国家科技重大专项(2009ZX10602-02)
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
- 相关作者：杨泽莫秋华董瑞玲李政良胡孔新更多>>
- 相关机构：南方医科大学中国检验检疫科学研究院珠海出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项珠海市软科学研究计划项目深圳出入境检验检疫局博士基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于同源加尾系统的4种腹泻病毒的多重RT-PCR检测方法被引量：5
- 2013年
- 目的针对轮状病毒、诺如病毒、星状病毒和扎如病毒四种常见腹泻病毒,建立基于同源加尾(Homo-Tag AssistedNon-Dimer,HAND)系统的一步法四重RT-PCR检测方法。方法根据4种病毒基因组保守序列设计引物并在5'端加上同源尾巴序列。通过优化通用尾巴引物和特异性加尾引物的浓度等PCR参数构建四重RT-PCR反应体系,并系统评价其稳定性、特异性和灵敏度。结果成功建立基于HAND系统的4种腹泻病毒一步法多重RT-PCR检测方法。特异性分析显示四种病毒间无交叉反应,灵敏度分析显示轮状病毒、诺如病毒、星状病毒和扎如病毒的检测下限分别达到48、9.6、1.92和48 pg。结论所建立的基于HAND系统的4种腹泻病毒多重RT-PCR检测方法简便快速、灵敏特异稳定、成本低廉,非常适用于基层医学实验室。
- 滕勇勇莫秋华王琪唐明慧赵德坚谭华涂承宁杨泽陈清孙虹
- 关键词：多重RT-PCR轮状病毒诺如病毒星状病毒
- 三种实时荧光RT-PCR试剂在检测甲型H1N1流感病毒中的应用被引量：2
- 2010年
- 〔目的〕结合WHO公布的甲型H1N1流感病毒的检测引物和探针,探索合适的实时荧光RT-PCR试剂应用于国境口岸甲型H1N1流感病毒疑似标本的检测。〔方法〕通过对连续梯度稀释阳性对照品进行检测,从而分析AB AgPath-ID、Qiagen QuantiTect和Takara One Step PrimeScript 3种常用实时荧光RT-PCR试剂的灵敏度、信号强度、反应效率等因素。〔结果〕3种试剂的检测下限均为1:1000倍稀释阳性对照品;AB AgPath-ID、Qiagen QuantiTect和Takara One Step PrimeScript检测的线性斜率分别为-5.517、5.214和-4.600;信号强度上Qiagen QuantiTect相对于其他2种明显偏弱。〔结论〕为国境口岸输入性甲型H1N1流感病例的检测和监控提供了有力的技术保障。
- 黄宗炎朱玉兰刘胜牙王佃鹏高朝贤董瑞玲黄彤文李政良胡孔新
- 关键词：实时荧光RT-PCR甲型H1N1流感病毒灵敏度
- 珠海市冬春季节儿童病毒性腹泻的流行病学特征被引量：5
- 2013年
- 目的探讨珠海市冬春季节儿童诺如病毒（NV）、扎如病毒（sV）和星状病毒（AstV）等3种重要病毒性腹泻的流行病学特征。方法采集2009年11月21日至2010年4月3日在珠海市妇幼保健院就诊的腹泻儿童粪便样本，选取轮状病毒和腺病毒筛查阴性的样本，采用逆转录-聚合酶链反应（RT．PCR）技术检测NV、SV和AstV的特异基因片段，并对诺如病毒检测阳性的样本进行分子分型。结果3种病毒季节总检出率为21．49％，其中2009年12月的检出率最高，为29．05％，而2010年2月检出率最低，为12．20％，87．96％的阳性样本来自0—30月龄患儿。NV、SV及AstV的季节检出率分别为14．70％、2．75％和4．04％，3种病毒中以NV和SV各月份阳性检出率差别较大，而AstV较为一致，12—18月龄患儿NV检出率最高（34．09％），60～120月龄患儿sV检出率最高（12．5％），24～30月龄患儿AstV检出率最高（16．67％）。诺如病毒经分子分型后均为GII型。结论NV是引起2009年冬春季节珠海市儿童病毒性腹泻的主要病原之一，SV与AstV也是重要的病原，应加强对婴幼儿NV、SV和AstV等3种重要病毒性腹泻的监测和防控工作。
- 刘亚巍王万山莫秋华杨泽杜田
- 关键词：诺如病毒流行病学
- 2009—2010年珠海口岸入境人员中发热病例流感病毒分子流行病学研究被引量：3
- 2012年
