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运用Cox-Staurt趋势检验分析医院感染铜绿假单胞菌耐药趋势被引量：4: 2011年; 目的研究医院感染铜绿假单胞菌流行病学特征和耐药趋势。方法采用VITEK-2Compact自动化微生物分析系统对2008-2010年医院感染患者送检标本进行细菌鉴定和耐药性检测,并用Cox-Staurt趋势检验分析耐药趋势。结果 2008-2010年医院感染铜绿假单胞菌分离率为18.78%,为检出细菌首位,且呈上升趋势,其主要分布在干部保健特诊科、重症医学科、血液科;铜绿假单胞菌对头孢曲松、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、头孢唑林、头孢替坦、氨苄西林的总耐药率>70.0%,对妥布霉素、庆大霉素、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、左氧氟沙星、环丙沙星、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、氨曲南的总耐药率<30.0%;Cox-Staurt趋势检验分析,铜绿假单胞菌对氨苄西林、头孢曲松、头孢唑林、头孢替坦、亚胺培南的耐药率呈上升趋势,而对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、头孢他啶、氨曲南、庆大霉素、妥布霉素、环丙沙星、左氧氟沙星和磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率无上升趋势。结论铜绿假单胞菌引起的医院感染越来越严重,应定期进行细菌耐药性监测,以指导临床合理使用抗菌药物,预防控制耐药菌株的产生和流行。; 张世阳连羡玉金继红邱丽心黄辉萍张加勤; 关键词：铜绿假单胞菌细菌耐药性监测医院感染

医院感染甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的SCCmec分型及同源性研究被引量：5: 2014年; 目的研究多重耐药的甲氧西林耐药金葡菌（MRSA）菌株的SCCmec基因分型,并对菌株进行同源性分析。方法纳入26株耐药谱相同的MRSA菌株,采用多重PCR检测SCCmec的分型;应用Rep-PCR法采用DiversiLb系统对菌株进行同源性分析。结果 26株MRSA的SCmec多数为Ⅲ型,占84.6%,另检出Ⅱ型2株、Ⅳ型1株,1株未能分型;未发现I型SCCmec。DiversiLab分析结果显示MRSA可分为10组,同源性介于40%～100%。其中SCCmee-Ⅱ亚型2株完全相同。SCCmec-Ⅲ亚型subtype 1型相似性在90%以上;subtype 3型4株为同一组、MRSA相似性在95%以上;subtype 2型可分为5组,相似性在90%以上。结论医院感染多重耐药的MRSA多数以SCCmec-Ⅲ型为主,医院内存在一定流行,应引起临床医师及感染控制部门重视。; 马晓波侯舒毅徐和平赵元勋张加勤房丽丽宋秀宇; 关键词：甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌多重聚合酶链反应基因分型

胆道感染病原菌的分布及耐药性分析被引量：15: 2014年; 目的了解胆道感染病原菌的分布及其耐药性，为临床使用抗菌药物提供依据。方法医院2008年1月-2012年8月的胆汁标本经BacT／ALERT120全自动血培养仪培养检测，对检出的病原菌采用VITEK-2Compact全自动微生物鉴定药敏仪进行细菌鉴定及药敏分析。结果共分离到病原菌305株，其中革兰阴性杆菌占69．84％，革兰阳性球菌占27．54％，真菌占2．62％，排名前5位病原菌依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、粪肠球菌、屎肠球菌、铜绿假单胞菌，分别占29．18％、12．13％、11．48％、6．89‰、5．90％，大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶的检出率分别为47．19％和21．62％；大肠埃希菌对青霉素类、喹诺酮类、部分第三代头孢菌素类的耐药率较高，为48．86％～69．32％，对阿米卡星、亚胺培南有较低的耐药率；铜绿假单胞菌对阿米卡星、庆大霉素和哌拉西林／他唑巴坦的耐药率较低，〈12．00％，粪肠球菌对利奈唑胺的耐药率为2．94％，未检出对万古霉素、替考拉宁耐药的菌株；屎肠球菌对糖肽类药物的耐药率为4．76％～9．52％。结论医院致胆道感染病原菌以革兰阴性菌为主，混合感染多见，采用对大肠埃希菌耐药率低的广谱抗菌药物用于治疗胆道细菌感染。; 黄加铭张加勤马晓波宋秀宇; 关键词：胆道疾病胆汁耐药性

