾小球ACE2蛋白表达低于正常组，而肾小管ACE2显著高于正常组；糖尿病组ACE mRNA高于正常组（P〈0．05），而ACE2 mRNA与正常组无明显差异（P〉0．05）。结论ACE2较ACE的相对降低参与早期糖尿病肾脏的进展。
- 黄云芳梁伟丁国华杨红霞
- 关键词：血管紧张素转化酶2血管紧张素转化酶
- 依普利酮对醛固酮输注大鼠肾脏肾素受体表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨依普利酮(Epl)对醛固酮(ALD)输注大鼠肾脏肾素受体表达的影响。方法:18只SD大鼠随机分为3组:对照组、ALD输注组、Epl治疗组,均皮下埋置渗透性微泵,其中ALD输注组、Epl治疗组持续输注ALD(1.5μg·h^(-1)),Epl治疗组同时给予依普利酮(100mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃,对照组、ALD输注组以等量生理盐水灌胃。隔周测量尾动脉压,收集24h尿液测定尿白蛋白排泄率(UAER),于第28天处死动物。PAS染色观察肾组织病理改变,RT-PCR法检测肾素受体表达,免疫组化染色检测肾素受体表达。结果:ALD输注组大鼠血压、UAER较对照组显著升高(P<0.05),Epl治疗组大鼠血压、UAER显著低于ALD输注组(P<0.05);ALD输注组大鼠肾小球系膜细胞增殖伴系膜外基质增多,Epl治疗组肾小球病理变化较ALD输注组显著减轻;肾素受体主要分布于肾小球系膜细胞,Epl治疗组肾素受体mRNA显著低于ALD输注组(P<0.05)。结论:依普利酮能显著减少ALD输注大鼠肾脏肾素受体表达,减轻ALD诱导的大鼠肾脏损伤。
- 易家志梁伟丁国华杨红霞
- 关键词：依普利酮醛固酮
- 替米沙坦对糖尿病大鼠肾脏缺氧诱导因子1α表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察糖尿病肾脏病大鼠肾脏缺氧诱导因子1α（HIF-1α）表达变化及替米沙坦对其表达的影响。方法18只雄性Wistar大鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病。肾脏病模型，随机分为对照组（A组）、糖尿病肾脏病组（B组）和替米沙坦治疗组（C组）。C组给予替米沙坦（5mg·kg^-1·d^-1）灌胃8周。建模成功后第8周末检测各组大鼠24h尿蛋白定量；心脏采血，留取血标本测血糖、血肌酐、血钠、血钾。PAS染色观察肾脏病理改变。免疫组织化学检测各组HIF-1α蛋白在肾脏组织中的表达和分布；RT-PCR检测各组大鼠肾脏组织中HIF-1αmRNA水平。结果①第8周末B组大鼠24h尿蛋白定量较A组显著升高（P〈0．05），C组24h尿蛋白定量较B组明显降低（P〈0．01）。②B组第8周末肾间质损伤指数明显高于A组（P〈0．05），而C组则低于B组（P〈0．05）。③免疫组织化学显示HIF-1α主要表达于肾小管细胞胞浆和胞核，肾小球系膜细胞可见少量表达。与A组比较，B组HIF-1α蛋白及mRNA水平显著升高（P〈0．05），而C组与B组相比显著降低（P〈0．05）。结论糖尿病肾脏病大鼠存在缺氧状态，替米沙坦通过减轻肾小管细胞HIF-1α表达，从而减轻肾脏病变。
- 武丽娟张静静胡凤琪梁伟陈铖丁国华
- 关键词：糖尿病肾脏病替米沙坦缺氧诱导因子1Α
