江苏省杰出青年基金(BK2012029)
- 作品数：6 被引量：44H指数：3
- 相关作者：崔中利王飞董维亮侯颖黄彦更多>>
- 相关机构：南京农业大学江西农业大学河南科技大学更多>>
- 发文基金：江苏省杰出青年基金国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：环境科学与工程生物学更多>>
- Delftia sp.T3-6菌株及其粗酶液对2',6'-甲乙基-2-氯乙酰苯胺的降解被引量：4
- 2014年
- 研究了Delftia sp.T3-6菌株对2’,6’-甲乙基-2-氯乙酰苯胺(CMEPA)的降解特性,以及该菌株胞内酶对CMEPA的酶促特性.结果表明,菌株T3-6对CMEPA有很好的降解性能.反应12 h内,随着CMEPA浓度的增加,反应速度加快;当CMEPA浓度达到500 mg·L-1时,菌体的降解活性受到一定程度的抑制;在菌体接种量为0.5%~5%的范围内,接种量越大,CMEPA的降解转化速率越快.菌株T3-6降解CMEPA的最适温度为30℃,且其在pH 7~10的范围内对500 mg·L-1CMEPA的降解率均可达50%以上.T3-6菌株对CMEPA降解起催化作用的活性酶为胞内酶,该酶的最适反应温度和pH分别为25℃和8.0;该酶的温度稳定性较差,需在20℃以下贮存;但其在4℃下,pH 6~9的缓冲液中均可保持很好的稳定性.
- 侯颖王飞李静泉董维亮崔中利
- 关键词：乙草胺降解特性
- 精噁唑禾草灵降解菌株Acinetobacter sp.T-1的分离鉴定及降解特性研究
- 2013年
- 从长期受精噁唑禾草灵污染的土壤中分离筛选得到了精噁唑禾草灵降解菌T-1,根据生理生化特性和16S rRNA同源性序列分析,将其鉴定为不动杆菌属（Acinetobacter sp.）。菌株T-1能够以精噁唑禾草灵为唯一碳源进行生长,在5 d内对50 mg.L-1精噁唑禾草灵的降解率可达95%以上。T-1降解精噁唑禾草灵的最适温度为37℃,而其在pH5~11的范围内对50 mg.L-1精噁唑禾草灵的降解率均可以达到85%以上。经LC-MS鉴定Acinetobacter sp.T-1降解精噁唑禾草灵的主要产物为精噁唑禾草灵酸,表明菌株T-1对精噁唑禾草灵的降解是通过断裂其酯键形成精噁唑禾草灵酸和乙醇实现的。
- 董维亮侯颖陶健曹慧崔中利
- 关键词：精噁唑禾草灵降解
- Rhodococcus sp.T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶酶学性质及分离纯化被引量：1
- 2015年
- [目的]Rhodococcus sp.T1是一株高效的精恶唑禾草灵（FE）降解菌株,T1菌株可以断裂FE的酯键将其转化为精恶唑禾草灵酸（FA）。对T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶的酶学性质进行研究并对其进行分离纯化,以期为生物修复精恶唑禾草灵污染提供更多的理论依据。[方法]以酯酶的通用底物乙酸-1-萘酯作为定量测定胞内酯酶活力的底物,分析温度和p H值对酯酶活力和稳定性的影响,同时探讨金属离子对酯酶活力的影响;通过硫酸铵沉淀、疏水层析、DEAE离子交换层析和Superdex-200凝胶层析柱组合技术对精恶唑禾草灵酯酶进行分离纯化,计算了纯化过程中酯酶的比活力、纯化倍数和回收率。[结果]胞内酯酶最适反应p H值为8.0,在p H 4.0-10.0内处理24 h活性稳定;最适反应温度为42℃,在温度50℃以下处理30 min活性稳定;1.0 mmol·L^-1Ag^＋对酯酶活力有强烈的抑制作用。纯化后的酯酶比活力从0.058 U·mg^-1提高到21.5 U·mg^-1,纯化倍数为369.5倍,回收率为3%。纯化后的粗酶经SDS-PAGE电泳后至少有4条明显的蛋白条带,通过酶谱确定精恶唑禾草灵酯酶条带的相对分子质量为42.3×10^3。[结论]精恶唑禾草灵酯酶具有较好的酸碱稳定性和热稳定性,在精恶唑禾草灵污染土壤修复中可能具有较好的应用潜力。