- 目的研究2009甲型H1N1流感疫情全球大流行期间珠海口岸入境发热旅客流感病毒的分子流行病学特征。方法选择2009年5月至2010年4月经珠海各口岸入境的976例发热旅客(体温≥37.5℃)为研究对象,采集咽拭子样本并提取病毒核酸,采用3个多重RT-PCR实验进行甲型、乙型和2009新甲型H1N1流感病毒的筛查以及甲型流感病毒的分子分型检测。此外,随机选择8株2009甲型H1N1流感病毒进行HA和NA基因全长RT-PCR扩增和序列分析。采用SPSS17.0软件对流行病学和实验数据进行统计学分析。结果976例发热旅客中检出流感病毒阳性病例331例,其中甲型流感占96.98%(321/331),乙型流感占3.02%(10/331);321例甲型流感病毒分子分型结果为新甲型H1N1流感92例,占28.66%,人季节性H1N1流感65例,占20.25%,人季节性H3N2流感164例,占51.09%。序列分析显示珠海口岸输入性新甲型H1N1流感病毒的HA和NA基因与甲型流感典型毒株A/California/04/2009(H1N1)的同源性分别达到99.86%和99.89%。结论本研究所阐明的珠海口岸流感病毒的分子流行病学特征对于指导国境口岸流感的防控具有重要参考价值。
- 莫秋华谭华林继灿刘志明杜田史咏梅涂承宁叶立青安胜利杨泽
- 关键词：流感流感病毒甲型H1N1流感分子流行病学
- 2009年深圳口岸甲型H1N1流感疫情早期监测结果分析
- 2011年
- 目的分析2009年深圳口岸甲型H1N1流感疫情暴发早期监测的结果,阐明甲型H1N1病毒的传入特征。方法对深圳罗湖、福田地铁、深圳湾、皇岗、蛇口、文锦渡、大铲湾、机场、沙头角9个国境口岸出入境人员实行流感监测,对监测到的流感样病例采集咽拭子标本,并进行流行病学调查。运用WHO推荐的甲型H1N1实时荧光RT-PCR技术检测流感样病例的咽拭子标本。结果 2009年5月4日—2009年7月31日,深圳罗湖、福田地铁、深圳湾、皇岗、蛇口、文锦渡、大铲湾、机场、沙头角9个口岸监测到的流感样病例为2341份,其中,246份流感样病例的咽拭子标本中甲型流感病毒核酸检测阳性,检出率为10.51%;89份流感样病例的咽拭子标本中新型甲型H1N1流感病毒核酸检测阳性,检出率为3.80%。89份新型甲型H1N1流感病例中,男性54例,占60.67%,女性35例,占39.33%。早期病例年龄构成以50岁以下人群为主,其中,6～34岁人群最多,占总病例数的79.78%。89份甲型H1N1流感病例均为输入性病例。结论新型甲型H1N1流感疫情早期,深圳国境口岸监测到的输入性病例,从2009年5—7月,甲型流感病毒和新型甲型H1N1流感病例的检出率具有显著增加的趋势。
- 刘胜牙朱玉兰李政良甄胜西黄彤文胡孔新叶健忠董瑞玲
- 关键词：甲型H1N1流感国境
- 2012—2013年供澳门水产品中致病性弧菌污染状况调查被引量：6
- 2015年
- 目的 了解供澳门水产品中致病性弧菌的污染状况和三间分布。方法 2012年8月—2013年7月,采用随机抽样的方法收集珠海、中山两地的供澳水产品样品1 510份,利用基于HAND系统多重PCR方法初筛后采用常规分离培养和生化鉴定验证,分析其污染状况,季节性、地域性以及水产品种类的分布。结果 供澳水产品样品中弧菌阳性率为59.5%（898/1 510）,复合感染率为37.3%（563/1 510）。一年中的5~11月份致病性弧菌总阳性率较高,1月和12月阳性率较低,差异有统计学意义（P〈0.05）。珠海地区致病性弧菌总阳性率（69.5%）高于中山（51.9%）,差异有统计学意义（P〈0.05）。贝类的致病性弧菌总阳性率（70.6%）高于鱼类（54.4%）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 供澳门水产品中致病性弧菌污染现象严重,需加大致病性弧菌的监测力度,以防致病性弧菌的感染和流行。
- 滕勇勇莫秋华王琪唐明慧吴雷姚月娴陈惠芳杨泽陈清孙虹
- 关键词：水产品食源性致病菌致病性弧菌污染食品安全
- 甲型H1N1流感双重荧光PCR快速筛查方法的研究
- 2010年
- 目的优化一种甲型H1N1流感的双重荧光PCR快速筛查方法。方法根据WHO推荐的甲型H1N1流感检测方案合成、标记引物和探针。通过改进反应条件与参数,优化了甲型H1N1流感的双重荧光PCR检测方法。结果该方法敏感度高,特异性强,重复性好。应用该方法检测患者实际样品,结果与WHO推荐方法的检测结果一致;应用该法可在4h内完成对样品中甲型H1N1流感的检验。结论本研究优化的甲型H1N1流感的双重荧光PCR快速筛查方法可用于甲型H1N1流感的诊断。
- 王佃鹏朱玉兰李政良刘胜牙董瑞玲黄宗炎高朝贤胡孔新
- 关键词：甲型H1N1流感