荧光PCR探针熔解分析法检测质粒介导ampC耐药基因的应用与评价被引量：2: 2016年; 目的探讨多重荧光PCR-探针熔解分析法应用于临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ampC耐药基因的检测方法,并评价该方法的临床应用价值。方法收集医院2009年7月-2010年6月的临床分离菌株,首先采用头孢西丁纸片法进行耐药表型筛选,再同时应用传统PCR技术与荧光PCR-探针熔解曲线法对临床分离菌株进行检测,并对ampC耐药基因扩增产物进行DNA测序。结果经头孢西丁纸片法筛选出176株对头孢西丁不敏感临床分离菌株,其中97株为肺炎克雷伯菌、79株为大肠埃希菌;在176株临床分离株中,荧光PCR-探针熔解分析法检测出36株ampC耐药基因阳性菌株,包括18株DHA型、12株CIT型和5株EBC型,还有1株肺炎克雷伯菌同时含有DHA型和EBC型;而传统PCR技术检出32株ampC耐药基因阳性,两个检测结果的符合率为97.7%;DNA测序后经BLAST比对,荧光PCR-探针熔解分析法检测ampC基因型与所检测目的基因型一致。结论荧光PCR-探针熔解分析法能高效检测出质粒介导ampC耐药基因,其方法简便、敏感性高、特异性强,具有良好的临床应用价值。; 郑港森刘赞赞张加勤宋秀宇李庆阁黄朝阳马晓波房丽丽; 关键词：AMPC酶肺炎克雷伯菌

变异链球菌腺苷磷酸硫酸酶的原核表达及功能研究: 2012年; 目的构建变异链球菌aps基因原核表达载体,表达纯化目的蛋白,继而对其生物学功能进行初步鉴定。方法以变异链球菌UA159株基因组DNA为模板PCR扩增变异链球菌aps基因编码区,插入原核表达载体pASK-IBA43plus,转化E.coli Top 10,无水四环素诱导His-APS蛋白表达,经Ni-NTA纯化后,检测His-APS蛋白腺苷磷酸硫酸酶活性及核糖核酸酶活性。结果 PCR扩增出933bp的aps基因开放读码框,成功构建aps基因原核表达载体pASK-aps,并在E.coli Top 10中诱导表达,SDS-PAGE检测重组His-APS蛋白分子质量单位为38ku,该蛋白在Mg2+及Mn2+存在条件下能水解pAp,且呈时间及浓度依赖性,但不能降解Cy5标记的随机6nt寡核苷酸探针。结论重组His-APS蛋白具有腺苷磷酸硫酸酶活性,呈时间及浓度依赖性,但不具有核糖核酸酶活性。; 张加勤侯香华宋秀宇; 关键词：变异链球菌核糖核酸酶

3年主要革兰阴性菌的耐药性变迁被引量：3: 2014年; 目的：分析临床分离的常见革兰阴性菌的分布及耐药情况，为临床使用抗菌药物提供依据。方法收集2010年1月至2012年12月临床标本中检出的革兰阴性菌，分析其分布及耐药情况。结果3年间共检出革兰阴性菌8258株，前4位是大肠埃希菌（2227株，27．0％），肺炎克雷伯菌（1363株，16．5％），铜绿假单胞菌（1141株，13．8％），鲍曼不动杆菌（1078株，13．1％）。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的总检出率分别为50．6％和38．3％，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南敏感率最高，值得注意的是肺炎克雷伯非ESBLs菌株对大部分三代头孢菌素类的耐药率呈逐年上升趋势。铜绿假单胞菌对氨基糖苷类抗菌药物、头孢吡肟和哌拉西林／他唑巴坦的敏感率均较高，分别为83．0％～96．4％、81．2％～82．8％和90．0％～94．7％，鲍曼不动杆菌对大多数抗菌药物的耐药率有逐年下降趋势。结论临床数据显示，细菌耐药性的变化是不可预测的，连续性监测对动态掌握抗菌药物的耐药趋势以指导抗菌治疗是必要的。; 黄加铭马晓波张加勤宋秀宇; 关键词：革兰阴性菌抗菌药物

弓形虫乳酸脱氢酶LDH2基因启动子的克隆及鉴定: 2013年; 目的克隆弓形虫乳酸脱氢酶LDH2基因启动子并进行初步鉴定。方法 PCR扩增出LDH2基因5′侧翼序列系列截短突变体,定向插入载体pTX3–basic的Kpn I/Xhol I酶切位点之间,转化大肠埃希菌Top 10,氨苄西林筛选,建立重组LDH2基因5′侧翼序列系列截短突变体荧光素酶表达载体。转染刚地弓形虫速殖子,利用荧光素酶检测试剂盒测定所克隆片段的启动转录活性。结果成功扩增出LDH2基因5′侧翼序列系列突变体;系列重组荧光素酶表达质粒经PCR、酶切及测序鉴定正确无误;系列重组荧光素酶表达质粒在弓形虫速殖子中的相对活性与阴性对照pTX3-basic基本相同,而在弓形虫缓殖子中,除pTX3-293和pTX3-193外,其他重组荧光素酶活性均是阴性对照pTX3-basic的40～50倍之多,是阳性对照pTX3-control的1.2～1.5倍,说明插入片段具有较强的启动子活性。结论成功定位并克隆弓形虫LDH2基因启动子,为今后研究LDH2基因上游调控序列提供试验和理论依据。; 张加勤侯香华宋秀宇; 关键词：弓形虫乳酸脱氢酶启动子荧光素酶