- 董维亮侯颖王飞李周坤黄彦崔中利
- 关键词：RHODOCOCCUS精恶唑禾草灵分离纯化酶学性质
- Rhodococcus sp.T3-1菌株降解乙草胺的特性被引量：13
- 2013年
- 以乙草胺为唯一碳源，通过摇瓶培养研究了Rhodococcus sp.T3—1对乙草胺的降解特性．结果表明，菌株T3—1降解乙草胺的最适温度为37℃，且其在pH值6～10的范围内对100mg／L乙草胺的降解率均在96％曲7％之间．该菌株在接种量为5％条件下，14h内可将200mg／L的乙草胺降解95.5％：乙草胺的降解速率与乙草胺初始浓度呈负相关，与菌株T3—1的初始接种量呈正相关．菌株T3-1还可以降解丁草胺，但不能降解丙草胺、异丙草胺和毗草胺．
- 侯颖王飞董维亮崔中利
- 关键词：乙草胺红球菌属降解特性
- 农药污染微生物降解研究及应用进展被引量：24
- 2012年
- 农药污染与人们的日常生活息息相关,一直是科学家关注的环境污染热点问题。微生物因其种类丰富、分布广泛、适应性强和代谢途径多样的特点显现出自身在农药污染治理方面的优势。本文总结了近10年来,南京农业大学农业部农业环境微生物重点开放实验室在农药残留微生物降解方面取得的进展,从降解性微生物资源的分离收集,到微生物降解代谢途径分析、降解过程中的关键基因或基因簇的克隆,及在微生物遗传操作方法 SEFA PCR(self-formed adaptor PCR)、基因工程菌的构建等方面进行了详细论述,旨在为降解性微生物在环境修复、生物转化等方面的应用提供理论和实践依据。
- 崔中利崔利霞黄彦闫新何健李顺鹏
- 关键词：农药污染微生物资源代谢途径基因工程菌
- 罗尔斯顿菌(Ralstonia sp.)T6对三氯吡啶醇污染土壤的修复及能完全矿化毒死蜱工程菌株的构建被引量：3
- 2014年
- 以毒死蜱降解中间代谢产物3，5，6－三氯－2－吡啶醇（TCP）高效降解菌罗尔斯顿菌（Ralstonia sp．）T6为材料，研究其在土壤中对TCP的降解特性。结果表明，温度、接菌量和初始底物浓度对TCP的降解都有影响，T6菌株降解TCP的最适温度为30℃，当土壤含菌量〔以菌落形成单位（CFU）计〕小于10×10^8 kg－1时，降解率随着含菌量的增加而提高，当含菌量超过10×10^8 kg－1时，降解率不再提高。降解率随着TCP 初始浓度的增加而降低，当TCP初始浓度为50～100 mg·kg－1时，6 d内可将50 mg·kg－1 TCP降解80％。利用基因工程手段，将来源于寡养单胞菌（ Stenotrophomonas sp．） DSP－1的甲基对硫磷水解酶基因（ mpd）插入菌株T6基因组16S rRNA基因中，成功构建一株可彻底矿化毒死蜱的重组工程菌株T6－mpd。生长试验结果表明罗尔斯顿菌T6－mpd和T6的生长特性基本一致。对T6－mpd菌株降解毒死蜱的特性研究结果表明，在LB培养基中， T6－mpd对毒死蜱的水解效率与DSP－1基本一致，但在基础盐（MSM）培养基中，T6－mpd在60 h内对50 mg·L－1毒死蜱的降解率仅为36％，显著低于DSP－1。模拟土壤原位修复试验结果表明，在含菌量为10^8 kg－1条件下，T6－mpd在2 d内可将50 mg·kg－1毒死蜱降解64％。认为T6－mpd菌株在毒死蜱残留污染环境修复中具有潜在的应用前景。
- 张扬王飞黄彦崔中利
- 关键词：毒死蜱工程菌株