重症监护室病原菌分布及耐药性分析被引量：6: 2013年; 目的分析医院重症监护病房(ICU)病原菌分布及耐药性。方法对某三甲医院重症监护病房患者2008年1月至2010年12月病原菌分布和耐药性进行回顾性分析。结果 190例患者中,发生医院感染的47例,发生率24.7%;感染部位以呼吸道为主。细菌构成以革兰阴性杆菌为主(64.7%)。分离菌以铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和鲍曼不动杆菌最多见。鲍曼不动杆菌对亚胺培南、头孢吡肟、氨曲南、环丙沙星、左氧氟沙星及复方新诺明抗生素的耐药率达到60%以上。九成以上的铜绿假单胞菌对环丙沙星、左氧氟沙星、阿米卡星和妥布霉素体外敏感。肺炎克雷伯菌中体外敏感性大于80%的包括左氧氟沙星、妥布霉素、头孢吡肟、亚胺培南。金黄色葡萄球菌对氨苄西林、四环素、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率高于50%,而对万古霉素、奎奴普丁/达福普丁、呋喃妥因和利奈唑胺全部敏感。真菌对5种抗真菌药物的耐药率均小于10%。结论 ICU应定期进行病原菌的分布和耐药性监测,为临床合理用药提供依据。; 赵元勋郑燕青任小英张加勤; 关键词：ICU 病原菌耐药

Cox-Staurt趋势检验分析医院感染鲍曼不动杆菌耐药趋势被引量：5: 2012年; 目的了解医院感染鲍曼不动杆菌流行病学特征和耐药性变化趋势。方法采用Vitek2 COMPACT自动化微生物分析系统对2008—2010年医院感染患者送检的标本进行细菌鉴定和药敏试验,Cox-Staurt趋势检验分析医院感染鲍曼不动杆菌耐药趋势。结果共分离出医院感染鲍曼不动杆菌230株,分离率为14.90%,呈上升趋势,主要来源于痰标本,占83.04%。分布在23个临床科室,其中重症医学科检出最多,占28.26%,对阿米卡星的总耐药率最低,为5.08%,对其余抗菌药物的总耐药率均大于40%,其中呋喃妥因、头孢替坦、氨曲南、头孢曲松、头孢唑啉、氨苄西林的总耐药率>85%。经Cox-Staurt趋势检验分析,对哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、左旋氧氟沙星、妥布霉素、氨苄西林/舒巴坦、头孢吡肟、庆大霉素、环丙沙星、复方磺胺甲噁唑、哌拉西林的耐药率呈上升趋势,而对氨曲南、头孢替坦、头孢唑啉、氨苄西林、呋喃妥因、头孢他啶、头孢曲松、阿米卡星的耐药率无变化趋势。结论医院感染鲍曼不动杆菌分离率越来越高,对多种抗菌药物耐药,且耐药率多呈上升趋势,应加强细菌耐药性监测和抗菌谱分析,以指导临床合理用药。; 张世阳连羡玉金旭红张加勤; 关键词：鲍曼不动杆菌医院感染

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒型AmpC酶基因型的检测分析被引量：7: 2015年; 目的：针对该院临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒型 AmpC 酶基因型进行研究分析。方法收集2011年7月至2012年8月对头孢西丁不敏感无重复临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共176株，采用聚合酶链反应（PCR）法和扩增全基因序列分析大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产 AmpC 酶基因型。结果 PCR 结果显示，AmpC 酶基因（ampC 基因）阳性率为18．2％主要以 DHA 型为主，阳性率为59．4％，CIT 型为37．5％，EBC 为3．1％；其中，大肠埃希菌 ampC 基因阳性率为11．4％，以CIT 型为主，阳性率为77．8％，DHA 型和 EBC 型阳性率均为11．1％；肺炎克雷伯菌 ampC 基因阳性率为23．7％，以 DHA 型为主，阳性率为78．3％，CIT 型为21．7％。基因序列结果显示，DHA 型有18株为 DHA‐1基因型和1株摩根摩根菌 ampC 基因型，一致率97．0％，CIT 型有10株为 CMY‐2基因型，1株 CMY‐42基因型和1株 CMY‐4基因型；EBC 型为阴沟肠杆菌 ampC 基因型，一致率为99．0％。将32株基因序列提交 GenBank ，均被接受，其登录号为 KJ127248～ KJ127279。结论该院临床分离大肠埃希菌 ampC 基因主要以 CMY‐2型为主，而肺炎克雷伯菌主要以 DHA‐1型为主。; 郑港森刘赞赞张加勤黄朝阳马晓波李庆阁宋秀宇; 关键词：Β-内酰胺酶质粒大肠埃希菌肺炎克雷伯菌

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福建省卫生厅青年科研基金(2010-2-90)

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